بررسی پراکنش، سبب شناسی و تنوع میزبانی بیماری سوختگی آتشی درختان میوه ی دانه دار در استان فارس

از اواخر فروردین سال 1385 تا شهریور سال 1386 باغات میوه ی استان فارس شامل سپیدان ، نیریز ، زرقان (لپویی و شهرک جوادیه) ، دزکرد و دشت بکان، چندین باغ واقع در مناطق مختلف شیراز شامل بلوارچمران، شهر صدرا ، خوابگاه ارم و باجگاه (دانشکده ی کشاورزی) هم چنین چندین باغ در مناطق مختلف استان کهکیلویه و بویراحمد شامل یاسوج ، کاه کن ، سی سخت و کریک مورد بازدید قرار گرفتند و از درختان سیب ، به و گلابی دارای علائم سوختگی آتشی نمونه برداری شد. تعداد چهل وهفت جدایه ی باکتری با استفاده از محیط کشت های آگار غذایی وcct از بافت های آلوده جدا و براساس آزمون های استاندارد باکتری شناسی به عنوان (ea) erwinia amylovora تشخیص داده شدند. جدایه ها از نظر خصوصیات فنوتیپی، بیماری زایی، اندازه ی قطعات dna تکثیر شده در حضور آغازگر اختصاصی a/b در واکنش زنجیره ای پلی مراز (pcr) و تنوع نقوش حاصل از محصولات واکنش rep-pcr با سه آغازگر rep ، eric و box مورد مقایسه قرار گرفتند. کلیه ی جدایه ها گرم منفی، اکسیداز منفی، کاتالاز مثبت و بی هوازی اختیاری بودند. روی محیط کشت آگارغذایی پرگنه های براق، گرد، محدب و کرم رنگ و روی محیط cct پرگنه های آبی کم رنگ، براق با حاشیه ی مشخص ایجاد کردند. جدایه ها قادر به ایجاد واکنش فوق حساسیت در توتون، تولید لوان، ذوب ژلاتین، تولید استوئین و تولید مواد احیاء کننده از ساکاروز بودند ولی هیچ یک از جدایه ها قادر به تولید رنگدانه ی فلورسنت روی محیط کشت ydc ، هیدرولیز توئین، هیدرولیز ژلاتین، تولید لستیناز، رشد در 39 درجه ی سانتی گراد و تولید اوره آز نبودند. اکثر جدایه ها در آزمون تصاعد گاز از گلوکز واکنش مثبت نشان دادند و تنها تعداد معدودی از آن ها توانایی تولید رنگدانه ی متالیک روی محیط کشت emb و تولید اندول را داشتند. کلیه ی جدایه ها قادر به استفاده از گلوکز و سوربیتول به عنوان منبع کربن بودند و از ساکاروز، فروکتوز، گالاکتوز، رایبوز و تری هالوز اسید تولید کردند هم چنین قادر به مصرف سیترات و لاکتات بودند در حالی که به ندرت توانستند از اتانول، آدونیتول، لاکتوز و نشاسته اسید تولید کرده یا از اینوزیتول و دولسیتول استفاده کنند. اکثر جدایه ها در تولید اسید از آرابینوز و مانیتول و استفاده از گلیسرین واکنش مثبت نشان دادند. در مایه زنی روی نهال های سیب، به و گلابی علائم خشکیدگی در برگ ها و سرعصایی شدن دم برگ ها ایجاد شد و در مایه زنی میوه های نارس گلابی لکه های قهوه ای تاسیاه در اطراف ناحیه ی مایه زنی شده ایجاد گردید. در آزمون pcr، تمام جدایه ها که بر اساس آزمون های باکتری شناسی و بیماری زایی به عنوان ea تشخیص داده شده بودند با جفت آغازگر اختصاصی a/b قطعه ی قابل انتظار 1000 جفت بازی را تولید کردند. در واکنش rep-pcr یازده جدایه ی نماینده که بر اساس اساس آزمون های باکتری شناسی، بیماری زایی و واکنش زنجیره ای پلی مراز به عنوان ea تشخیص داده شده بودند قطعات متفاوتی از لحاظ اندازه تولید کردند که بررسی نتایج حاصل از تجزیه و تحلیل آماری داده ها با نرم افزارntsys-pc version 2.02 همگن بودن جدایه های این باکتری از میزبان های مختلف را نشان داد.