بررسی اثر پپتید نشانه پروتئین لوسیفراز gaussia princeps بر بیان ترشحی فاکتور انعقادی ix انسانی دررده سلولی cho
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری
- نویسنده مهدی قربانی
- استاد راهنما علیرضا زمردی پور
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1389
چکیده
افزایش کارآیی فرآیند ترشح بوسیله طراحی و یا انتخاب یک پپتید نشانه مناسب، می تواند به عنوان راهکاری جدید برای افزایش بیان پروتئین های نوترکیب در سامانه های بیانی هترولوگ مورد استفاده قرار گیرد. در ارتباط با بهینه سازی بیان فاکتور 9 انعقادی انسانی در رده های سلولی پستانداران، اثر پپتید نشانه های پروتئین های لوسیفراز از جاندار دریایی به نام gaussia princeps در مقایسه با عملکرد پپتید نشانه بومی فاکتور 9 انسانی و فاکتور انعقادی 7 انسانی بر تولید و ترشح فاکتور 9 مورد مطالعه قرار گرفت. بر مبنای بررسی های نرم افزاری برای پردازش پپتید نشانه های بکار گرفته شده و بهینه سازی توالی کننده پپتید نشانه لوسیفراز، سازه های حاوی توالی رمز کننده این پپتید نشانه ها به همراه ناحیه رمز کننده فاکتور 9 طراحی و ساخته شد. پس از انتقال سازه های نوترکیب به سلول های سلول های hek-293t و cho-k1 به ترتیب برای بیان گذرا و پایدار، حضور فاکتور 9 انسانی در محیط های کشت هر یک از آن ها در زمان های مختلف بعد از ترانسفکشن با روشهای الایزا، تست انعقادی مورد بررسی قرار گرفت. فرآیند رونویسی از سازه های مختلف در هر یک از حالات بیانی گذرا و پایدار با روش rt-pcr مورد تائید قرار گرفت. در مجموع، هم در شرایط گذرا و هم شرایط پایدار پپتید نشانه های گرفته شده از لوسیفراز gaussia princeps و فاکتور 7 انسانی، در مقایسه با پپتید نشانه بومی فاکتور 9، در شرایط یکسان، کارآیی بالاتری را برای ترشح فاکتور 9 انسانی نشان دادند. در عین حال بیشترین سطح بیان فاکتور 9 زمانی بدست آمد که پپتید نشانه لوسیفراز در حالت گذرا مورد استفاده قرار گرفت. از نتایج بدست آمده میتوان برای بهبود بیان/ترشح فاکتور 9 در سامانه های بیانی مختلف بهره برد.
منابع مشابه
جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO
جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO راحله حلبیان1، ناصر شاگردی اسماعیلی2، آرزو اوودی2، ناصر مسروری3، دکتر ناصر امیری‌زاده4، دکتر کامران موسوی حسینی5، دکتر احمد قره‌باغیان6، دکتر حوری رضوان7، دکتر محمد علی جلیلی8، دکتر مهریار حبیبی رودکنار9 چکیده سابقه و هدف فاکتور VII ، یک گلیکوپروتئین پلاسمایی است که در آبشار انعقادی تشکیل فیبرین، شرکت دارد....
متن کاملجداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور vii انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی cho
جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور vii انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی cho راحله حلبیان1، ناصر شاگردی اسماعیلی2، آرزو اوودی2، ناصر مسروری3، دکتر ناصر امیری زاده4، دکتر کامران موسوی حسینی5، دکتر احمد قره باغیان6، دکتر حوری رضوان7، دکتر محمد علی جلیلی8، دکتر مهریار حبیبی رودکنار9 چکیده سابقه و هدف فاکتور vii ، یک گلیکوپروتئین پلاسمایی است که در آبشار انعقادی تشکیل فیبرین، شرکت دارد. فاکتور vii...
متن کاملکلون سازی و بیان ترشحی فاکتور رشد بتا-NGF انسانی با استفاده از پپتید نشانه ی اصلاح شده ی آنزیم آلفا آمیلاز باسیلوس لیکنی فورمیس بومی ایران
فاکتور رشد عصبی(NGF) عضوی شناخته شده از خانواده ی پروتئین های نوروتروفین است که در درمان بیماری هایی مانند مولتی پل اسکلروزیس و آلزایمر بکار گرفته می شود. تولید پروتئین نوترکیب در E. coli دارای معایب خاصی است که شکل گیری اینکلوژن بادی و عدم شکل گیری پیوندهای دی سولفیدی درسیتوپلاسم در درجه اول قرار دارند .بنابراین ما به منظور هدایت β-NGF نوترکیب تولید شده به سمت پری پلاسم، استفاده از پپتید نشانه...
متن کاملبررسی تاثیر جهش در ناحیه پروپپتید بر بیان فاکتور IX انسانی
فاکتور IX بعنوان یک فاکتور انعقاد خون و وابسته به ویتامین K، برای عملکرد بیولوژیک خود نیاز به تغییرات پس از ترجمه از جمله گاماکربوکسیلاسیون دارد. گاماکربوکسیلاسیون توسط آنزیمی به نام گاماکربوکسیلاز کاتالیز می شود و پروپپتید پروتئین های وابسته به ویتامین K، اولین مکان شناسایی گاماکربوسیلاز می باشند. اسیدهای آمینه خاص در این توالی پروپپتیدی مسئول تفاوت تمایل آنزیم برای گاماکربوسیلاز هستند. هرچه م...
متن کاملاستفاده از اینترون 1 کوتاه شده فاکتور 9 انسان و پپتید نشانه لوسیفراز برای بیان فاکتور 9 در سلول های cho
هدف این پژوهش ، افزایش بیان فاکتور 9 خونی بوده و بدین منظور از اینترون کوتاه شده فاکتور 9 انسانی برای افزایش بیان فاکتور 9 انعقادی انسان در سلول های کشت شده پستانداران استفاده شد.
بررسی تأثیر استفاده از پپتید نشانه پروترومبین انسانی بر کارآیی ترشح فاکتور ۹ انسانی در رده سلولی hek۲۹۳t
هدف: بهطور عمده پروتئینهای یوکاریوتی دارای پپتید نشانه هستند که نه تنها نقش محوری در کارآیی ترشح دارند بلکه در بیان پروتئین نیز اهمیت دارند. فاکتور 9 انعقادی، گلیکوپروتئینی است که نقش محوری در مسیر انعقاد خون ایفا میکند. نقص یا کاهش تولید فاکتور 9 منجر به بیماری هموفیلی b می شود. در این پژوهش، با هدف افزایش و کارآیی ترشح پروتئین فاکتور 9، عملکرد پپتید نشانه پروترومبین انسانی در سامانه بیانی ...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023