بررسی خصوصیات آنزیم فنل اکسیداز در سلول های خونی کرم قوزه پنبه helicoverpa armigera hübner (lepidoptera:noctuidae)

کرم قوزه پنبه helicoverpa armigera hübner. یک آفت بسیار خسارت زا در کشاورزی محسوب می شود و انجام سم پاشی های بی رویه نه تنها جلوی خسارت این آفت را نگرفته بلکه تأثیرات سوء زیادی نیز در زیست محیط برجا گذاشته است. حشرات در محیط زیست با تهدیدات متنوعی شامل بیمارگرها، شکارگرها، پارازیت ها و پارازیتوئید ها مواجه هستند و آنزیم فنل اکسیداز نقش کلیدی را در مقابله با این عوامل دارد. اخیرا مطالعات زیادی روی خصوصیات بیوشیمیایی و مهار کننده های این آنزیم صورت گرفته است تا با هدف قرار دادن و ایجاد اختلال در کار این آنزیم، آفات کشاورزی را کنترل کنند و نیز شرایطی برای جایگزینی حشره کش های جدید و فاقد اثرات سوء زیستی با حشره کش های شیمیایی فراهم شود. در این مطالعه خصوصیات بیوشیمیایی و اثر ترکیبات مختلف روی فعالیت آنزیم فنل اکسیداز سلول های خونی کرم قوزه پنبه بررسی شد. رفتارهای کینتیکی آنزیم در شرایط بهینه فعالیت آنزیمی بررسی شد. میزان حداکثر سرعت فعالیت آنزیم 35/. میکروگرم بر دقیقه بر میلی گرم پروتئین و km 86/1 میلی مول تعیین شد. پایین بودن میزان پارامتر km نشان دهنده تناسب بالای آنزیم و زیر نهشت می باشد. آنزیم فنل اکسیداز در اسیدیته 6 و دمای 30 درجه ی سانتی گراد بیشترین فعالیت را داشته و و در phهای با فعالیت بالای آنزیم (6، 7 و 8)، فعالیت آنزیم تا 24 ساعت پایدار بود و بعد از 24 ساعت کاهش شدیدی نشان داد و همچنین در دماهای با فعالیت بالای آنزیم (25، 30 و 35 درجه ی سانتی گراد)، فعالیت آنزیم بعد از 12 ساعت به طور معنی داری کاهش یافت. در اثر تیمار آنزیم با غلظت های مختلف ترکیبات یونی و سنتزی مشخص شد که یون سدیم در همه غلظت ها روی فعالیت آنزیم فنل اکسیداز تاثیری نداشت (البته در غلظت های بالا فعالیت آنزیم افزایش یافته است ولی تفاوت معنی داری با غلظت شاهد نداشت) یون های پتاسیم در غلظت 4 میلی مولار باعث افزایش 122 درصدی فعالیت آنزیم شد و بین غلظت های 4، 6 و 8 میلی مولار تفاوت معنی داری مشاهده نشد. یون منیزیم فقط در غلظت بالا (8 میلی مولار)، 118 درصد فعالیت را افزایش داد و تا غلظت 6 میلی مولار تفاوت معنی داری با غلظت شاهد نداشت. یون کلسیم در همه غلظت ها باعث افزایش فعالیت آنزیم شد به طوری که غلظت های 2 و 4 میلی مولار (به ترتیب 129 و 130 درصد) با غلظت های 6 و 8 میلی مولار (به ترتیب 174 و 176 درصد) تفاوت معنی داری داشت و با افزایش غلظت، فعالیت آنزیم فنل اکسیداز هم افزایش یافت و همچنین تریس در غلظت های مختلف روی فعالیت آنزیمی بی تاثیر بوده، ولی سدیم دو دسیل سولفات در غلظت 4 میلی مولار، 45 درصد فعالیت را کاهش داد و با بقیه غلظت ها تفاوت معنی داری نداشت. سنجش فعالیت آنزیم فنل اکسیداز در دو سن آخر لاروی (5 و 6) کرم قوزه ی پنبه مشخص کرد که فعالیت آنزیم در سن 5 لاروی تفاوت معنی داری با سن 6 ندارد.