تخلیص و تعیین ویژگیهای آنزیم های آمیلولیتیک سویه های بومی زانتوموناس جدا شده از خاک

گونه های زانتوموناس کمپستریس به کمک غربالگری از خاک کرج، ایران جدا سازی شدند. این گونه های جدا شده به وسیله روش نیمه کمی از نظر توانایی تولید آمیلاز مقایسه شدند که سرانجام گونه زانتوموناس کمپستریس sam0302 انتخاب شد. آمیلاز به کمک روش رسوبدهی با آمونیوم سولفات و کروماتوگرافی تعویض آنیونی تخلیص شد. هموژنی بخش خالص شده توسط الکتروفورز ژل پلی اکریلامید بررسی شد و سپس وزن مولکولی آن 65 کیلو دالتون تعیین شد. دما و ph بهینه به ترتیب 47 درجه سانتیگراد و 1/6 مشخص شد. کاتیون های کلسیم پایداری دمایی آنزیم را که در 47 درجه سانتیگراد پایدار بود را افزایش داد، ولی حدود 90% فعالیت آن پس از 30 دقیقه در 1/6 = ph در 60 درجه سانتیگراد از بین رفت. به علاوه، مقادیر ثابت میکائیلیس و سرعت ماکزیمم آنزیم خالص شده در نشاسته محلول( دمای 45 درجه سانتیگراد، 1/6=ph ) به ترتیب 3/4 mg/mlو 2/4 µmol/min محاسبه گردید.