بررسی ساختار ایمونوژنیسیته پروتئین نو ترکیب HIV به دست آمده از ویروس gp41-p24

سابقه و هدف: پروتئینهای نوترکیب به دست آمده از ویروس HIV می توانند به عنوان یک ایمونوژن و تحریک کننده سیستم ایمنی باشند. از مهمترین آنها می توان به پروتئینهای داخلی (gag) و سطحی ویروس (Env) اشاره کرد. در این تحقیق به بررسی ساختار ایمونوژنیسیته پروتئین نوترکیب gp41-p24 به دست آمده از ویروس HIV می پردازیم.روش بررسی: در مطالعه تجربی حاضر، پروتئین نوترکیب gp41-p24 که قبلا توسط روشهای کلونینگ تهیه گردیده و به حالت Unfold نگهداری می شد با روشهای رقیق سازی پروتئین از حالتUnfold به حالت Refold در آمد. وزن مولکولی و غلظت پروتئینها با روشهای الکتروفورز و اسپکتروفتومتری اندازه گیری شد. Refoldingپروتئین با استفاده ازالکتروفرز با ژل Native و دستگاه Circular Dichroism) CD) بر اساس تغیرات ساختار دوم پروتئین ارزیابی شد. فعالیت ایمنی و ساختار ایمونوژنیسیته این دو پروتئین با استفاده از تست الایزا و وسترن بلات بر اساس نوع پروتئین و میزان جذب نوری (OD) ثبت شد.یافته ها: نتایج نشان داد که وزن مولکولی این دو پروتئین 32 کیلودالتون می باشد و از خلوص کامل برخوردارند.Refolding پروتئین از طریق ژل Native مشاهده شد. در این پروتئین افزایش ساختارهای Helix و Beta و کاهش ساختار Random (درمقایسه با پروتئین Unfold) پدیدارگردید. همچنین واکنش ایمنی در پروتئین استاندارد وRefold شده با آنتی بادهای موجود در سرم بیماران کنترل مثبت HIVمشاهده گردید و با استفاده از آنالیز واریانس یکطرفه اختلاف معنی داری بر حسب نوع پروتئین مشاهده نشد.نتیجه گیری: تحقیقات نشان داد که پروتئین نوترکیب gp41-p24 به دست آمده ازویروس HIV بعد از Refolding دارای فعالیت ایمونوژنی می باشد و از آن می توان به عنوان یک ایمونوژن در ایمونیزاسیون و تحریک سیستم ایمنی استفاده کرد.