تعیین کمیت باکتری مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس در مدفوع گاوهای هلشتاین با استفاده از روش real-time pcr
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی
- نویسنده مهدی خیرآبادی
- استاد راهنما محمدرضا نصیری عباسعلی ناصریان
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1390
چکیده
باکتری مایکوباکتریوم آویوم پاراتوبرکلوزیس به عنوان عامل بیماری یون شناخته می شود و همچنین ممکن است در شیوع بیماری کرون در انسان نقش داشته باشد. خسارات اقتصادی سنگین حاصل از این بیماری، موجب پیشرفت سنجش های سریع، حساس و خاصی برای شناسایی حیوانات آلوده گردیده است، که برای طرح ریزی راهبرد های منطقی در کنترل گسترش پاراتوبرکلوزیس ضروری می باشد. ژنوم این باکتری از حدود 5 میلیون جفت باز در یک کروموزوم حلقوی با بیش از 4500 ژن تشکیل شده است و طول متوسط هر ژن در آن 1015 جفت باز می باشد. ژن های بیماریزای مرتبط با این باکتری شامل hspx، f57 و is900 هستند که ما در این تحقیق از توالی درون جایگیر is900برای شناسایی پاراتوبرکلوزیس استفاده کردیم. هدف از این مطالعه، توسعه ی تکنیک pcr real-time برای تعیین کمیت باکتری پاراتوبرکلوزیس در نمونه های مدفوع گاوی بود. نمونه های مدفوع از 40 گاو موجود در 2 گله ی گاوهای شیری تجاری و در موقعیت های متفاوت ایران جمع آوری شدند. قطعه ی 400 جفت بازی با استفاده از آغازگرهای p90 و p91 مخصوص جایگاه ژنی is900 از طریق واکنش زنجیره ای پلیمراز به منظور تشخیص پاراتوبرکلوزیس در نمونه های مدفوع تکثیر شد. 10 نمونه مدفوع توسط واکنش زنجیره ای پلیمراز مثبت نشان داده شد. قطعه ی 400 جفت بازی تکثیر شده از جایگاه ژنی is900 در داخل ناقل ptz57r/t همسان سازی شد. پلاسمید نوترکیب، استخراج شد و به عنوان dna استاندارد مورد استفاده قرار گرفت. نتایج با استفاده از منحنی استاندارد حاصل از پلاسمید حاوی is900 (98=% (r2 تعیین کمیت شدند. توانایی کمی سازی در این آزمایش در دامنه ی گسترده ی خطی ( 50 تا 5×105 کپی ) برای ارزیابی تعداد کپی های قطعه ی هدف از پاراتوبرکلوزیس در نمونه های مثبت مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان می-دهد که روش real-time pcr می تواند به عنوان روش جایگزین برای تشخیص سریع تر پاراتوبرکلوزیس معرفی شود. کاربرد سودمند این سنجش، توانایی کمیت سنجی دقیق و سریع تعداد سلول های پاراتوبرکلوزیس در نمونه های ناشناخته می باشد.
منابع مشابه
شناسایی مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس در نمونه های مدفوع گاوهای نژاد هلشتاین– فریزین با استفاده از روش های کشت و مولکولی
مایکو باکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس که به اختصار مایکو باکتریوم پاراتوبرکلوزیس نامیده می شود، عامل بیماری یون است. بیماری یون یا پاراتوبرکلوزیس نوعی التهاب روده مزمن و پیشرونده است که حیوانات اهلی و وحشی، و عمدتا نشخوار کنندگان به آن مبتلا می شوند. هدف اصلی این مطالعه شناسایی اشکال تحت بالینی بیماری یون است، که با دو روش کشت و مولکولی روی نمونه های مدفوع گاوهای نژاد هلشتاین فریزین استا...
متن کاملمطالعه کارآیی روش تشخیصی آزمایش مستقیم میکروبی، PCR900IS و کشت میکروبی در تشخیص باکتری مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس در مدفوع گاوهای به ظاهر سالم
بیماری یون یا پاراتوبرکلوزیس نوعی آنتریت گرانولوماتوزی مزمن در نشخوارکنندگان با عامل مسبب مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس (MAP) میباشد و خسارات اقتصادی فراوانی به صنعت دامپروری به‌خصوص گاوداری شیری در سراسر دنیا وارد میکند. تشخیص MAP در نمونههای بالینی با روش کشت میکروبی به عنوان روش استاندارد طلایی به 16-6 هفته زمان نیاز دارد. از طرف دیگر شناسایی سریع و دقیق گاوهای دفع کنند...
متن کاملبررسی عیار سرمی آنتی بادی ضد مایکوباکتریوم اویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس به روش الایزا در گاوهای شیری هلشتاین
بررسی عیار سرمی آنتی بادی ضد مایکوباکتریوم اویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس به روش الایزا در گاوهای شیری هلشتاین بیماری یون یا (Johnes Disease) از جمله عفونت های مزمن باکتریایی در نشخوار کنندگان می باشد که با توجه به اسهال شدید و طولانی مدتی که ایجاد می کند، باعث تحلیل رفتن بدن دام می شود. هدف از این تحقیق بررسی عیار سرمی آنتی بادی ضد مایکوباکتریوم اویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس (عامل بیماری یون) به...
متن کاملشناسایی مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس در نمونههای مدفوع گاوهای نژاد هلشتاین– فریزین با استفاده از روش‌های کشت و مولکولی
مایکو باکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس که به اختصار مایکو باکتریوم پاراتوبرکلوزیس نامیده می شود، عامل بیماری یون است. بیماری یون یا پاراتوبرکلوزیس نوعی التهاب روده مزمن و پیشرونده است که حیوانات اهلی و وحشی، و عمدتا نشخوار کنندگان به آن مبتلا می شوند. هدف اصلی این مطالعه شناسایی اشکال تحت بالینی بیماری یون است، که با دو روش کشت و مولکولی روی نمونه های مدفوع گاوهای نژاد هلشتاین فریزین...
متن کاملتعیین ژنوتیپ RHD جنین در مادران RhD منفی با استفاده از Real Time PCR
چکیده سابقه و هدف آنتی‌ژن RhD ، نقش مهمی را در ایجاد بیماری همولیتیک جنین و نوزاد ایفا میکند. هدف از انجام این مطالعه، تعیین ژنوتیپ RhD جنین در پلاسمای مادران RhD منفی و هم چنین تعیین جنسیت جنین در هفته‌های نخست بارداری با استفاده از روش Real Time PCR بود. مواد و روش‌ها در این مطالعه توصیفی، 21 نمونه DNA ، از پلاسمای مادران باردارRhD منفی که در سنین بارداری بین 8 تا 39 هفته قرار داشتند...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023