مطالعه ساختار بافتی تخمدان ماهی کپور معمولی و ارزیابی بیان ژن های igf-1 و tgf-?1 در مراحل مختلف تولیدمثلی

تخمدان های 49 ماهی کپور معمولی مولد از فروردین تا مهرماه 1389 نمونه گیری شدند. جهت انجام بخش بافت شناسی تحقیق، قطعات کوچکی از تخمدان ها در محلول ثبوتی بوئن و فرمالین 10% قرار داده شدند. مقاطع بافتی به ضخامت 6- 5 میکرون تهیه شده و توسط h&e، pas، سودان سیاه و تری کروم ماسون رنگ آمیزی شدند. جهت بررسی میزان بیان ژن های igf-1 و tgf-?1 به روشreal- time pcr، قطعات 20- 15 میلی گرمی از تخمدان ها در محلول rna later قرار گرفتند. rna کل بر طبق دستوالعمل کیت استخراج گردید. سپس ساخت cdna از نمونه های rna استخراج شده صورت گرفت. پرایمرهای خاص هر ژن توسط نرم افزار طراحی شدند. مخلوط pcr طبق دستوالعمل کیت در دستگاه real-time pcr قرار گرفت. نتایج توسط نرم افزارrest 2009 آنالیز شدند. فراوانی رونوشت های mrna ژن های igf-1 و tgf-?1 با بتا اکتین به عنوان ژن خانه زاد نرمالیزه شدند. نتایج مشاهدات هیستولوژیک و هیستومتریک تخمدان ماهی کپور معمولی نشان دادند که دوره تولیدمثلی در این ماهی در شرایط آب و هوایی استان خوزستان حداقل 7 ماه به طول می انجامد و تخم ریزی از فروردین تا مهرماه ادامه پیدا می کند. به نظر می رسد که مرحله پیش زرده ای و زرده سازی در این منطقه کوتاه می باشد و ماهیان کپور معمولی به سرعت وارد مرحله بلوغ می شوند. بنابراین به نظر می رسد که این ماهیان در شرایط آب و هوایی استان خوزستان سه بار در سال توانایی تخم ریزی داشته باشند. کمترین و بیشترین قطر فولیکول ها به ترتیب در فولیکول های کروماتین- نوکلئولوس و زرده سازی ثانویه مشاهده شد. زونا پلاسیدا در فولیکول های کورتیکال آلوئولوس ظاهر شده و در فولیکول های زرده سازی ثانویه به بیشترین ضخامت خود رسید. قطر هسته به تدریج افزایش پیدا کرده و در فولیکول های زرده سازی اولیه به بیشترین قطر خود رسید. تعداد فولیکول های در مرحله زرده سازی، درصد پارانشیم و شاخص gsi از مرحله پیش زرده سازی به سمت مرحله زرده سازی و بلوغ به طور معنی داری افزایش پیدا کرد. آنالیز نتایج real-time pcr نشان دادند که میزان بیان ژن هر دو فاکتور رشد igf-1 و tgf-?1 در مرحله پیش زرده سازی به طور معنی داری نسبت به مرحله بلوغ بیشتر بود. به نظر می رسد که هر چند igf-1 در هر سه مرحله از سیکل تولیدمثلی در رشد و نمو تخمدان ها نقش دارد، اما این نقش در مرحله پیش زرده سازی بیشتر از مراحل زرده سازی و بلوغ می باشد. افزایش معنی دار میزان بیان tgf-?1 در مرحله پیش زرده سازی، با یافته های محققین پیشین در خصوص نقش این فاکتور رشد در ممانعت از بلوغ تخمک ماهی مطابقت دارد.