مطالعه بیان ژن لوکمیای پرومیلوسیتیک در سلول جنسی نر گاو

در مطالعاتی که در سال 1990 بر روی بیماران دارای لوکمی میلوسیتیک حاد (apl) انجام گرفت پروتئین پرومیلوسیتیک لوکمیا (pml) و اجسام هسته ای مرتبط با آن برای اولین بار شناسایی شدند. pml یکی از اجزای کمپلکس چند پروتئینی موجود در هسته به نام اجسام هسته ای pml می باشد. این اجسام تقریبا در سلول های همه پستانداران حضور دارند و یکی از دمین های تحت هسته ای موجود در هسته یوکاریوت ها می باشند. اجسام pml به دلیل طیف گسترده پروتئین هایی که در آن ها قرار می گیرند، در بسیاری از مسیرهای کلیدی سلول شامل رونویسی، پاسخ به عفونت های ویروسی، ثبات ژنوم، آپوپتوز، تنظیم های اپی ژنتیکی، مهار تومور و غیره نقش دارند. با توجه به اینکه هیچ گونه اطلاعاتی در خصوص حضور یا عدم حضور و توالی pml در گاو وجود نداشت، هدف از این تحقیق تعیین بخشی از توالی رونوشت pml و ایزوفرم های احتمالی آن در گاو بود. در ضمن با توجه به نقش احتمالی pml در تنظیم برنامه ژنتیکی در دوره تکوین رویان و حضور اجسام هسته ای pml در مراحل اولیه رویانی پیش از لانه گزینی، برای پاسخ به این سوال که آیا برنامه تنظیم ژنتیکی رویان اولیه حداقل تا چند تقسیم اول تحت کنترل اجسامی می باشد که رونوشت آنها به رونوشت های به ارث رسیده والدی مربوط می شود یا محصول رونوشت برداری ژنوم رویان و ترجمه در دوران تکوین هستند، وجود رونوشت pml در سلول جنسی نر گاو هم مورد بررسی قرار گرفت. در راستای اهداف مد نظر این تحقیق، rna تام کبد و اسپرم و چندین بافت دیگر استخراج شد و طی واکنش رونوشت برداری معکوس و واکنش های زنجیره ای پلیمراز با پرایمرهای اولیه و ثانویه متعدد، وجود رونوشت pml در کبد و چندین بافت دیگر به اثبات رسید. همچنین وجود رونوشت pml در سلول جنسی نر بالغ نیز در گاو مشخص شد. این نتایج مشخص می کند که احتمال انتقال رونوشت pml از اسپرم گاو به رویان اولیه وجود دارد. بررسی های بیشتر به منظور تعیین احتمال انتقال رونوشت pml از سلول جنسی ماده گاو به نتاج و همچنین حضور اجسام در سلول های جنسی نر و ماده و مراحل اولیه تکوین رویان گاو ضروری خواهد بود. نتایج این بررسی عبارتند از: تعیین توالی بخش بزرگی از رونوشت pml در گاو برای اولین بار که به بانک ژنی ncbi گزارش شده است (accession #: hq402594 )، تائید بیان ژن pml در کبد و اسپرم و چندین بافت دیگر گاو، فراهم آمدن مقدمات تعیین کمی ایزوفرم های رونوشت pml در بافت های گاو، و انجام مراحل ابتدایی تعیین توالی بخش های 5’-utr و 3’-utrرونوشت pml در گاو که به کلونینگ کامل رونوشت منجر خواهد شد.