نام پژوهشگر: علیاکبر حجتجلالی
رقیه کارخانه مهیار شیخ الاسلامی
موضوع تحقیق حاضر بررسی قارچ های همستیز نماتد های ماده و تخم نماتد ریشه گرهی گونه meloidogyne javanica در استان کرمانشاه می باشد. ریشه های آلوده خیار و نمونه های خاک از سه گلخانه شهرستان کرمانشاه، بیستون و قصرشیرین در طی سال های 1389-1388 جمع آوری شدند. نماتد ها از ریشه و نمونه های خاک بوسیله روش سانتریفیوژ (جنکیس، 1964) جداسازی شدند. سپس نماتد ها براساس روش دگریسه(1969) ثابت و به گلسیرین انتقال داده شدند و براساس خصوصیات ریخت شناسی و ریخت سنجی ، به عنوان گونه m. javanica شناسایی شد. به منظور جداسازی قارچ های همستیز نماتدها، تخم ها و نماتد های ماده بالغ را که با هیپوکلریت سدیم0.5% ضدعفونی شده بودند را روی محیط کشت wa حاوی آنتی بیوتیک گذاشته و برای مدت زمان معینی در دمای 25 درجه سانتیگراد نگهداری شدند. ماده ها و تخم هایی که توسط قارچ ها کلنیزه شده بودند، به محیط های کشت هایی مانند cla ,cma cza ,ma oa ,pda ,pca وwa انتقال داده شدند. قارچ ها با دو روش نوک ریسه و تک اسپور خالص سازی و از طریق خصوصیات ریخت شناسی و ریخت سنجی میکروسکوپی شناسایی شدند. که عبارتند بودند از: acremonium kiliense, alternaria alternate, aspergillus flavus, a. ustus, beniowskia sp., chaetomium murorum, cylindrocarpon destructans, cladosporium macrocarpum, engyodontium album, fusarium chlamydosporum, f. oxysporum, f. proliferatum, f. solani, f.stoveri, f. tricinctum, f. verticillioides, paecillium lilacinum, penicillium chrysogenum, p. coprophilum, p. griseofulvum, peyronellaea glomerata, plectosporium tabacinum, sporothrix schenckii, ulocladium chladosporium. از میان گونه های ذکر شده ،c. macrocarpum ، p. coprophilum, s. schenckii ، u. chladosporium و جنس beniowskia برای فلور قارچ های ایران جدید می باشد. تمامی گونه های ذکر شده گزارش جدیدی از آلودگی طبیعی نماتد ریشه گرهی m. javanica به این قارچ ها در ایران می باشد. همچنین با توجه به اطلاعات موجود گونه های c. murorum c. macrocarpum، f. verticillioides ،, p. coprophilum p. glomerata، p. tabacinum،s. schenckii u. chladosporium،sp. beniowskia گزارش جدیدی از آلودگی طبیعی نماتد ریشه گرهی به این قارچ ها در دنیا می باشد. در این تحقیق اثر این قارچ ها به عنوان همستیز نماتدها در مراحل مختلف زیستی در شرایط آزمایشگاه آزمایش شدند که در نهایت سبب از بین رفتن لاروها و انگلی نمودن تخم و همچنین جلوگیری از تفریخ تخم ها شدند. بعد از گذشت مدت زمان 7 روز در دمای اتاق مورد بررسی قرار گرفتند. در این آزمایش از تخم های ضدعفونی شده در محیط غیر آلوده، به عنوان شاهد استفاده شد. داده ها با طرح کاملا تصادفی آنالیز شدند و با استفاده از آزمون دانکن مقایسه شدند که در نتیجه آن بین تیمارها اختلاف معنی داری وجود داشت.(تکرار=3)
ابوالفضل یحیوی آزاد علی سراجی
در حال حاضر نماتود مولد زخم ریشه ی چای (pratylenchusloosi)، در بسیاری از کشورهای چای خیز جهان از جمله سری لانکا، چین، هندوستان، ژاپن و بنگلادش مهم ترین عامل خسارت زا است. در کشور ما نیز در سال های اخیر این نماتود به عنوان بیماری کلیدی و خسارت زای چای محسوب می شود؛ به طوری که میزان رشد گیاهان آلوده شدیداً کاهش یافته و به علت عدم توانایی ایجاد شاخه و برگ جدید، میزان محصول افت شدید پیدا می کند. در این پژوهش،قارچ های مورد آزمایش از خاک ناحیه فراریشه ی چای جداسازی شدند. پس از شناسایی و خالص سازی جدایه ها، آزمایش های مربوط به همستیزی این قارچ ها با نماتود مولد زخم ریشه ی چای(p. loosi) در محیط آب آگار صورت گرفت. از میان 11 جدایه مورد آزمایش، قارچ paecilomycesmarquandii با میزان مرگ ومیر 6/35 درصد از نوزادان و 17 درصد از بالغین p. loosi، نسبت به سایر قارچ ها برتری داشته است.ضمناً با توجه به میزان انگلی شدن نماتود،شش جدایه ی قارچی p. marquandii، paecilomyces lilacinus، acremonium strictum، clonostachys rosea، fusarium sp. و paecilomyces sp.برای انجام آزمایش های بعدی در محیط های کشت مایع زاپک داکس و مالت و همچنین آزمون گلخانه ای انتخاب شدند. در محیط کشت مایع زاپک داکس، قارچ p. marquandii پس از 72 ساعت، موجب غیر فعال شدن 01/13 درصد از نوزادان p. loosi گردید؛ در حالی که هیچ یک از جدایه ها، تأثیری روی مرگ ومیر بالغین از خود نشان ندادند. در محیط کشت مایع مالت، قارچ p. marquandii پس از 72 ساعت، 3/13 درصد از نوزدان و 28/10 درصد از بالغین p. loosi را غیر فعال نمود. در آزمایش های گلخانه ای، حضور هر شش جدایه قارچ در خاک، در شاخص ارتفاع نهال های چای تأثیر مطلوبی داشته است.