مهندسی نانوبادی های نوترکیب علیه نوروتوکسین تیپ e کلستریدیوم بوتولینوم به منظور ایجاد خصوصیات مطلوب با تکنیک error-prone pcr

بوتولینوم یکی از سمی ترین موادی است که بر روی سیستم اعصاب محیطی تاثیرگذار است که باعث ایجاد فلج شل حاد می شود.بنابراین تشخیص سریع و درمان نوروتوکسین های بوتولینوم ضروری به نظر می رسد.آنتی بادی ها به عنوان ابزارهای مهمی در تحقیقات، تشخیص و درمان بیماری ها شناخته شده اند.نانوبادی های جزء آنتی بادی های زنجیره سنگین شتری هستند که در مقایسه با آنتی بادی های کلاسیک دارای ویژگی های خاصی هستند.بلوغ تمایلی آنتی بادی ها کاربرد آنها را در پزشکی و پروژه های تحقیقاتی تسهیل کرده است.با نمایش قطعات آنتی بادی ها در سطح فاژ، می توان فاژهای مخصوص آنتی ژن را جداسازی نمود. برای انجام غنی سازی مراحل غربالگری چندین بار تکرار می شود.در تحقیق گذشته، نانوبادی اختصاصی علیه نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم نوع e به دست آمد.در این تحقیق هدف بهبود تمایل این نانوبادی به وسیله ی تکنیک زنجیره پلی مراز مستعد خطا است.بدین منظور کتابخانه ای جهشی از ژن نانوبادی علیه نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم نوع e با بهره گیری از واکنش زنجیره پلی مراز مستعد خطا ساخته شد.بدین منظور قطعات vhh کلون شدند و برای انجام مراحل غربالگری بر سطح فاژ به نمایش گذاشته شدند.فاژهای متصل شده باکتری را آلوده می کنند و برای مرحله بعدی غنی سازی و نیز آنالیز میزان اتصال مجددا تکثیر داده می شوند.بعد از انجام فاژ-الایزا و انتخاب چند کلونی، بیان نانوبادی به انجام رسید.نتایج الایزای تمایلی نشان از افزایش 8 درصدی در تمایل این نانوبادی داشت.