بهینه‌سازی کدون ژن فاکتور سلولهای بنیادی (SCF) و ارزیابی بیان این ژن با کمک وکتور pBudCE4.1 در سلولهای تخمدان همستر چینی (CHO)
نویسندگان
چکیده مقاله:
زمینه و هدف: فاکتور سلول بنیادی (SCF) یک سایتوکاین خونی است که می‌تواند از طریق تأثیر بر روی سلولهای مولد خون‌ساز در تمایز سلولهای پیش‌ساز خونی، بقاء، تکثیر و تمایز ماست سل‌ها و همچنین افزایش تکثیر و تهاجم سلولهای توموری بااهمیت باشد و نقش درمانی آن در بهبود بیماری‌هایی نظیر آلزایمر و سکته‌های قلبی در حال بررسی و تحقیق است. هدف از این تحقیق کلون‌سازی ژن SCF به‌وسیله حامل بیانی pBudCE4.1 با بهینه‌سازی کدون در سلولهای تخمدان همستر چینی (CHO) بود. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی توالی SCF بعد از بهینه‌سازی کدون برای سلولهای CHO و تغییر دادن محتوی G+C به میزان بهینه به‌صورت سنتتیک ساخته شد و در وکتور بیانی pBudCE4.1 ساب کلون شد. سپس ژن SCF به همراه پلاسمید موردنظر به درون سلولهای CHO-K1 ترانسفکت شد و با استفاده از RT qPCR میزان بیان ارزیابی گردید. نتایج: حامل بیانی نوترکیب pBudCE4.1/SCF ساخته شد و با تکنیک PCR، هضم آنزیمی و تعیین توالی مورد تائید قرار گرفت. نتایج RT qPCR نشان داد که ژن SCF پس از بهینه‌سازی کدون در سلولهای CHO می‌تواند بیان شود. نتیجه‌گیری: نتایج نشان داد که به‌خوبی می‌توان نسبت به همسانه‌سازی ژن SCF از طریق حامل بیانی pBudCE4.1 اقدام کرد و این حامل بیانی می‌تواند یک حامل مناسب برای بیان ژن SCF در سلولهای CHO باشد.
منابع مشابه
بیان ژن leoA هلیکوباکترپیلوری در سلولهای تخمدان همستر چینی به روش RT-PCR
زمینه و هدف : عفونت هلیکوباکترپیلوری یکی از شایع‌ترین عفونت‌های مزمن باکتریایی در جهان به‌ویژه در کشورهای در حال توسعه است. ژن leoA نقش مهمی در بیماری‌زایی ایفا می‌کند و نقش اصلی این ژن افزایش ترشح سم توسط باکتری است. این مطالعه به منظور جداسازی و کلون‌سازی ژن leoA در وکتور بیانی pEGFP-C2 و بررسی بیان آن به روش RT-PCR در سیستم یوکاریوتی انجام شد. روش بررسی : در این مطالعه توصیفی آزمایشگاهی ژن l...
متن کاملبیان ژن FSH انسانی در سلول تخمدان همستر چینی و بررسی فعالیت آن در مدل حیوانی رت
Background and Objective: FSH is a heterodimeric glycoprotein that performs an important role in the regulation of reproductive processes. Over the past decades, injectable gonadotrophins have played a leading role in the treatment of infertility. The production of FSH in the country is one of the main goals around this drug. The aim of this study was to produce a semi- industrial recombinant F...
متن کاملبهینه سازی بیان ژن کدکننده هورمون محرک فولیکولی انسانی ( fsh ) از طریق تغییر کدون ها در سلول های تخمدان همستر چینی (cho)
هورمون محرک فولیکولی (fsh) یک هورمون گلیکوپروتئینی است که از غده ی هیپوفیز پیشین ترشح می شود. این هورمون با تحریک تخمک گذاری در زنان و کمک به روند اسپرماتوژنز در مردان نقش مهمی را در تولیدمثل و باروری ایفا می کند. امروزه به علت خلوص بالا و ایمن بودن پروتئین های نوترکیب، تنها از این نوع fsh برای مصارف درمانی استفاده می شود. با توجه به پایین بودن میزان بیان پروتئین ها در لاین های سلولی پستانداران...
بررسی بیان نشانگرهای سلولهای بنیادی مزانشیمی در سلولهای بنیادی فولیکول موی انسان
زمینه و هدف: سلولهای بنیادی بالغ سلولهایی تمایز نیافته اند که در مراحل خاصی از زندگی فرد یا در هنگام بروز آسیب به بدن فعال شده و سلولهای مرده و آسیب دیده را جایگزین می کنند. سلو ل های بنیادی بالغ در بخشهایی از بدن فرد بالغ وجود دارند و فولیکول مو نیز از جمله مناطقی است که دارای ذخیره ای از سلولهای بنیادی بالغ است که نقش مهمی در چرخه زندگی مو بر عهده دارند. هدف از این مطالعه جداسازی سلولهای بن...
متن کاملمطالعه افزایش بیان فاکتور کپی برداری pparγ۱ در تمایز سلولهای بنیادی جنینی موشی به سلولهای اندودرم
گیرنده فعال شونده افزایش دهنده پراکسیزومی نوع گاما، متعلق به ابرخانواده عوامل کپیه برداری از نوع گیرنده های هسته ای فعال شونده بوسیله لیگاند میباشد که موجب تنظیم بیان بسیاری از ژنهای در گیر در تمایز سلولی و متابولیسم ، چربی زایی، التهاب و مرگ سلولی میگردد. علیرغم مطالعات زیادی که تا کنون در مورد نقشpparγ1در تمایز به اکتودرم صورت گرفته است، تعداد مطالعاتی که در مورد نقشpparγ1در تمایز به اندودرم ...
متن کاملتاثیر غلظت های مختلف آنولیت در رشد و تقسیم سلولهای سرطانی همستر چینی
Background: At present, cancer can be controlled by chemotherapy, but unfortunately, this method has strong side effects and scientist try to reduce them using different substances. 2 kinds of activated water called anolyte and catholyte have electrochemical property and antibacterial and oxidative properties respectively. The aim of this research is to study the effect of anolyte on growth a...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 7 شماره 2
صفحات 223- 232
تاریخ انتشار 2017-09
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023