بررسی تنوع ژنتیکی و شیمیایی کلپوره استان کرمان با استفاده از نشانگر rapd و روشgc/ms

چکیده به منظور بررسی تنوع ژنتیکی وشیمیایی ژرم پلاسم کلپوره teucrium polium تعداد 15 ژنوتیپ از مناطق مختلف استان کرمان جمع آوری شد و دور از نور ،در دمای اتاق نگه داری شدند.به منظور بررسی شیمیایی ،از نمونه های مورد نظر با استفاده از روش تقطیر با آب توسط دستگاه کلونجر اسانس گیری به عمل آمد و با استفاده از دستگاه هایgcوgc/ms تجزیه وشناسایی اسانس انجام شد داده های حاصل از نتایج gc/ms توسط نرم افزار spss آنالیز و دندروگرام مربوطه رسم گردید.بر این اساس نمونه های مورد نظر در سه گروه طبقه بندی شدند. نتایج حاصل از gc/ms در ژنوتیپ های موبوط به کرمان، زرند،راور،کوهبنان، شهربابک،عنبرآباد و باغین نشان داد که در همه نمونه ها 100%مواد شناسایی شده است.به استثناء نمونه زرند که 92/98%از مواد شناسایی شد.همچنین نتایج نشان داد،که ترکیبات عمده اسانس درنمونه زرند آلفا پینن17/21%، بتا پینن 96/9%،وترانس وربنول 83/9% ودر اسانس مربوط به نمونه کوهبنان ،آلفا پینن48/26%،بتا پینن88/11%، میرسن 14/11%ودر اسانس مربوط به نمونه باغین آلفا پینن57/19%ترانس وربنول 30/12% پینو کارونول27/8% ودر اسانس مربوط به شهربابک،آلفا پینن91/25%بتا پینن11/12%،ترانس وربنول62/9%ودر اسانس مربوط به عنبر آباد ،ترانس وربنول 05/14%، سپاتولنول28/11% ،اکسید کاریوفیلن26/9% ودر نمونه مربوط به راور،آلفا پینن89/21%،بتا پینن90/9% ،میرسن86/8%ودر نمونه مربوط به کرمان ،آلفاپینن 30/13%، ترانس وربنول 89/11%، بتا پینن14/8%شناسایی شدند.بطور کلی در اسانس زرند، 20ترکیب ،در اسانس کوهبنان19 ترکیب ، در اسانس با غین 22ترکیب ،در اسانس شهربابک 20ترکیب، ودر اسانس عنبر آباد 28ترکیب ،در اسانس راور 24 ترکیب،ودر اسانس کرمان24ترکیب وجود داشت. در آزمایشگاه با استفاده ار روش ctab، استخراج dna صورت گرفت. به منظور بررسی مولکولی از 15 آغازگر rapd جهت انجام pcr، استفاده شد. پس از انجام الکتروفورز 312باند ایجاد شد که در محدوده 230 تا2300 جفت باز قرار داشتند که از این تعداد 289 باند (2/92%) چند شکلی نشان دادند. اطلاعات بدست آمده توسط نرم افزارntsys و به روشupgma با ضریب تشابه دایس آنالیز شدند.تجزیه ی کلاستر بدست آمده ، 15 ژنوتیپ مورد مطالعه را در چهار گروه اصلی قرار داد.گروه اول شامل ژنوتیپ های رفسنجان،شهربابک، سرچشمه،دلفارد ،باغین،زرند،کرمان،راور،بافت و کوهبنان ،گروه دوم داوران، گروه سوم ژنوتیپ های سیرجان، شهداد و عنبرآباد و گروه چهارم راین بود. تجزیه ی به مولفه های اصلی بر روی داده های حاصل از rapd انجام و پلات های دو بعدی و سه بعدی حاصل رسم شد.که گروه بندی بدست آمده از پلات های دو بعدی و سه بعدی با گروه بندی خوشه ای نسبتاً تطابق داشت. به طور کلی مقایسه ترکیبات تشکیل دهنده اسانس در جمعیت های مطالعه شده نشان داد که اسانس این هفت جمعیت از لحاظ کمی و کیفی باهم تفاوت هایی دارند که امر می تواند ناشی از تفاوت اکولوژیکی مناطق رویش هفت جمعیت مانند دما،رطوبت،ارتفاع از سطح دریا و سایر عوامل خاکی و جغرافیایی و ژنتیکی باشد. همچنین مشخص شد روشrapdو روشهای شیمیایی(gc,gc/ms) روشهای مناسب جهت بررسی تنوع ژنتیکی و شیمیایی ژرم پلاسم کلپوره است.