بررسی تحمل به خشکی گیاه تراریخت تنباکوی(nicotiana tabacum l. cv. wisconsin) حاوی ژن p5cs در شرایط کشت در شیشه

پایان نامه
چکیده

از میان تنش های اسموتیک تنش خشکی محدودکننده ترین عامل پراکندگی و حاصلخیزی گیاهان در طبیعت و کشاورزی است. تنش خشکی منجر به اختلال گرادیان های پتانسیل آب، کاهش تورگر، اختلال در یکپارچگی غشا و دناتوراسیون پروتئین ها می شود. مهندسی و دست ورزی موفقیت آمیز مسیرهای متابولیکی در مورد تعدادی از محلول های سازگار همچون پرولین, مانیتول و گلایسین بتائین افرایش تحمل به تنش های خشکی, شوری و سرما را نتیجه داده است. از آنجا که پرولین به عنوان یک اسمولیت مهم در تعدیل فشار اسمزی سلول های تحت تنش خشکی نقش اساسی دارد, انتظار می رود که گیاهان تراریخت حاوی ژن p5cs (پیرولین 5- کربوکسیلات سنتتاز) نیز مقاوم به خشکی باشند. لذا در این مطالعه تحمل به خشکی گیاه تراریخت تنباکو (nicotiana tabacum l.) حاوی ژن p5cs در شرایط کشت در شیشه بررسی شد. بدین ترتیب ابتدا گیاهان تراریخت حاوی ژن p5cs از طریق واکشت بر روی محیط کشت حاوی کانامایسین انتخاب شدند و جهت تأیید نهایی حضور ژن p5cs در این گیاهان از تکنیک pcr با پرایمر اختصاصی nptii (ژن مقاومت به کانامایسین) استفاده شد. سپس گیاهان تراریخت و غیرتراریخت در محیط کشت ms پایه حاوی غلظت های 0, 5, 10, 20 و 30 درصد پلی اتیلن گلایکول (peg) به مدت 28 روز کشت شدند. به منظور تعیین گیاهان مقاوم و حساس به خشکی و مکانیسم های تحمل به خشکی در گیاهان تراریخت حاوی ژن p5cs پارامترهایی از قبیل وزن تر و خشک و میزان رنگیزه های فتوسنتزی (کلروفیل a, b, کل و کارتنوئید), میزان پرولین (ریشه و اندام هوایی), قندهای محلول و احیاکننده, پراکسیداسیون لیپید, فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی (کاتالاز و آسکوربات پراکسیداز) و پروتئین محلول اندازه گیری شد و در نهایت الگوی پروتئینی در گیاهان تراریخت و غیرتراریخت بررسی شد. نتایج نشان داد که کاهش پارامتر های فیزیولوژیکی وزن تر و خشک و نیز رنگیزه های فتوسنتزی در گیاهان تراریخت کمتر از گیاهان غیرتراریخت بوده و زیاد تحت تأثیر تنش خشکی قرار نگرفته است. با افزایش غلظت peg میزان پرولین در ریشه و اندام هوایی به ویژه در غلظت های 10 و 20 به طور معنی داری بیشتر از گیاهان تراریخت بوده است. میزان قندهای محلول نیز در گیاهان تراریخت و غیرتراریخت در غلظت های 10 و 20 درصد افزایش معنی داری نسبت به نمونه شاهد نشان داد. در قندهای احیا تنها در غلظت 10 درصد در گیاهان تراریخت نسبت به نمونه شاهد افزایش معنی دار مشاهده شد و در سایر غلظت ها و نیز در گیاهان غیرتراریخت تفاوت معنی داری نسبت به شاهد مشاهده نشد. فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدان کاتالاز و پراکسیداز در گیاهان تراریخت و غیرتراریخت الگوی یکسانی را تبعیت نمودند و با افزایش غلظت peg, افزایش یافتند. پراکسیداسیون لیپید در غلظت های 10 و 20 درصد در گیاهان تراریخت در مقایسه با گیاهان غیرتراریخت افزایش معنی داری نشان داد. آنالیزهای حاصل از داده های پروتئینی نیز نشان داد که در گیاهان غیرتراریخت در غلظت 30 درصد کاهش پروتئین محلول مشاهده شد در حالی که در گیاهان تراریخت پروتئین بدون تغییر و ثابت بود. نتایج sds-page جهت بررسی تغییرات پروتئین ها تحت تنش خشکی در برگ گیاهان تراریخت و غیرتراریخت نشان دهنده تغییرات الگوی پروتئین های گیاهان شاهد با گیاهان تحت تنش بود. همچنین تفاوت آشکاری در برخی باند ها بین گیاهان تراریخت و غیرتراریخت مشاهده شد.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

اثر تنش خشکی بر گیاهان تنباکوی تراریخت (Nicotiana tabacum L. cv. Wisconsin) حاوی ژن P5CS در شرایط کشت در شیشه

از آنجا که پرولین به عنوان یک اسمولیت مهم در تعدیل فشار اسمزی سلول‌های تحت تنش خشکی نقش اساسی دارد، در این پژوهش، اثر تنش خشکی بر گیاهان تراریخت حاوی ژن P5CS و غیرتراریخت تنباکو مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور گیاهان تراریخت  و غیرتراریخت در محیط کشت MS پایه حاوی غلظت­های 0، 5، 10، 20 و 30 درصد پلی‌اتیلن‌گلایکول به مدت 28 روز کشت شد. به منظور تعیین گیاهان مقاوم و حساس به خشکی و مکانیسم‌های تحم...

متن کامل

اثر تنش خشکی بر گیاهان تنباکوی تراریخت (nicotiana tabacum l. cv. wisconsin) حاوی ژن p۵cs در شرایط کشت در شیشه

از آنجا که پرولین به عنوان یک اسمولیت مهم در تعدیل فشار اسمزی سلول های تحت تنش خشکی نقش اساسی دارد، در این پژوهش، اثر تنش خشکی بر گیاهان تراریخت حاوی ژن p5cs و غیرتراریخت تنباکو مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور گیاهان تراریخت  و غیرتراریخت در محیط کشت ms پایه حاوی غلظت­های 0، 5، 10، 20 و 30 درصد پلی اتیلن گلایکول به مدت 28 روز کشت شد. به منظور تعیین گیاهان مقاوم و حساس به خشکی و مکانیسم های تحم...

متن کامل

اثر کاربرد گلایسین‌بتائین بر تحمل به شوری تنباکو تراریخت (Nicotiana tabacum) حاوی بیان افزوده ژن P5CS

در این مطالعه اثر کاربرد خارجی گلایسین‌ بتائین بر میزان پرولین و ایجاد مقاومت به تنش شوری، گیاهان تنباکوی تراریخت حاوی بیان افزوده ژن P5CS، به صورت تصادفی با سه تکرار در شرایط کشت در شیشه مورد ارزیابی قرار گرفتند. به این منظور گیاهان تراریخت و غیر-تراریخت به محیط کشت MS در شرایط کشت بافت حاوی غلظت‌های صفر، 100و 200 میلی‌مولار نمک NaCl انتقال داده شدند. گیاهچه های تنباکو در مرحله چهار و شش برگی ...

متن کامل

بررسی ارتباط بیان افزوده ژن P5CS و تغییرات برخی آنتی اکسیدان های غیرآنزیمی در گیاه تراریخت تنباکو تحت تنش شوری در شرایط کشت در شیشه

ژن P5CS (پرولین-5- کربوکسیلات-سنتتاز) کد کننده آنزیم کلیدی در مسیر سنتز پرولین است و به عنوان یک اسمولیت باعث افزایش مقاومت گیاه به شوری می‌شود. ابتدا گیاهان تراریخت حاوی ژن P5CS و غیرتراریخت انتخاب گردیدند. حضور ژن P5CS در گیاهان تراریخت شده از تکنیک PCR با پرایمر اختصاصی ژن NPTII:P5CS استفاده شد. به‌منظور بررسی صفات فیزیولوژیکی گیاهان تراریخت و غیرتراریخت به محیط کشت MS خاوی غلظت های 0، 100، ...

متن کامل

بررسی اثر بیان افزوده (overexpression) ژن p5cs بر برخی از پارامترهای فیزیولوژیکی و پروتئومیکس گیاهان تراریخت تنباکو(nicotiana tabacum cv. wisconsin) تحت تنش شوری در شرایط این ویترو

خشکی و شوری تنش های اسمزی و یونی مهمی می با شند که رشد گیاه و تولید محصولات کشاورزی را به طور جدی محدود می کنند. از جمله مکانیسم های سازگاری یا تحمل گیاهان به تنش شوری، افزایش اسمولیت هایی با وزن مولکولی پایین، از قبیل پرولین می باشد. پرولین علاوه بر اینکه به عنوان یک محافظ اسمزی عمل می کند، به عنوان یک منبع انرژی برای تنظیم پتانسیل های احیایی سلول می باشد و تصفیه کننده رادیکال های آزاد از جمله...

15 صفحه اول

مطالعه ی تحمل به شوری گیاه تنباکو (nicotiana plumbaginifolia l.) تراریخت حاوی ژنp5cs در شرایط کشت در شیشه

تنش شوری یکی از مهمترین تنش های محیطی است که موجب کاهش رشد گیاهان و محصولات زراعی در سراسر جهان می شود. انتقال ژن های مربوط به برخی از اسمولیت ها مانند ژن های دخیل در بیوسنتز پرولین منجر به ایجاد ارقام مقاوم به شوری در برخی از گیاهان گردید. با توجه به این که ژن p5cs کد کننده آنزیم کلیدی در مسیر پرولین است و از طرفی این آمینواسید باعث افزایش مقاومت گیاه به شوری می شود، انتظار می رود گیاهان حاوی ...

15 صفحه اول

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه اصفهان

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023