بررسی آنتی ژن های مسئول پاسخ ایمنی سلولی (cmi) در مایکوباکتریوم توبرکولوزیس عامل بیماری سل

هدف از این تحقیق بررسی آنتی ژنهای مسئول پاسخ ایمن سلولی (cmi) در مایکوباکتریوم تربوکلوزیس عامل بیماری سل بود، بدین منظور دوسویه استاندارد h37ra , h37rv روی محیط اصلاح شدهء سرتون (modified sauton) کشت داده شدند. پس از رشد لازم، باکتریها از محیط کشت جمع آوری و با استفاده از امواج ماوراء صوت (ultrasonic treatment) متلاشی شدند. استفاده از روش کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون با ژل سفاکریل دارای قدرت تفکیک کنندگی بالا (s200-hr) وجود هشت مولکول مختلف تقریبا" مشابه را در دو نوع سویه با وزنهای مولکولی در مقایسه با مولکول های استاندارد نشان داد. مطالعه با روش sds-page و استفاده از 2 - مرکاپتواتانول روشن ساخت مولکول kd 204 دارای زنجیره های بین مولکولی است و به 6 باند به وزنهای مولکولی 81/5,45,29,21, 12a,12b روی ژل پلی اکریل آماید در مقایسه با استاندارد تقسیم می گردد و بقیه از یک باند تشکیل شده اند. نتایج آزمون جلدی (in vivo) در گروههای خوکچه هندی در مقایسه با استاندارد نشان داد که در بین فراکشن ها بالاترین تحریک مربوط به گروه دو خوکچه های هندی است که با فراکشن های 2 تست شده اند و همهء گروهها در مقایسه با گروههای شاهد منفی دارای پاسخ معنی دار (significat) هستند. نتایج آزمون در محیط کشت (in vitro) نشان داد همهء فراکشن ها با درجات متفاوت قادر به تحریک لنفوسیت های کشت شده، در مقایسه با گروههای کنترل هستند. در بین فراکشن ها بالاترین تحریک مربوط به گروه دو و سه می باشد و همهء گروهها در مقایسه با گروههای شاهد منفی دارای پاسخ معنی دار هستند. p<0.0001 در این مطالعه همچنین پدیده کمی لومینانس در ماکروفاژهای صفاقی خوکچه های هندی حساس شده با واکسن (purified protein derivatives)ppd , bcg و مولکولهای مختلف پروتئینی مایکوباکتریوم توبرکولوزیس h37rv مخلوط در ادجوانت ، با افزودن لومینول (5-amino-2,3-dihydrophthalazing, 4-dione) به محیط آزمایش ، مورد ارزیابی قرار گرفت . پس از مجاور ساختن ماکروفاژهای صفاقی گروههای مختلف مورد مطالعه با مایکوباکتریوم توبرکولوزیس زنده عامل سل bcg, (h37rv) و ماده شیمیایی فوربول مریستات استات (pma) بطور جداگانه، نشان داده شد فقط ماکروفاژهای گروههایی که با bcg واکسینه شده اند در مقایسه با بقیه گروهها و کنترل منفی از خود کمی لومینانس بالاتری بروز می دهند. (p<0.050) ماکروفاژهای تمام گروهها نسبت به pma پاسخ داده اند و از فعالیت بالایی برخوردار بودند.