تولید آنتی بادی زنجیره سنگین شتری علیه آنزیم اوره آز هلیکوباکترپیلوری

شترسانان در سرمشان نوع خاصی از ایزوتیپ igg را دارا می باشند که به علت نداشتن زنجیره سبک، آنتی بادی زنجیره سنگین hcab نام گذاری شده اند. بخش متغیر این نوع آنتی بادی(vhh)، دارای ویژگی های منحصر به فردی است که منجر به کاربرد وسیع آن در بیوتکنولوژی شده است. در این مطالعه هدف انتخاب vhh با اختصاصیت بسیار بالا علیه زیرواحد urec آنزیم اوره آز هلیکوباکترپیلوری می باشد. هلیکو باکتر پیلوری یک باکتری گرم منفی است که درلایه مخاطی معده انسان لانه گزینی و ایجاد عفونت می کند. عفونت هلیکوباکترپیلوری با بیماری هایی همچون زخم معده یا دوازدهه و برخی سرطان ها همراه است. باکتری با تولید آنزیم اوره آز ، اوره را به آمونیاک ودی اکسیدکربن تبدیل می کند. آمونیاک تولید شده اسید گاستریک را خنثی و از این طریق امکان کلونیزاسیون باکتری را در معده فراهم می کند. از آنجا که در سرم همه ی بیماران مبتلا به هلیکوباکترپیلوری آنتی بادی علیه زیرواحد urec، آنزیم اوره آز دیده شده است بنابراین یکی از گزینه های مناسب جهت درمان، تولید آنتی بادی بر علیه urec می باشد. بدنبال تزریق urec نوترکیب به شتر و حصول اطمینان از ایمن شدن آن، کتابخانه فاژمیدی تهیه شد. جهت نمایش فاژی پروتئینvhh ، سلولهای حاوی کلون با فاژ کمکی m13k07 آلوده شدند و فاژهای نوترکیب با استفاده از پلی اتیلن گلیکول و کلرید سدیم 5/0 مولار رسوب داده شدند. جهت انتخاب کلونهای صحیح پنج مرحله غربالگری انجام شد. پس از انتخاب بهترین مرحله غربالگری با استفاده از فاژ الیزا، بروی کلونهای مربوط به آن مرحله مجددا فاژ الیزا گذاشته شد و کلونهایی با بیشترین میزان جذب جهت بیان پروتئین در فاز محلول انتخاب شدند. این اولین گزارش از انتخاب، تولید و بیان نانو بادی علیه آنتی ژن urec می باشد. شباهت بسیار زیاد vhh با vh های انسانی، امکان استفاده در ایمنی درمانی را فراهم می کند.