بررسی آلودگی به ویروسtorque teno midi virus/small anellovirus (ttmdv/sav) در سرم افراد سالم و افراد آلوده به ویروس های هپاتیت b و c در استان لرستان

در سال 2005 برای اولین بار دو ژنوتیپ از یک ویروس جدید باdna تک زنجیره ای حلقوی در سرم بیماران با سندرم عفونی ویروسی حاد کشف گردید. به دلیل کوچک بودن ژنوم آن در مقایسه با torque teno virus (ttv) و torque teno mini virus (ttmv) آن ها را sav1 (small anellovirus 1) وsav2 (small anellovirus 2) نامیدند و در جنس آنلوویروس از خانواده آنلوویریده قرار دادند.ninomyia و همکاران دریافتند کهttmdv (torque teno midi virus) حد واسط بین ttv و ttmv است و نشان دادند که sav1 و sav2موتانت های حذفی از ttmdv هستند. بنابراین در مطالعات بعدی، این ویروس ها به صورت ttmdv/sav نامگذاری شدند و در جنس سوم خانواده آنلوویریده (gammatorquevirus) قرار گرفتند. ttmdv/sav در سرم افراد آلوده به ویروس هپاتیت c و اهداء کنندگان خون سالم در ایتالیا و فرانسه، در موارد هپاتیت b، هپاتیت c، بیماری تنفسی حاد، بیماری کاوازاکی و پورپورا در کره و در موارد تومور رحم در ایران تشخیص داده شده است. توزیع جغرافیایی ویروس ttmdv/sav به خوبی مشخص نشده است. چون این ویروس ها راه های انتقال مشترکی مانند انتقال خون دارند، امکان عفونت همزمان این ویروس با hcv و hbv وجود دارد. ولی تاکنون تأثیر عفونت ttmdv/sav بر بیماران با هپاتیت b یا c مزمن مشخص نشده است. با در نظر گرفتن اینکه عامل حدود 20-10% از موارد ابتلا به هپاتیت شناخته نشده است و همچنین نقش احتمالی ویروس های دیگر این خانواده به عنوان عوامل موثر در هپاتیت مطالعه شده اند و به دلیل اینکه ویروس ttmdv/sav از طریق فرآورده های خونی انتقال می یابد و می تواند انسان ها را آلوده کند، هدف از این مطالعه تعیین فراوانی ttmdv/sav در سرم افراد آلوده به ویروس های هپاتیت b و c، افراد hiv مثبت و افراد سالم در استان لرستان و تعیین ارتباط احتمالی بین این ویروس ها بود. نود و دو نمونه سرم افراد hiv مثبت، چهل نمونه سرم آلوده به ویروس هپاتیتc ، چهار نمونه سرم آلوده به ویروس هپاتیت b و صد و ده نمونه سرم افراد سالم از آزمایشگاه های پاتوبیولوژی شهر خرم آباد جمع آوری شدند. سپس dna نمونه ها با روش فنول، کلروفرم، ایزوآمیل الکل استخراج شد. برای تعیین ویروس ttmdv/sav از روشpcr آشیانه ای با بکار بردن پرایمر های smas و smar استفاده شد. محصولات مورد انتظار bp441/431 در ژل الکتروفورز مشاهده شدند. توالی ژنوم هفت نمونه به دست آمده ttmdv/savتعیین توالی گردیدند، این توالی ها میزان بالایی از تنوع ژنتیکی (هومولوژی 93-70%) را با توالی های بانک جهانی ژن نشان دادند. همچنین برای توضیح نقش احتمالی ttmdv/sav در بیماری کبدی، آمینوترانسفراز های سرم (ast و (alt با استفاده از کیت زیست- شیمی ایران اندازه گیری شدند. از 40 نمونه آلوده به ویروس هپاتیت c، 4 نمونه آلوده به ویرس هپاتیت b، 92 نمونه hiv و 110 نمونه کنترل به ترتیب، 32 (80%)، 3 (75%)، 75 (5/81%) و 16 (5/14%) مورد از نظر حضور dna ttmdv/sav، مثبت بودند. تفاوت معنی داری در فراوانی ttmdv/sav بین نمونه های کنترل و افرادhiv مثبت، نمونه های کنترل و افراد آلوده به ویروس هپاتیت c و همچنین نمونه های کنترل و افراد آلوده به ویروس هپاتیت b مشاهده شد (p < 0.05). بین افراد آلوده به ویروس ttmdv/sav و افراد غیر آلوده به ویروس ttmdv/sav در موارد آلوده به ویروس هپاتیت c و افراد hiv مثبت، تفاوت معنی داری از نظر سطوح آنزیم های کبدی مشاهده نگردید (p > 0.05). فراوانی بالای ویروس در موارد هپاتیت ممکن است نشان دهنده نقش اتیولوژیک برای ویروس باشد. این فراوانی بیشتر از موارد گزارش شده در جاهای دیگر است که ممکن است به دلیل تفاوت در نمونه های آزمایش شده یا وجود برخی فاکتورها در نمونه های سرم که باعث حضور یا همانندسازی ویروس می شود (احتمالاً هم افزایی دو ویروس)، باشد. در این تحقیق برای اولین بار آلودگی افراد به ttmdv/sav در افراد با عفونت hiv در ایران و در جهان گزارش گردید. فراوانی بالای ویروس ttmdv/sav در افراد hiv مثبت و افراد آلوده به ویروس هپاتیت c در مقایسه با اهداء کنندگان خون سالم، نشان دهنده احتمال انتقال از طریق خون برای این ویروس می باشد. فراوانی بالای (4/81%) این ویروس در بیماران hiv ممکن است نشان دهنده نقش اتیولوژیک برای ویروس باشد، گرچه تأیید این موضوع نیاز به مطالعات بیشتر دارد.