پروبیوتیک ها میکروارگانیسم هایی هستند که ضمن عبور از دستگاه گوارش، زنده می مانند و اثرات سودمند و مفیدی بر میزبان به جا می گذارند. لاکتوباسیلوس gg از میکروارگانیسم های خانواده باکتری های اسیدلاکتیک بوده و به عنوان یکی از مهم ترین باکتریهای پروبیوتیک محسوب می شود و اثرات سودمندی در سلامتی میزبان دارد. در این تحقیق سعی شده است که روند تولید غلظت سلولی بالای این پروبیوتیک در یک محیط کشت ارزان قیمت در مقیاس آزمایشگاهی بهینه سازی گردد و سپس از این محیط کشت جهت تولید در فرمانتور یک لیتری استفاده شود تا بهترین شرایط از نظر دما، ph و دور همزن بدست آید. آب پنیر یک ماده سالم، مغذی، اما دارای پتانسیل زیاد برای آلودگی محیط زیست است و محصولی است که در طول فرایند تولید پنیر از شیر جدا می شود. در این مطالعه سعی شده است که سینتیک رشد باکتری لاکتوباسیلوس gg در محیط آب پنیر همراه با خیسانده ذرت (csl) و ملاس چغندر قند بعنوان مکملهای غذایی بررسی شود. در تمامی آزمایشات این تحقیق، میزان رشد باکتری به مدت 24 ساعت با استفاده از روش سریال دایلوشن بررسی شده و تعداد کلنی ها با استفاده از روش شمارش در پلیت بر حسب cfu/ml گزارش شده است. ابتدا میزان رشد باکتری در محیط های حاوی نسبت های مختلف آب پنیر(آب پنیر 5%، 10%، 15%) و همچنین میزان رشد، در سه شرایط دمایی (دمای آزمایشگاه، دمای یخچال°c4 و دمای گرمخانه°c37) بررسی شد. نتیجه بهتر، میزان رشد باکتری در محیط آب پنیر 10% در گرمخانه بود با (cfu/ml) 107. سپس اثرcsl و ملاس چغندر قند در محیط پایه آب پنیر بر سینتیک رشد باکتری بررسی شد. csl اثر بیشتری در رشد باکتری مذکور داشت و تعداد باکتری در محیط های حاوی csl به (cfu/ml) 108رسید. در این مرحله از آزمایش، از سوسپانسیون میکربی با (cfu/ml) 106 به نسبت1% حجمی/حجمی بعنوان مایع تلقیح استفاده شد. در مرحله بعدی بر اساس روش rsm وبر پایه سه فاکتور محیطی آب پنیر، csl وملاس چغندر قند، پانزده آزمایش طراحی شد . در این مرحله، از 10% (حجمی/حجمی) باکتری رشد یافته در محیط mrs بعنوان مایع تلقیح استفاده شد. سینتیک رشد در این پانزده محیط در گرمخانه °c 37 با دور همزن (rpm)150بررسی شد. بهترین محیط از نظر حداکثر تولید توده سلولی و حداقل مصرف مواد، محیط دارای 10% آب پنیر و 3%csl و 2% ملاس چغندر قند بود با (cfu/ml) 109 که از آن، جهت تولید در فرمانتور استفاده شد. نتایج این مرحله با نرم افزار design expert 7 مدل سازی و بهینه سازی شد. آنالیز واریانس نتایج نشان داد که از بین سه ماده بکار رفته در محیط کشت، بیشترین اثر در رشد باکتری به ترتیب مربوط به آب پنیر و csl میباشد و اثر ملاس چغندر قند بسیار کم میباشد. در فرمانتور میزان رشد در شرایط مختلف شامل: ph (5/5، 5/6)، دور همزن (rpm100، rpm150 با هوادهی و rpm 200 بدون هوادهی) و همچنین میزان تولید، هنگام استفاده از دو نوع محیط پیش کشت فرمانتور(mrs و محیط مشابه محیط اصلی فرمانتور) بررسی شد. نتایج نشان داد که بیشترین میزان رشد باکتری در شرایط5/5 ph: و دور همزنrpm 200، بدون هوادهی و هنگامی که از محیط تجاری mrs بعنوان محیط پیش کشت استفاده شود، بدست می آید. در این شرایط شمارش کلی باکتری (cfu/ml) 109 ×8.5 بود. بنابراین در این تحقیق بیشترین میزان رشد باکتری لاکتوباسیلوسgg در شیکر فلاسک(cfu/ml) 109 ×1و در فرمانتور(cfu/ml) 109 ×5/8 بدست آمد.

پایداری ساختاری پروتئین های دارویی در افزایش اثربخشی و کاهش عوارض جانبی بر بدن بیمار موثر است. پایدارسازی و کاهش تشکیل توده در پروتئین ها می تواند در افزایش بازده و کاهش هزینه های تولید تاثیرگذار باشد. در این مطالعه پایداری اینترفرون بتا یک-بی تاخورده به کمک روش های فیزیکی و محاسباتی مانند طیف سنجی های فلورسانس و دورنگ نمایی دورانی بررسی شد. نتایج پژوهش نشان داد اینترفرون بتا یک-بی در فرآیند بازتاخوردگی تشکیل ساختاری واسط، فعال و نیمه پایدار می دهد. در حضور تری هالوز با غلظت 5/1 مولار، مقدار دمای ذوب اینترفرون بتا یک-بی به میزان 16 درجه ی سلسیوس افزایش یافته و ساختاری فوق پایدار و فعال شکل گرفت. این پایداری در ساختمان پروتئین به طور احتمال به دلیل دفع تمایلی تری هالوز و تشکیل سطحی آب پوش در اطراف اینترفرون بتا یک-بی است. حذف تری هالوز سبب افت 16 درصدی در ساختارهای مارپیچی شد. شناخت سازوکار تشکیل توده ی اینترفرون بتا یک-بی به کمک تحریک دمایی، اکسیدی و بذرافشانی محلول پروتئینی انجام شد. تشکیل توده توسط روش های پراکندگی نور پویا، سنجش ردیابی نانوذرات، طیف سنجی ماورای بنفش و مشاهده ی عینی بررسی شد. داده های تجربی با مدل خودکاتالیزی به خوبی منطبق بودند. تحریک اکسیدی پروتئین با پراکسیدهیدروژن در مقایسه با تحریک دمایی سبب افزایش بیشتری در ثابت سرعت هسته زایی (k1) توده ی اینترفرون بتا شد. با تغییر دما از 25 به 70 درجه سیلسیوس، k1 از min-1 4-10×2/0±5/1 به min-1 3-10×1/0±0/6 تغییر یافت، در حالی که در حضور 0/3 % (v/v) پراکسیدهیدروژن تا min-1 100×1/0±0/1 افزایش پیدا کرد. نتایج نشان داد، هسته زایی محدودکننده سرعت در تشکیل توده ی اینترفرون بتا یک-بی در این پژوهش مونومرهای اکسیدشده ی اینترفرون بتا به عنوان ساختارهای پیش هسته ی ناپایداری معرفی شدند که با تغییر در ساختارفضایی خود تمایل به تشکیل توده ی غیرطبیعی دارند. اثر بازدارندگی برخی افزودنی ها بر تشکیل توده ی محلول حاوی اینترفرون بتا یک-بی بررسی شد. در حضور آرژنین k1 از 1-min 3-10× 4/1±4/5 به 1-min 10-10×4/0±5/2 تغییر کرد، که نشان دهنده ی کاهش تشکیل توده ی پروتئینی در محلول است. فرمول بندی جدیدی با mm 200 آرژنین و تری هالوز برای محلول اینترفرون بتا یک-بی ارائه شد. پس از یک ماه کاهشی تقریبا 70% در فعالیت نمونه ی بدون افزودنی حاصل شد، درحالی که تنها 15% کاهش در فعالیت ضدویروسی فرمول بندی جدید مشاهده شد.

از انجائیکه فاصله زیادی بین درمان هایی که در کلنیک انجام می شود و کارهایی که در آزمایشگاههای تحقیقاتی انجام می شود، وجود دارد، جهت نزدیک کردن این دو به یکدیگر توانسته اند از سلول درمانی جهت ترمیم بسیاری از بافت های آسیب دیده استفاده نمایند، که در این راستا سلولهای بنیادی مزانشیمی بدلیل تکثیر بالا و قدرت تمایز به استخوان، ویژگی های خوبی جهت ترمیم بافت استخوان نشان داده است،جهت هدایت مستقیم آنها به بافت آسیب دیده می توان از بستری که شباهت به بافت استخوان دارد همانند ساختارهای هیدروژلی که از پلیمرهای زیست سازگار و زیست تخریب پذیر درست شده است بکاربرد. که در این میان پلیمرهای کلاژن و کایتوزان دارای چنین ویژگی هایی می باشند . و پس از تهیه هیدروژل کایتوزان -کلاژن و بدست آوردن یک زمان مناسب ده دقیقه ای جهت قرار دادن سلولهای مزانشیمی در آن، در یک پروسه هجده روزه تمایز سلولهای مزانشیمی به استخوان بعد از اضافه کردن محیط تمایزی هر دو روز یک بار بررسی می شود، که در روزهای یکم و هفتم زنده بودن سلولها توسط تریپان بلو بررسی می شود و نیز می توان در روز چهاردهم و هجدهم از طریق رنگ آمیزی با آلیزارین رد رسوب کلسیم را مشاهده نمود و همچنین بیان ژن های دخیل در تمایز استخوان را نیز می توان از طریق pcr تایید کرد.

چکیده ندارد.

در حال حاضر رویکرد فزاینده ای به تولید پروتئین های دارویی با استفاده از روش مهندسی ژنتیک وجود دارد. تولید این پروتئین ها در باکتری اشریشیا کلی سبب تشکیل اجسام نامحلول توده ای شکل به نام اینکلوژن بادی می شود. فرآیند تاخوردگی سبب آرایش مجدد پروتئین های واسرشته از اینکلوژن بادی به ساختار اصلی و فعال آن می شود. در خصوص پروتئین های با پیوند دی سولفیدی (مانند اینترفرون بتا-1بی) نیازمند استفاده از یک اکسیدکننده قوی (مانند یدوزوبنزئیک اسید) است. در این پژوهش آزمایش های فرآیند تاخوردگی نیمه پیوسته با دو روش انجام پذیرفت. ابتدا تاخوردگی نیمه پیوسته به صورت خوراک دهی پروتئین انجام شد. بازدهی تاخوردگی اینترفرون بتا-1بی در شرایط غلظت های متفاوت پروتئین و اکسیدکننده مورد بررسی قرار گرفت. میزان تاخوردگی پروتئین با استفاده از روش چگالی سنجی ژل الکتروفورز سنجیده شد. یدوزوبنزئیک اسید با غلظت 15~10 میکرومولار و پروتئین با غلظت 8 میکروگرم برمیلی لیتر، بازده بیشینه 93% را بدست آورد. همچنین مشخص شد نسبت غلظت اکسیدکننده به غلظت پروتئین در فرآیند تاخوردگی و (در نتیجه) بازده تولید پروتئین های حاوی پیوند دی سولفیدی (از جمله اینترفرون بتا-1بی) نقش کلیدی دارد. سپس آزمایش های تاخوردگی نیمه پیوسته به شکل خوراک دهی همزمان پروتئین و عامل اکسیدکننده انجام و نتایج با کمک کروماتوگرافی مایع فازمعکوس آنالیز شد. طراحی آزمایش ها بصورت فاکتوریل کامل صورت گرفت. استفاده از اکسیدکننده، تغییرات مطلوبی را بر بازدهی فرآیند تاخوردگی تا 13% نسبت به حالت بدون اکسیدکننده ایجاد کرد. افزایش و کاهش میزان پروتئین اکسیدشده و پروتئین ثانویه خلاف یکدیگر صورت پذیرفت. در این روش سطح غلظتی بهینه 40 میکروگرم برمیلی لیتر از اینترفرون بتا-1بی و 8 میکروگرم برمیلی لیتر یدوزوبنزئیک اسید پیشنهاد شد.

چکیده ندارد.

به دلیل اهمیت کلینیکی زیاد بروز مقاومت نسبت به داروهای ضدقارچ و ضدمیکروب تلاش گسترده ای برای دستیابی به دسته های جدید داروهای ضدقارچ و ضدمیکروب با اثرقویتر و گسترده تر در حال انجام است. در همین راستا و با توجه به اثرات ضدمیکروبی اسکلتهای بنزوفوران و بنزوتیوفن و فعالیتهای بیولوژیکی قابل توجه حلقه های 1و 2 و 3-سلنادیازول، 1و 2و 3-تیادیازول تعداد جدیدی از ترکیبات حاصل از ادغام این حلقه ها با هم سنتز گردیدند و اثرات ضدقارچی و ضدمیکروبی آنها بررسی شد.

برای انجام این پایان نامه ابتدا به تعداد 62میکروارگانیسم گرم منفی از خانواده انتروباکتریاسه از مراکز درمانی بیمارستان امام خمینی-بیمارستان شریعتی و آزمایشگاه رازی جمع آوری شدند. این میکروارگانیسم ها جهت آزمایشات تشخیص کیفی و همچنین آزمایش ‏‎mic‎‏ که طی آن حساسیت و مقاومت آنها به آنتی بیوتیک نیتروفورانتوئین مشخص شد و مورد بررسی قرار گرفت.در طی مراحل بعدی آزمایش کاهش ‏‎mic‎‏ آنها نسبت به نیتروفورانتوئین در مقابل ساب فراکشن های ‏‎i‎‏ و ‏‎ii‎‏ و منتول چپ گرد و راست گرد و همچنین افزایش مقاومت میکروارگانیسم ها به صورت انتخابی با استفاده از اشعه ماورا بنفش با طول موج 254 نانومتر و تست کاهش ‏‎mic‎‏ توسط فرآورده های ذکر شده در مقابل نیتروفورانتوئین مورد بررسی قرار گرفت.

از آنجائیکه نان به عنوان یک منبع غذایی مهم مورد استفاده مردم جهان می باشد و توجه به کیفیت نان و بالا بردن ارزش تغذیه ای نان و جلوگیری از هدر رفتن سرمایه های ملی به دلیل دور ریزی بالای نان به خصوص لواش در کشور از اهمیت ویژه ای برخوردار است. دراین پایان نامه سعی شده قدمی در جهت افزایش زمان نگهداری نان لواش با کمک لاکتوباسیلها برداشته شود.