روش های متعددی برای آشکارسازی جهش های تک نوکلئوتیدی ابداع گردیده است. اندونوکلئاز cel ii یک گلیکوپروتئین خارج سلولی است که از گیاه کرفس متعلق به خانواده چتریان جداسازی شده است. این آنزیم از قابلیت تکنیکی بسیار مطلوب در برش dna هترودوپلکس برخوردار است که آن را بسیار ارزشمند می نماید. جنبه های کاربردی آنزیم cel ii در مطالعات جهش های نقطه ای، تقاضای جهانی قابل توجهی را برای آن بوجود آورده و با تو...

سابقه و هدف: انتقال dna خارجی با بازدهی بالا به داخل باکتری از مهمترین مراحل در زیست فناوری میکروبی می باشد. برای این منظور چند روش مرسوم است که در بین آن ها روش کلسیم کلراید سرد از جمله مهمترین و ارزان ترین روش ها جهت انتقال dna به درون سلول های باکتریایی گرم منفی مانند escherichia coli می باشد. به طور معمول بازدهی انتقال dna در این روش107- 105 کلونی برای یک میکروگرم از dna خارجی می باشد. با ت...

مقدمه: تعدادی از گونه های باکتریایی قادرند تا مولکول dna را از محیط اطرافشان در یافت نمایند؛ میزان این دریافت به شرایطی مانند بزرگی پلاسمید و نوع میزبان بستگی دارد. در مورد باکتری باسیلوس سوبتیلیس نیز این امکان البته با میزان انتقال بسیار پایینی وجود دارد. در حال حاضر روش مرسوم برای انتقال پلاسمید خارجی به درون باکتری باسیلوس سوبتیلیس استفاده از روش طبیعی در یک محیط کشت حداقل ( اسپیزیزن ) است. ...

زمینه و هدف: مقاومت آنتی بیوتیکی همواره به عنوان یک مشکل جدی برای سلامت انسان مطرح بوده است، و بیماران را در بیمارستان های سراسر جهان تحت تأثیر قرار می دهد، از این رو سازمان بهداشت جهانی سال 2011 را به عنوان سال مقاومت آنتی بیوتیکی نامید. کلبسیلا پنومونیه یک پاتوژن فرصت طلب گرم منفی و یکی از عوامل شایع عفونت های بیمارستانی است. این باکتری، به ویژه در نوزادان باعث پنومونی، سپتی سمی، مننژیت، اسها...

زمینه و اهداف: ظهور مقاومت باکتری ها نسبت به آنتی بیوتیک های بتالاکتام مربوط به پلاسمید کد کننده پنی سیلیناز است که به سرعت در بین نمونه های کلینیکی مربوط انتشار یافته است. پلاسمیدهای ESBL اجداد SHV-1, TEM-2, TEM-1 هستند که هم اکنون با جهش نقطه ای در آن باعث بروز بیش از 90 تیپ TEM و 25 تیپ SHV شده است. در همین راستا مطالعه ای جهت بررسی فراوانی انواع پلاسمیدهای ESBL در سویه های اشریشیاکلی و کلبس...

زمینه و هدف: باکتری شیگلا دیسانتری یکی از عوامل پاتوژن مهم است که علی رغم تلاش های چندین ساله برای تهیه واکسن علیه آن هنوز مطالعات گسترده پیرامون آن ادامه دارد. محصولات پلاسمید تهاجمی شیگلا (ipa) نقش مهمی در تهاجم باکتری ایفا می کنند. پروتئین ipad یکی از اعضای این خانواده است که به عنوان کاندید واکسن شیگلا مطرح می باشد. مطالعات متعدد بر روی این پروتئین نشان داده که ناحیه n- ترمینال آن نقش مهمی ...

سابقه و هدف: اکینوکوکوس گرانولوزوس (echinococcus granulosus) سستود انگلی بوده که باعث ایجاد بیماری کیست هیداتید در انسان می شود. ژن کد کننده پروتئین eg95 می تواند به عنوان یک هدف مناسب جهت ساخت واکسن dna برای پیشگیری از این بیماری باشد. با توجه به اهمیت این ژن و عدم وجود گزارشی مبنی بر مطالعه بر روی این ژن در ایران، هدف از این مطالعه شناسایی و کلون کردن ژن کد کننده پروتئین eg95 ایزوله ایرانی اک...

سابقه و هدف: تاکنون پژوهش های زیادی درباره فراوانی مقاومت و منشا احتمالی آن انجام گرفته است. هدف این تحقیق، بررسی مقاومت استافیلوکوکوس اورئوس کوآگولاز مثبت به 12 آنتی بیوتیک انتخابی با روش دیسک دیفیوژن و تعیین منشا احتمالی آنها با حذف پلاسمید به روش مجاورت با میتومایسین c است. مواد و روش ها: سویه های مورد آزمایش از نمونه های بالینی بیماران بستری در بیمارستان امام خمینی (ره) جدا شدند و در آزمایش...

جداکردن ژنوم پلاسمیدی از ژنوم کروموزومی در باکتریهای ریزوبیوم حاوی مگاپلاسیمد با روشهای معمول آزمایشگاهی بسیار مشکل است. اما با تهیه خزانه ژن و انجام تکنیک هیبریداسیون امکان جدا سازی ژنوم پلاسمیدی و مطالعه پلاسمیدهای مشترک در بین سویه های مختلف باکتریهای ریزوبیوم امکان پذیر می گردد. در این مطالعه پروفیلهای پلاسمیدی 200 سویه ریزوبیوم لگومینوزارم بیوار ویسیه تهیه و سپس پروفیلهای پلاسمیدی متفاوت آ...

بدلیل اهمیت پلاسمید و کاربرد آن بعنوان حامل در کارهای مهندسی ژنتیک روشهای مختلفی برای استخراج پلاسمید رواج یافته است. در ضمن علاقمندی به مطالعه ناپایداری و حذف پلاسمید از میکروارگانیسم هابه دو دلیل افزایش یافته است:1-حذف پلاسمید از یک سویه باکتری روشی است برای اثبات رابطه بین یک ویژگی ژنتیکی و حمل این ویژگی بر روی پلاسمید . 2-حذف پلاسمید های ‏‎r‎‏ چندمقاومتی راه موثری است برای غلبه به مشکل مقاو...