بهینه‌سازی روش استخراجRNA از بافت پوست شاخه درختان خانواده مخروطیان

نویسندگان

  • پژمان آزادی استادیار، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران، کرج
چکیده مقاله:

فرآیند استخراج RNA از بافت­های سخت چوبی و به­طور خاص درختان خانواده مخروطیان به‎دلیل داشتن غلظت­های بالایی از ترکیبات فنولیک، پلی­ساکاریدها، متابولیت­های ثانویه و لیگنین، بسیار مشکل است و تا به‎حال هیچ­گونه کیت تجاری برای این منظور ساخته نشده است. در این مطالعه مشکلات فوق برطرف گردیده و روشی سریع، ساده و اقتصادی برای استخراج RNA از بافت ساقه گونه‌های Cedrus deodara و Abies grandis که هر دو از خانواده مخروطیان می­باشند، ارائه شده است. نسبت جذب نوری در طول موج‌های 260 به 280 و 260 به 230 نانومتر، به‎ترتیب 88/1 و 1/1 برای گونه  Cedrus deodara و 8/1 و 9/0 برای گونه Abies grandis به‎دست آمد. تغییرات صورت گرفته در جهت بهینه‌سازی استخراج RNA نیز شامل استفاده از تیمار پیش‌گرما روی بافر استخراج، کاهش دور سانتریفیوژ حذف آلودگی DNA و حذف DEPC می‌باشد. ساخت cDNA با استفاده از RNA استخراج شده با موفقیت انجام و واکنش RT-PCR باندهای مورد انتظار را تولید نمود. لذا به­نظر می­رسد این روش برای استخراج RNA از بافت­های چوبی مناسب است.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

روش های کشت بافت اپی تلیال در پوست خرگوش Albino

With the intention of research of various methods of epithelial tissue culture we've studied five French Albino rabbits with an average of 8 weeks. In order to evaluate and control growth and proliferation of autologus cultured tissue samples were obtained on 1st, 5th and 8th days. After fixation of these samples and passing them through various processes, histologic sections were prepared. The...

متن کامل

مخمرهای عامل و همراه بیماری شانکر شاخه درختان میوه هسته‌دار

علائمی مشابه با علائم بیماری شانکر باکتریایی درختان میوه هسته‌دار ناشی از باکتریPseudomonas syringae pv. Syringaeروی هلو(Prunus persica) و شلیل(Prunus persicae var. nusipersica) در چند نقطه از شهرستان‌های خراسان، در طی سال‌های 1391و 1390 مشاهده شد. پس از شستشو و ضد‌عفونی سطحی بافت‌های آلوده، سوسپانسیونی از آنها در آب مقطر استریل تهیه و یک قطره از آن ...

متن کامل

بررسی تکثیر درختان بالغ راش از طریق کشت بافت

این آزمایشها جهت یافتن روشی سریع و عملی برای تکثیر غیرجنسی درختان بالغ جنگلی انجام شد. به همین منظور تکثیر گیاه راش (Fagus orientalis Lipsky.) که یکی از مهمترین درختان موجود در جنگلهای ایران است از طریق کشت بافت مورد بررسی قرار گرفت. جوانه های سه پایه بالغ از این گیاه در فصل زمستان تهیه و در محیط مصنوعی کشت شد. عوامل موثر در حذف آلودگیهای سطحی، شاخه زایی و ریشه زایی این گیاه مورد بررسی قرار گرف...

متن کامل

روش طراحی آزمایش به منظور بهینهسازی سختی پوشش‌های آندایزینگ آلومینیوم

در این پژوهش هدف این است که سختی پوشش آندایزینگ آلومینیوم به‌کمک روش طراحی آزمایش بهینه شود. متغیرهای متفاوتی بر سختی این پوشش مؤثر می­باشند که از مهم‌ترین آن‌ها می­توان به زمان، دما و متغیرهای مربوط به جریان پالسی (دانسیته جریان حداکثر و حداقل، فرکانس و چرخه کاری) اشاره کرد. در این راستا متغیرهای مذکور در سطوح مختلف به‌عنوان ورودی فرآیند طراحی آزمایش در نظر گرفته شد. همچنین اثر این متغیرها بر ...

متن کامل

اندازه‌گیری سالیسیلیک اسید پوست درختان صنوبر دلتوئیدس و اورامریکن (Populus deltoides & P. euramerican) به روش HPLC

مقدمه: تیره بیدیان شامل جنس بید و صنوبر می‌باشد. گونه‌های مختلف این خانواده به خصوص بید2 از نظر داشتن ماده سالیسین در پوست آن دارای جایگاه خاصی در کتب طب سنتی است. شناسایی و بررسی خواص دارویی گونه‌های مختلف این تیره گامی در جهت شکوفایی صنایع دارویی و توسعه پایدار گیاهان دارویی کشور می‌باشد. هدف: این پژوهش جهت اندازه‌گیری ماده سالیسیلیک اسید در پوست درختان صنوبر دلتوئیدس و اورامریکن انجام شده ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


عنوان ژورنال

دوره 24  شماره 1

صفحات  102- 113

تاریخ انتشار 2016-04-20

با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023