بیماری اسهال ویروسی گاوان و بیماری مخاطی سندرومهایی با نشانههای کلینیکی متفاوت هستند که توسط ویروسی مشابه از جنس پستی ویروس و از خانواده فلاوی ویریده ایجاد می گردند. در تشخیص اولیه وضعیت آلودگی در گله های گاو غالباً بشکل روزمره از آزمایش سرولوژیک الایزا استفاده می شود. آزمایش الایزا ممکن است بصورت غیر مستقیم و یا رقابتی انجام گردد اما بدلیل احتمال وجود واکنش های غیراختصاصی الایزای رقابتی که در آن از آنتی بادی منوکلونال استفاده می گردد ارجحیت دارد. هدف از این مطالعه طراحی تست الایزای رقابتی برای تعیین آنتی بادی های ضد ویروس اسهال ویروسی گاو با استفاده از قطعه ی چهارم پروتئین نوترکیب ns3 و یک آنتی بادی منوکلونال ضد پروتئین ns3 و سپس محاسبه ی حساسیت و ویژگی نسبی آن، در مقایسه با تست خنثی سازی ویروس به عنوان استاندارد طلایی بود. در این تحقیق ابتدا بر اساس یک آزمایش اولیه منوکلونال آنتی بادی مناسب از میان چندین آنتی بادی دردسترس انتخاب گردید. سپس رقت های مناسب آنتی ژن و آنتی بادی منوکلونال و نیز رقت مناسب کنژوگه با استفاده از روش تیتراسیون چکربورد در قالب یک الایزای غیرمستقیم تعیین گردیدند. پس از آزمایش 197 عدد نمونه ی سرمی گاو با الایزای رقابتی استاندارد شده و انجام آنالیز roc در مقایسه با نتایج بدست آمده از تست خنثی سازی ویروس، نقطه ی برش الایزای رقابتی طراحی شده برابر با 88/41 تعیین گردید. با مشخص شدن نقطه برش و نتایج بدست آمده از آزمایش سرم ها، حساسیت و ویژگی الایزای رقابتی در مقایسه با خنثی سازی ویروس بترتیب 93.90% و ویژگی 100% محاسبه گردید. با استفاده از آزمون مک نمار نشان داده شد که تفاوت معنی داری بین روش vn و نتایج الایزای رقابتی وجود ندارد. همچنین برا ساس نتایج بدست آمده مشخص شد که آزمایش طراحی شده نسبت به کیت الایزای تجاری (با حساسیت 81% و ویژگی 92%) دارای کیفیت و کارایی بالاتری می باشد. بنابر این برمبنای نتایج این تحقیق، تست الایزای رقابتی طراحی شده با پروتئین نوترکیب ns3 برای تعیین آنتی بادی های ضد ویروس اسهال ویروسی گاو بسیار مفید می باشد.