ارزیابی پیوند هم‌زمان سلول‌های بنیادی مزانشیمی انسانی و سلول‌های CD34+ خون بند ناف به موش Balb/c اشعه دیده با روش سنجش کلونی طحال CFU-S

  چکید ه   سابقه و هدف   خون بند ناف حاوی تعداد زیادی سلول‌های پیش‌ساز ابتدایی است که برای پیوند بالینی استفاده می‌شوند ولی درصد موفقیت پیوند این سلول‌های بنیادی پایین است. لذا در این مطالعه سلول‌های CD34+ هم‌زمان با سلول‌های بنیادی مزانشیمی (MSC) به موش‌های Balb/c اشعه دیده، پیوند زده شد و نتایج به صورت شمارش تعداد کلون در سطح طحال ارزیابی گردید.   مواد وروش‌ها   مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. نمونه‌گیری به روش تصادفی انجام شد. سلول‌های CD34+ خون بند ناف انسانی از نمونه خون بند ناف به روش ایمونومگنتیک و MSC از مغز استخوان طبیعی انسان جدا شد. MSC از نظر مارکرهای سطحی CD166 و CD105 و درصد خلوص سلول‌های CD34+ با فلوسایتومتری ارزیابی شد. سلول‌های CD34+ با دوز 106× 2/0 تا 1 به طور هم‌زمان با MSC با دوز 106×25/0 تا 1 به موش 6 تا 8 هفته‌ای اشعه دیده( Gy 7) پیوند شد. پس از گذشت 11 روز، تعداد کلون‌ها در سطح طحال شمارش و به روش هماتوکسیلین و ائوزین (H&E) رنگ‌آمیزی شد. جهت ارزیابی وجود سلول‌های CD34+ انسانی در کلون موجود در طحال، این سلول‌ها با ذرات آهن (SPIO) نشان‌دار شده و به موش اشعه دیده تزریق شدند. طحال این گروه به روش آبـی پروس رنگ‌آمیزی شد. در آنالیز آماری جهت بررسی تعداد کلون از آزمایش کروسکال ـ والیس با نرم‌افزار SPSS استفاده شد.   یافته‌ها   ارزیابی فلوسایتومتری، درصد سلول‌های تهیه شده از خون بند ناف و مغز استخوان را برای سلول‌های بنیادی CD34+ حدود 90% و MSC را بیش از 96% نشان داد و 100 درصد سلول‌ها زنده بودند. تعداد کلون‌های طحال در پیوند هم‌زمان دوزهای 105×3 و 2 CD34+ و دوزهای 106×1 و 5/0 MSC به طور معنی‌دار در مقایسه با سایر گروه‌ها افزایش یافت(01/0 p< ). گرانول‌های آهن با رنگ‌آمیزی آبی پروس در کلون‌های طحال مشاهده شد.   نتیجه گیری   سلول‌های بنیادی مزانشیمی باعث تسریع پیوند سلول‌های CD34+ می‌شود و استفاده از پیوند هم‌زمان سلول‌های بنیادی خون بند ناف به همراه سلول‌های بنیادی مزانشیمی می‌تواند موفقیت پیوند سلول‌های بنیادی را افزایش دهد.   کلمات کلیدی : سلول‌های بنیادی، پیوند هم‌زمان، خون بند ناف، سلول‌های مزانشیمی