تاثیر گونادوتروپین ها و استرادیول17بتا بر بیان ژن فاکتورهای رشد شبه انسولین 1و2 و فاکتور رشد تغییرشکل دهنده آلفا در سلولهای اویداکت بز

پایان نامه
چکیده

پیشرفتهای سریع حاصل شده در اصلاح نژاد دامهای اهلی تا حدود زیادی مدیون به کارگیری تکنیک های نوین تولید مثلی می باشد. نگهداری تخمک های بارور شده در شرایط آزمایشگاهی، استفاده از آن برای انتقال جنین و یا تولید جنین به روش آزمایشگاهی با تقلید و اطلاعات به دست آمده از موجود زنده انجام می شود. لذا هرچه شرایط محیط طبیعی دستگاه تولید مثلی موجود زنده بهتر شناخته شود، موفقیت های آزمایشگاهی بیشتر خواهد بود. در این پژوهش به منظور بررسی اثر گونادوتروپین ها و استرادیول 17 بتا بر بیان ژنهای igf-i، igf-ii و tgf? از سلولهای اپیتلیال اویداکت بز استفاده شد. در این پژوهش اویداکت بزها پس از جداسازی از لاشه بزهای تازه کشتار شده در pbs حاوی جنتامایسین شستشو داده شد و سپس در دمای 4 درجه سانتیگراد از کشتارگاه به آزمایشگاه منتقل گردید. در آزمایشگاه سلولهای اپیتلیال مجرای اویداکت جمع آوری و در محیط کشت m199 دوبار شستشو داده شدند. به منظور بررسی اثر هورمونهای ذکر شده بر بیان ژنهای igf-i، igf-ii و tgf?، آزمایشات لازم در چهار تیمار که عبارت بودند از: تیمار شاهد شامل سلولهای اپیتلیال کشت در محیط کشت tcm199 حاوی ده درصد fbs و تیمارهای بعدی شامل سه تیمار که دارای شرایط تیمار شاهد بودند ولی به یکی از آنها 10 نانوگرم استرادیول17 بتا و به بعدی 1/0 واحد بین المللی lh و fsh و به تیمار آخری 1/0 واحد بین المللی lh و fsh و 10 نانوگرم استرادیول 17بتا اضافه گردید. سلولها در ظروف کشت چهارخانه ای و 37 درجه سانتیگراد و 5 درصد co2 کشت داده شدند. سلولها که شامل سلولهای مژه دار و ترشحی بودند پس از 24 ساعت به کف ظرف کشت چسبیده و شروع به رشد کردند. در طی رشد سلولهای مژه دار بدون مژه شدند و مورفولوژی سلولهای ترشحی را پیدا کردند. پس از گذشت 90 ساعت سلولها تمام کف ظرف کشت را پوشاندند. جهت استخراج rna، سلولها در مراحل 24 و 48 و 90-72 ساعت با انجام تیمار تریپسین برداشت شدند. از rnaی استخراج شده با استفاده از پرایمرهای تصادفی هگزامر cdna تهیه گردید. کلیه نمونه ها با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و انجام واکنش pcr برای حضور و یا عدم حضور cdna مربوط به ژنهای igf-i، igf-ii و tgf? و ژن خانه دار بتااکتین مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج بدست آمده نشان داد که سلولهای اویداکت در حضور هر یک از هورمونهای گونادوتروپین و استرادیول 17 بتا به خوبی رشد کرده و ژنهای igf-i، igf-ii و tgf? در همه تیمارها بیان شد. میزان بیان ژن igf-i در حضور هورمونهای گونادوتروپین و استرادیول 17بتا افزایش پیدا کرد. به دلیل اینکه igf-i در تکثیر و تمایز سلولهای جنینی تاثیر دارد این یافته می تواند بعد از بررسی سایر جوانب مطلب، در تهیه محیط های کشت جنین مورد توجه قرار گیرد.

منابع مشابه

بررسی شاخص‌های فاکتور رشد آندوتلیال عروقی، لپتین و فاکتور رشد شبه انسولین در رتینوپاتی نارسی

Background & Aims: Retinopathy of prematurity (ROP) is one of the most causes of retinal detachment and blindness. Although many studies have been conducted on the pathophysiology of ROP, the exact mechanism is yet under investigation. This study aimed at evaluating the role of serum vascular endothelial growth factor (VEGF), insulin like growth factor-I (IGF-I), and its binding protein (IGFBP-...

متن کامل

بررسی ارتباط پلی مورفیسم ژن فاکتور رشد شبه انسولین 1 با سرطان روده بزرگ

زمینه و هدف: فاکتور رشد شبه انسولین 1، نقش مهمی در تقسیم رشد سلولی و مرگ برنامه‌ریزی شده سلول ایفا می‌کند. پلی‌مورفیسم در این ژن سطح این هورمون راتغییر می دهد. این تغییر در افزایش خطر ابتلا به سرطان روده بزرگ مؤثر است. هدف از این مطالعه، ارزیابی میزان شیوع پلی‌مورفیسم ژن فاکتور رشد شبه انسولین 5742612rs در جامعه ایران و بررسی نقش این پلی‌مورفیسم در افزایش خطر ابتلا به سرطان روده بزرگ است. مواد ...

متن کامل

تاثیر هورمونهای گونادوتروپین و استرادیول بر بیان ژن های فاکتورهای رشد

راویداکت اندام هدفی برای هورمون های استروژن و پروژسترون تولید شده در پاسخ به هورمون های lhو fsh تخمدان است. بنظر می رسد عمل پرو/زسترون وابسته به نوع سلول مورد استفاده در هم کشتی باشد. استروژن ممکن است بر رشد اولیه جنین از طریق مکانیسم های مختلف که توسط نوع سلولهای موجود واسطه می شود تاثیر داشته باشد. استروئیدها تنظیم کننده های اصلی عملکرد سلولی شامل رشد و تمایز در لوله تناسلی هستند. اثرات هورمو...

15 صفحه اول

بررسی شاخص های فاکتور رشد آندوتلیال عروقی، لپتین و فاکتور رشد شبه انسولین در رتینوپاتی نارسی

مقدمه و هدف: رتینوپاتی نارسی ( rop ) از مهم ترین علل جداشدگی شبکیه و کوری است. گرچه در زمینه پاتوفیزیولوژی رتینوپاتی نارسی تاکنون مطالعات بسیاری صورت پذیرفته، ولی مکانیسم دقیق آن هنوز مشخص نیست. هدف از این مطالعه بررسی نقش فاکتور رشد اندوتلیال عروقی ( vegf )، فاکتور رشد شبه انسولین ( igf-i )و رسپتور آن igfbp-3 و لپتین در رتینوپاتی نارسی است.   مواد و روش ها: در این مطالعه مورد-شاهدی، 30 نوزاد ن...

متن کامل

بررسی اثرات روزهداری بر فاکتور رشد شبه انسولین (IGF-1) و LDL در بالغین سالم

سابقه و هدف: روزه د اری ماه رمضان یک الگوی منظم پرهیز از غذا در مسلمانان جهان است. اثرات محرومیت طولانی از غذا و روز ه داری ماه رمضان بر بسیاری از فاکتورها از جمله لیپوپروتئینهای کم چگال ( LDL ) یکسان نمی باشد. در مورد فاکتور رشد شبه انسولین ( IGF-1 ) هم گزارشی وجود ندارد. این مطالعه با هدف بررسی اثر روز ه داری در ماه رمضان بر میزان LDL و IGF-1 و ارتباط آنها انجام گرفته است. مواد و روش‌ها: 132 ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زنجان

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023