ویژگیهای فنوتیپی و زنوتیپی باکتریهای عامل پژمردگی یونجه در استان همدان

: استان همدان به علت داشتن شرایط آب و هوایی مناسب یکی از مهم ترین مناطق کشت یونجه در ایران است. چندین آفت و بیماری عملکرد یونجه را دچار محدودیت کرده و سبب خسارت های زیادی می شود. یکی از بیماری های مهم این محصول، بیماری پژمردگی باکتریایی یونجه است. اهداف این تحقیق شناسایی عوامل این بیماری وتعیین تنوع ژنتیکی استرین های آن ها در استان همدان است. جهت انجام این تحقیق گیاهان بیمار دارای علائم پژمردگی، کلروز، کوتاهی قد، بدشکلی برگ ها و پوسیدگی محل طوقه و ریشه را نشان می دادند و آوندهای چوبی رنگ قهوه ای داشتند از مزارع مختلف یونجه استان همدان گردآوری شدند. 15 استرین باکتری clavibacter michiganensis subsp. insidiosus و 10 استرین باکتری pseudomonas viridiflava برای بررسی های بیشتر انتخاب شدند. بیماری زایی این استرین ها اثبات شد. بیماری زایی، تنوع استرین ها، الگوی پروتئین های محلول سلولی و ویژگی های فنوتیپی استرین ها بر اساس روش های استاندارد باکتری شناسی بررسی شد. dna استرین ها استخراج شد. از پرایمرهای اختصاصی برای شناسایی استرین ها استفاده شد. محصول pcr توسط چهار آنزیم برشی ecori، cfoi، haeiii و mspi هضم و برای رسم دندروگرام، قطعات حاصل از pcr-rflp امتیاز بندی و محاسبه با نرم افزار ntsys انجام شد. از 14 پرایمرهای تصادفی در نشانگر rapd استفاده شد. نتایج بیماری زایی نشان داد که استرین ها علائم پژمردگی و زردی و پوسیدگی در محل طوقه و ریشه بوته ها ایجاد می کردند. تعیین الگوی پروتئینی استرین ها منجر به تفکیک استرین ها و مشخص شدن تفاوت ها و شباهت های پروتئینی آن ها شد. نتایج آزمون های فنوتیپی مطابق با نتایج ثبت شده در منابع استاندارد باکتری شناسی بود. نتایج آزمون مقایسه بیماری زایی استرین ها، تفاوت های استرین های جمع آوری شده از مناطق مختلف را در ایجاد خسارت روی بوته ها مشخص کرد. نتایج استفاده از پرایمرهای اختصاصی برای شناسایی استرین ها، نتایج آزمون های فنوتیپی را تأیید کرد و منجر به ایجاد اطمینان از وجود باکتری های موردنظر شد. نتایج آزمون های rapd و rflp، تنوع ژنتیکی استرین های باکتری های clavibacter michiganensis subsp. insidiosus و pseudomonas viridiflava را نشان می دادند. این تحقیق اولین گزارش از وجود باکتری clavibacter michiganensis subsp. insidiosus از ایران و اولین گزارش از وجود باکتری pseudomonas viridiflava روی یونجه از ایران است.