در این پژوهش ژن کدکننده آلفا-آمیلاز باکتری باسیلوس سابتیلیس بومی با استفاده از روش pcr با پرایمرهای اختصاصی دارای جایگاه برش آنزیم های محدودگر noti و asci تکثیر شد و مورد توالی یابی قرارگرفت. توالی حاصل از pcr و وکتور شاتل-اپی زومال p316tdh3 با استفاده از آنزیم های محدودگر بریده و تحت عمل آنزیم لیگاز t4 به یکدیگر متصل شدند. وکتور نوترکیب حاصل وارد اشریشیاکلای شد. در مرحله بعد حضور ژن آلفا-آمیلا...

هدف: هدف این پژوهش کلون سازی و بیان ژن کد کننده‏ی میدکاین انسانی در اشریشیاکولای بوده که پس از انجام مراحل لازم در مقیاس آزمایشگاهی محقق گردید. مواد و روش‏ها: روش ها شامل کشت سلول، استخراج rna، ساخت cdna، تکنیک های کلون سازی، القای بیان با iptg (ایزوپروپیل تیوگالاکتوزیداز)، ارزیابی بیان به‏وسیله ی ژل پلی اکریل آمید و تایید توسط وسترن بلات بود. نتایج: ژن میدکاین در pet-21a(+) کلون و سپس به اوریگ...

در حال حاضر یکی از مهم ترین مشکلات زیست محیطی، آلودگی ناشی از تجمع فلزات سنگین در محیط است که این آلودگی تاثیرات نامطلوب فراوانی بر سلامت انسان و اکوسیستم می گذارد. از جمله مهم ترین روش ها برای رفع این آلودگی، استفاده از پروتئین ها و پپتیدهای متصل شونده به فلزات است. متالوتیونین ها دسته ای از این پروتئین ها هستند که به دلیل نقش و اهمیت آن ها در جذب فلزات سنگین، مورد توجه قرار گرفته اند. از این ...

سابقه و هدف : پروتئاز hiv نقش مهمی در بلوغ ویروس و تحریک پاسخ ایمنی میزبان دارد. به همین دلیل می­تواند هم به عنوان یک هدف درمانی و هم در تست های تشخیصی کاربرد داشته باشد. در مطالعات قبلی، تولید rpr با مشکلاتی مثل سمیت، آبگریز بودن و تخلیص روبرو بوده است. هدف از این مطالعه، استفاده از سیستم بیانی pet102/d.topo برای غلبه بر مشکلات اشاره شده بود. مواد و روش ها: پس از جداسازی ژن پروتئاز از ژنوم hiv...

سابقه و هدف: بوتولیسم یک بیماری ناشی از فعالیت نوروتوکسین های بوتولینوم می باشد که توسط باکتری کلاستریدیوم بوتولینوم تولید شده و در انتقال محرک های عصبی و عضلانی ایجاد اختلال می نماید. نوروتوکسین های این باکتری از سمی ترین مواد شناخته شده هستند به طوری که با جلوگیری از آزاد شدن استیل کولین در پایانه های عصبی، موجب فلج کردن عضلات می شوند. این پژوهش با هدف همسانه سازی زنجیره سنگین ژن نوروتوکسین ب...

سابقه و هدف: باسیلوس سابتیلیس به دلیل ویژگی های غیربیماری زا بودن و توانایی ترشح مقادیر بالای پروتئین، به عنوان یک میزبان خوب برای کلون سازی ژن و بیان پروتئین در نظر گرفته می شود. اما کارایی انتقال dna پلاسمیدی اتصال یافته به درون سلول های باسیلوس سابتیلیس مستعد در مقایسه با سلول های اشریشیا کلی مستعد شده با کلرید کلسیم پایین می باشد. بنابراین بهتر است مراحل اولیه کلون سازی با استفاده از یک شات...

 سابقه و هدف: توکسوپلاسما گوندی، انگل تک‌یاخته درون سلولی اجباری و عامل توکسوپلاسموزیس در انسان و حیوانات بوده که در سراسر جهان انتشار دارد. پروتئین میکرونم 3 (MIC3) با وزن ملکولی 90 کیلو دالتون، عامل چسبیدن انگل به سلولهای میزبان در آغاز تهاجم است و در تمام مراحل تکاملی از انگل ترشح شده و یک آنتی ژن قوی محسوب می شود؛ از این نظر علاوه بر ایمونوژن بودن و کاندید ساخت واکسن، در تشخیص نیز کاربرد دا...

زمینه: مطالعه حاضر جهت تولید کلون از یاخته های مداوم کلیه گوساله و ارزیابی حساسیت کلون های سلولی تولید شده در تکثیر ویروس های پاراآنفولانزا تیپ سه و هرپس سیمپلکس تیپ یک به منظور به کارگیری آن ها در تولید بذر ویروس انجام گرفت. مواد و روش ها: در این پژوهش با روش تهیه رقت های متوالی و با بهره گیری از رده سلولی vero غیرفعال شده به عنوان لایه تغذیه کننده اقدام به کلون کردن یاخته های رده کلیه گوساله ...

پس از آنکه mrna از غده هیپوفیز اسب نژاد توربرد ایرانی استخراج شد، برای سنتز cdna استفاده گردید. هر یک از زیرواحد های پروتئین fsh ، با استفاده از دو جفت آغازگر اختصاصی تکثیر یافتند و سپس بطور جداگانه در حامل ptz57r.t کلون شدند. حامل های نوترکیب به درون سلول باکتری ? dh5منتقل شدند. کلون سازی زیرواحد ها با استفاده از آزمون های تاییدی نظیر واکنش هضم آنزیمی و تعیین توالی، تایید شد. در ادامه توالی ها...

عفونت های سالمونلایی در تمامی نقاط دنیا در میزبان های بسیاری همچون حیوانات اهلی، وحشی و انسان باعث بروز بیماری می شوند. توانایی وارد شدن و زنده ماندن در سلول های میزبان شرط لازم برای بیماری زایی گونه های سالمونلا است. پروتئین تهاجمی سالمونلا یک فاکتور بیماری زایی مهم است که توسط باکتری به سلول های میزبان منتقل می شود. این مطالعه با هدف کلون سازی نواحی ´5 و ´3 ژن sipa سالمونلا انترتیدیس و شناسای...