نام پژوهشگر: زهرا مشکات

بررسی تاثیر ویروس پاپیلومای انسانی بعنوان یک فاکتور پروگنوستیک در بیماران مبتلا به کارسینوم سلول سنگفرشی حفره دهان بروش واکنش زنجیره ای پلیمراز با انواع معمولی وزمان واقعی
thesis وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشکی - دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی مشهد - دانشکده دندانپزشکی 1392
  مریم زمان زاده   رهام سالک

سرطان سلول سنگفرشی، شایعترین بدخیمی حفره دهان می باشد. عوامل اتیولوژیک مختلفی در ایجاد این بیخیمی دخیل هستند. اخیرا"نقش ویروس های انکوژنیک خصوصا ویروس پاپیلومای انسانی (hpv) در ایجاد این کانسر بسیار مورد توجه قرار گرفته است. پروگنوز بیماران بستگی به مرحله کلینیکی (stage)تومور دارد که یک پارامتر کمی می باشد. grading ، یک ارزیابی هیستوپاتولوژیک از درجه شباهت تومور به بافتهای مادری (اپی تلیوم سنگفرشی) می باشد.ارتباط میان ویروس پاپیلومای انسانی (hpv) و پروگنوزدر کانسر های حفره دهان هنوز کاملا"روشن نشده است. در این مطالعه هدف بررسی پروگنوز بیماران مبتلابه کارسینوم سلول سنگفرشی حفره دهان در دو گروه hpvمثبت و hpv منفی می باشد. مواد وروش ها: در این مطالعه گذشته نگر،114 بلوک پارافینی مربوط به نمونه‏های کارسینوم سلول سنگفرشی حفره دهان که در بخش آسیب شناسی دانشکده دندانپزشکی و بیمارستان امید مشهد آرشیوشده بودند، انتخاب گردید. ویژگی های بالینی شامل سن، جنس ،محل، stageوگرید ضایعه،استراتژی درمانی وآخرین وضعیت بیمار با استفاده از اطلاعات موجود در پرونده مشخص گردید. پس از جمع آوری نمونه ها ابتدا با یک روش استاندارد پارافین زدایی انجام شده و سپس با استفاده از کیت استخراج، dna از نمونه ها استخراج گردید وبا استفاده از روش polymerase chain reaction (pcr) که روش بسیارحساس و دقیقی می باشد بروز این ویروس در scc های دهانی بررسی شد. برای تعیین بار ویروس در نمونه های hpvمثبت از روش real- time pcr استفاده گردید. یافته ها: از 114 بیمار مورد بررسی 15 بیمار (13.16%) مبتلا به hpv بودند که سایپ تایپهایhpv یافت شده در این مطالعهhpv 6و11 می باشد . در مطالعه فعلی شایع ترین ناحیه درگیری ، زبان می باشد ومتوسط سن افراد 58.61 سال بود .از لحاظ آماری میانگین درگیری لنف نود وفوت بیماران در گروه hpv مثبت بیشتر از گروه hpvمنفی می باشد ،همچنین میانگین مدت بقا تا عود(dfs) و میانگین کل مدت بقا(os) در بیماران hpvمنفی بیشتر از بیماران hpvمثبت مشاهده شد. در مطالعه حاضر هیچ تفاوتی بین سن، جنس، محل وسایز تومور، گرید، stage تومورو میزان عود بین دو گروه hpv مثبت و hpv منفی مشاهده نشد. نتیجه گیری : با توجه به شیوع کم hpv در نمونه های مورد مطالعه، همچنان به یقین نمی توان نقش کارسینوژنیک این ویروس را منتفی دانست ونیاز به مطالعات با حجم بیشتر و روشهای نوین تر احساس می گردد. بروز بالای مرگ ومیر در بیماران hpv مثبت نشان دهنده پروگنوز ضعیفتر آنها نسبت به بیماران hpv منفی می باشد.

استفاده از وسترن بلاتینگ به منظور مقایسه ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک با گلیکوپروتئین نوترکیب ‏‎d‎‏ ویروس
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس 1381
  زهرا مشکات   محمدحسن روستایی

ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک ‏‎(hsv-1)‎‏ ، ویروسی انولوپ دار با ‏‎dna‎‏ دو رشته ای خطی است که بیماری های مختلفی در انسان ایجاد می کند که از بیماری های خفیف در بسیاری از بیماران تا بیماری های تهدیدکننده زندگی در نوزادان و افراد با ایمنی سازشکار دیده می شود. این ویروس حداقل 11 گلیکوپروتئین را کد می کند که گلیکوپروتئین ‏‎d‎‏ نقش مهمی درعفونت زایی و پاتوژنز ویروس دارد. دراین پژوهش ، ابتدا ‏‎hsv-1‎‏ تکثیر شد و سپس رقت های متوالی از آن تهیه شد و به یاخته های کلیه گاو ‏‎bk‎‏ اضافه شد و آخرین رقت ویروس که باعث ایجاد اثرات سیتوپاتیک در یاخته های تلقیح شده گردیده بود، جمع آوری گردید. این ویروسها برای تولید آنتی سرم در خرگوش استفاده شد. همچنین آزمایش ‏‎vnt‎‏(آزمایش خنثی سازی ویروس)برای تشخیص و اندازه گیری آنتی بادی های ‏‎hsv-1‎‏ در 100 نمونه سرمی که از افراد مشکوک جمع آوری شده بود، استفاده شد. به منظور انجام آزمایش وسترن بلاتینگ ، ویروس با شیب غلظت سوکروز سانتریفوژ شد و در آزمایش به کار رفت. برای مقایسه وسترن بلاتینگ با ‏‎vnt‎‏ ، ویروسی که در یاخته های هلا تهیه شده بود، استفاده شد. بنابراین برای تعدادی از سرم هایی که در وسترن بلاتینگ ویروس کامل مثبت بودند، با همان رقت ها، آزمایش وسترن بلاتینگ با گلیکوپروتئین نوترکیب ‏‎d‎‏ تولید شده دریاخته ‏‎sf9‎‏ انجام شد که نتایج یکسانی را نشان داد.