بررسی پروفایل متابولیکی کبد رت در هایپرتیروئیدیسم به کمک طیف سنجی nmr و کمومتریکس

در این پایان نامه به منظور بررسی تاثیرات هایپرتیروییدیسم بر بافت کبد از روش متابولومیکس استفاده شده است.متابولومیکس یک روش بررسی شبکه ای بوده که تاثیرات متقابل متابولیت ها را لحاظ می نماید.مزیت اصلی این روش، نگرش شبکه ای آن می باشد که همزمان به مطالعه و اندازه گیری تعداد زیادی متابولیت می پردازد. هورمون های تیروییدی نقش مهم و تعیین کننده ای در متابولیسم کبدی داردو نیز اختلال در عملکرد هر یک از این بافت ها به شدت بر روی دیگری تاثیر می گذارد. به لحاظ اهمیت تغییرات متابولیتی کبد دراثر اختلالات غده تیرویید، در این پایان نامه اثر هایپر تیروییدی را بر بافت کبد از طریق متابولومیکس مورد بررسی قرار داده ایم. در این مطالعه از تعداد 50 رت نر سالم بالغ که سنی بین 120 تا 130 روز و وزنی معادل 165 تا 150 گرم داشتند استفاده شد . جهت انطباق رت ها با محیط، این حیوانات به مدت 3 روز در الواژ (اتاق حیوانات) ودرقفسه های تمیز با تصفیه مناسب هوا در شرایط 12 ساعت نور و12 ساعت تاریکی نگهداری شدند. به رت های گروه آزمایش به نسبت وزنیbw g100u/ 25 تیروکسین یا t4 به مدت 14 روز درساعت مشخص روز، تزریق شد و به منظور ایجاد شرایط یکسان آزمایش، به رت های گروه کنترل به همین میزان محلول نرمال سالین به مدت 14 روز تزریق شد . 25 رت گروه آزمایش می بایست به مدت 14 روز مورد تزریق قرار گیرند. به 25 رت گروه کنترل نیز به همین مقدار نرمال سالین تزریق نمودیم. صبح روز 15 تمامی رت ها وزن شدند تا وزن نهایی ثبت گردد. بلافاصله پس از وزن گیری رت ها و ثبت وزن ها ابتدا رت های گروه آزمایش وسپس رت های گروه کنترل را به منظور استخراج بافت کبد تشریح نمودیم.سپس کبد ها توسط نیتروژن مایع، پودر و منجمد شده و بعد از آن کبد نمونه ها در فریز دمای 85- درجه سانتی گراد قرار داده شد. برای استخراج ترکیبی متابولیت های قطبی وغیر قطبی استفاده از روش متانول - کلروفرم استفاده نمودیم.سپس نمونه ها برای طیف سنجی nmr توسط محلول های مربوطه،آماده شده و به nmr منتقل شدند. پس از آن، طیف های nmr حاصله، توسط کد محاسباتیprometab پروسس شده و پس از انجام آنالیز اجزای اصلی (pca )،مشاهده گردید که 35 متابولیت کبدی تغییر یافتند. بدین ترتیب توسط یک مطالعه شبکه ای این نتیجه حاصل گردید که در حالت هاپر تیروییدیسم،35 متابولیت از متابولیت های کبدی نسبت به حالت نرمال تغییر می یابد.