هم کشتی سلول های بنیادی عصبی با سلول های بنیادی مزانشیمی و ارزیابی بیان فاکتورهای نوروتروفیک

هم کشتی سلول های بنیادی با یکدیگر دریچه های جدیدی را فرا روی محققین علم سلول درمانی گشوده است. با این روش میتوان سبب بهبود شرایط کشت و تمایز بهتر سلول های بنیادی شد. فاکتورهای رشد عصبی (neurotrophic factors,ntfs)، مولکول هایی هستند که نقش های بسیار حیاتی در بقا، تکثیر و تمایز سلول های بنیادی دارند. هدف از این تحقیق ارزیابی بیان فاکتورهای نوروتروفیک (‎‎‎‎gdnf‎‎، ‎bdnf‎، ‎‎‎cntf‎،nt3) و سرعت تکثیر سلول های بنیادی عصبی(neural stem cells, (nscs در هم کشتی این سلول ها باسلول های بنیادی مزانشیمی (bone marrow-derived mesenchymal stem cells, bmscs) و نیز توان تولید پروتئین bdnf در nsc و bmsc است. سلول های nsc و bmsc از ‎‎‎‎ موش صحرایی بالغ استخراج شد. جهت جداسازی nscs، ابتدا بخشی از لب گیجگاهی برداشته و پس از هضم مکانیکی با پیپت پاستور استریل باریک شده با شعله آتش و هضم مکانیکی با آنزیم تریپسین و dnase، توده سلولی در محیط dmem/f12 حاوی fbs ده درصد و پنی سیلین-استرپتومایسین یک درصد کشت داده شد. برای جداکردن bmscs، مغز استخوان استخوان های فمور و تیبیا تخلیه و در محیط فوق الذکر کشت داده شد. هم کشتی nscs با bmscs در ظرف ترانس ول و در محیط dmem/f12 حاوی fbs ده درصد و پنی سیلین-استرپتومایسین یک درصد انجام شد. ایمنوسیتوشیمی، سرعت تکثیر به روش هموسایتومتر و نیز بیان فاکتورهای نوروتروفیک به روش rt-pcr در nscs، در همکشتی ‎‎این‎ سلول ها با ‎‎ ‎‎bmscsبررسی گردید.‎ همچنین میزان تولید پروتئین bdnf در bmsc و nsc به روش elisa مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که nscs ‎‎‎‎‎ ‎ و bmscs‎ از نظر بیان ntfs‎‎ دارای الگوی مشابهی هستند. تکثیر nscs در شرایط هم کشتی به طور معنی داری افزایش می یابد. مقایسه نیمه کمی بیان ‎ntfs‎ بین گروه های ‎nsc‎ هم کشتی و کنترل تفاوتی نشان نداد. تولید پروتئین ‎bdnf‎ در ‎‎bmsc‎‎‎ نسبت به nsc افزایش معنی داری دارد. لذا به نظر می رسد جهت مقاصد سلول درمانی، ‎nscهای همکشت شده با bmsc‎‎ نسبت به ‎‎‎‎nsc‎‎‎‎‎های معمولی مناسب تر است.