این مطالعه به منظور ارزیابی اثرات عصاره هیدروالکلی گل و برگ شبدر قرمز بر روی پارامترهای زنده مانی، تحرک، سلامت غشا سیتوپلاسمی اسپرم، ظرفیت آنتی اکسیدانی سلول اسپرم و نیتریک اکساید تولیدی توسط سلول اسپرم قوچ انجام گرفت. نمونه های منی از 4 راس قوچ قزل بوسیله مهبل مصنوعی جمع آوری شد و پس از مخلوط کردن مورد استفاده قرار گرفت. ارزیابی تحرک اسپرم با استفاده از سیستم computer assisted sperm analyzer (casa)، درصد اسپرم های زنده با استفاده از رنگ آمیزی ائوزین-نگروزین، سلامت غشا سیتوپلاسمی (درصد اسپرمهای با دم پیچیده) با استفاده از تست hypoosmotic swelling test (host)، ظرفیت آنتی اکسیدانی با استفاد از روش frap و نیتریک اکساید (no) تولیدی با استفاده از روش gress انجام گرفت. برای بررسی پارامترهای مذکور نمونه های منی پس از رقیق سازی بوسیله رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ حاوی غلظت های مختلف عصاره برگ و گل شبدر قرمز (0(کنترل)، 5/0، 1 و 2 %) در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری شد و در 5 زمان مختلف (0، 24، 48، 72 و 96 ساعت) مورد اریابی قرار گرفت. برای بررسی frap و no از پلاسمای منی استفاده شد. no تولیدی در اثر عصاره گل 2% در ساعت صفر بیشترین مقدار را دارد و با گذشت زمان کاهش می یابد همچنین در همه زمان ها بجز ساعت 48 و 72 نسبت به سایر غلظت ها بیشترین مقدار را نشان می دهد. غلظت 2% عصاره برگ در همه زمان ها بجز ساعت 96 منجر به تولید بیشترین مقدار no شد. frap در هر سه غلظت عصاره گل نسبت به کنترل بالاتر است، همچنین غلظت 1 و 2 درصد عصاره برگ هم بیشترین مقدار را نسبت به کنترل نشان می دهد. مقدار همه پارامترهای حرکتی بجز bcf، زنده مانی و host با افزایش زمان نسبت به ساعت صفر کاهش یافت، همچنین با افزایش غلظت هر دو عصاره برگ و گل کاهش در پارامترهای فوق مشاهده شد. بر اساس نتیجه این تحقیق اثر مضر عصاره برگ و گل شبدر قرمز روی پارامترهای تحرک، زنده مانی و سلامت غشا سیتوپلاسمی اسپرم قوچ کاملا مشهود است. بطوریکه عصاره برگ و گل شبدر قرمز توانایی رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ را در نگهداری اسپرم قوچ در دمای 4 درجه سانتیگراد کاهش داد.

چکیده: تحقیق حاضر به منظور ارزیابی اثر اضافه کردن ژل رویال به رقیق کننده زرده تخم مرغ- تریس در نگهداری اسپرم قوچ بصورت مایع و در دمای یخچال انجام گرفت. برای این منظور نمونه منی از 4 راس قوچ قزل جمع آوری و پس از ارزیابی اولیه و داشتن کیفیت مطلوب، با هم مخلوط شدند. نمونه منی مخلوط به 5 قسمت تقسیم شده و هر قسمت با رقیق کننده زرده تخم مرغ- تریس بدون ژل رویال (کنترل) و یا حاوی 5/0%، 1% ، 5/1% و 2% ژل رویال به نسبت یک به سه رقیق شدند. نمونه های رقیق شده در دمای 4 درجه سانتی گراد نگهداری شده و در ساعات صفر، 24، 48، 72، 96 و 120 از لحاظ سلامت غشای پلاسمایی و کیفیت تحرک اسپرم مورد ارزیابی قرار گرفتند. سلامت غشای پلاسمایی با روشhost و تحرک اسپرم ها نیز توسط سیستم آنالیز کامپیوتری (casa) تعیین گردید. بر اساس نتایج بدست آمده میزان سلامت غشای پلاسمایی اسپرم های نگهداری شده در حضور ژل رویال بطور معنی داری بیشتر از گروه کنترل بود. هرچند بین غلظت های مختلف ژل رویال اختلاف معنی داری وجود نداشت. تمامی پارامترهای مربوط به سرعت حرکت اسپرم (vcl، vsl و vap) در منی رقیق شده حاوی 5/0%، 1% و 5/1% ژل رویال بطور معنی داری بیشتر از گروه کنترل بود ولی گروه حاوی 2% ژل تفاوت معنی داری با گروه کنترل مشاهده نگردید. بطور کلی با توجه به نتایج این تحقیق اضافه کردن ژل رویال به رقیق کننده زرده تخم مرغ – تریس (تا 5/1%) می تواند باعث بهبود کیفیت اسپرم در هنگام نگهداری بصورت مایع در دمای یخچال گردد. واژگان کلیدی:اسپرم-رقیق کننده تریس-ژل رویال-قوچ قزل

در این تحقیق با افزودن کازئین و عصاره نعناع، میزان فعالیت ace-inhibitory مورد بررسی قرار گرفت. افزون بر ارزش تغذیه ای ناشی از حضور باکتری پروبیوتیک ، غنی شدن از نظر پروتئینی و بدون چربی بودن این محصول ، خاصیت عملکردی آن به دلیل حضور بازدارنده ها و خاصیت آنتی اکسیدانی عصاره نعناع از ویژگی های دیگر این محصول می باشد.افزودن کازئینات سدیم و عصاره نعناع می تواند خصوصیات طعمی و بافتی محصول را تحت تأثیر قرار دهد؛ همچنین ترکیب و غلظت افزودنی ها پروتئولیز ماست را تحت تأثیر قرار می دهد و در نهایت موجب بهبود و توسعه فعالیت بازدارندگی آنزیم مبدل آنژیوتنسین گردد.آنزیم مبدل آنژیوتنسینangiotensin converting enzyme (ace )یک آنزیم متالوکربوکسی پپتیداز حاوی فلز روی و اگزوپپتیداز است و دی پپتیدها را از انتهایc(c-terminel) جدا می کند(murray et al, 2004, 59; (smacchi et al, 2000, 22. اتصال به ace شدیداً تحت تأثیر توالی تری پپتیدی c-terminal سوبسترا است و به نظر می رسد سوبستراهایی ترجیح داده می شوند که به طورعمده باقی مانده های آمینواسیدی هیدروفوبیک داشته باشند. در تیمارهای بدون عصاره با گذشت زمان ph و اسیدیته تقریباَ ثابت اما در مقادیر بالای عصاره نعناع ph کاهش و اسیدیته افزایش یافت(p<0/05).با افزایش مقدار کازئینات سدیم آب اندازی و ظرفیت نگهداری آب کاهش و با گذشت زمان ماندگاری، آب اندازی کاهش اما ظرفیت نگهداری آب ابتدا کاهش و سپس افزایش یافت(p<0/05).حداقل میزان آب اندازی در بیشترین مقدار کازئینات سدیم و مدت زمان نگهداری بالا مشاهده شد(p<0/05).با افزایش میزان کازئینات سدیم، عصاره نعناع و مدت زمان نگهداری ویسکوزیته ظاهری افزایش نشان داد(p<0/05). ماست حاوی مقدار بالای کازئینات و زمان نگهداری بالا بیشترین ویسکوزیته را داشت. در طول 20 روز دوره نگهداری تعداد لاکتوباسیلوس کازئی کاهش و سپس افزایش و با افزایش مقدار کازئینات سدیم تعداد این باکتری افزایش یافت؛ بیشترین رشد پروبیوتیک در میزان کازئینات بالاتر و اواخر دوره نگهداری مشاهده شد(p<0/05).با افزایش درصد عصاره نعناع شاخصb* افزایش و با گذشت زمان کاهش یافت. تأثیر عصاره بر شاخص b* قوی تر از مدت زمان نگهداری و زمان تنها فاکتور موثر بر فعالیت آنتی اکسیدانی بود(p<0/05). با افزایش مدت زمان نگهداری میزان o-phthaldialdehayde (opa) افزایش و در مقادیر کم عصاره نعناع با افزایش درصد کازئینات سدیم میزان opa افزایش یافت اما در مقادیر بالای عصاره با افزایش سدیم کازئینات میزان opa ابتدا افزایش و سپس کاهش نشان داد(p<0/05).در اوایل دوره نگهداری با افزایش درصد کازئینات سدیم بازدارندگی افزایش و در اواخر این دوره کاهش یافت(p<0/05).در زمان های نخست با افزایش مقدار عصاره نعناع بازدارندگی تقریباً ثابت اما در اواخر این دوره با افزایش میزان عصاره نعناع فلفلی بازدارندگی افزایش یافت(p<0/05).

کاهش میزان خون و به تبع آن کاهش اکسیژن رسانی می تواند موجب تغییر در عملکرد و ساختار بیضه و اسپرماتوژنز گردد، همچنین آهن آزاد شده از گلبول های قرمز و به دنبال آن افزایش آهن بافتی ممکن است ایجاد استرس اکسیداتیو نماید. تا کنون هیچ تحقیقی در رابطه با ارتباط بین آنمی همولیتیک و اثرات آن بر پارامترهای بیضه انجام نگرفته است. از این رو در مطالعه حاضر تعداد 49 موش سوری نر بالغ 20 تا 25 گرمی در 7 گروه مورد استفاده قرار گرفتند. گروه اول کنترل، دریافت کننده سرم فیزیولوژی و سه گروه دریافت کننده فنیل هیدرازین با دوزهای h48/ gr100 mg/ 6 و 4 ،2 و سه گروه دیگر همراه فنیل هیدرازین کروسین با دوز mg/k/day200 به مدت 35 روز دریافت نمودند. پس از این مدت نمونه های سرمی، اسپرم ها و بافت بیضه جدا شدند. نمونه های سرمی برای آزمایشات سرمی، نمونه اسپرم برای ارزیابی کیفیت اسپرم و ivf و بافت بیضه برای مطالعه بافت شناسی، مورفومتری و هیستوشیمی مورد استفاده قرار گرفتند. نتایج نشان دهنده کاهش چشم گیر اکثر پارامترهای بیضه از قبیل کیفیت اسپرم، توان باروری و تغییرات معنی دار مروفومتری و پارامترهای سرمی و بیضه در گروه های دریافت کننده فنیل هیدرازین بود. همچنین بررسی گروه های دریافت کننده کروسین به عنوان یک آنتی اکسیدانت نشان دهنده به حداقل رسیدن این تغییرات بود. بطور کلی کروسین قادر به خنثی نمودن عوارض ناشی از آنمی همولیتیک در رابطه با پارامترهای بیضه ای بوده، و بنابراین می توان بیان نمود که استرس اکسیداتیو و پروکسیداسیون چربی ناشی از عوارض آنمی همولیتیک دلیل عمده این تغییرات می باشد.

نیکوتین از ترکیبات سیگار، و از عوامل اصلی اختلال عملکردی در ارگان های مختلف بدن به حساب می آید. نیکوتین ترکیبی آلکالوئیدی است که از نظر داروشناسی یک محرک است، و نیز اصلی ترین عامل اعتیاد به سیگار به شمار می آید. تاثیرات نیکوتین بر دستگاه تناسلی نر و باروری شناخته شده است. بومادران با گل های سفید،(a.millefolium)، گیاه خودرو است، که جزو گیاهان دارویی دسته بندی می گردد، و دارای ویژگی های آنتی اکسیدانتی و ضد انعقادی می باشد. این مطالعه به منظور ارزیابی توانایی عصاره الکلی بومادران، در برابر تاثیرات زیان بار ناشی از مصرف نیکوتین در دو دز متفاوت، در بافت بیضه، صورت پذیرفت. بدین منظور، 25 سر موش صحرایی نر نژاد ویستار، پس از دوره ی 15 روزه سازگاری با محیط، به طور تصادفی به 5 گروه تقسیم گردیدند. دو گروه (گروه 1 و گروه 3)، نیکوتین را به ترتیب در دز های mg/kg-bw 2/0 و 4/0 روزانه به صورت تزریق داخل صفاقی دریافت نمودند. گروه های (2 و 4) علاوه بر دریافت نیکوتین در دزهای به ترتیب mg/kg-bw 2/0 و 4/0 ، به صورت داخل صفاقی، عصاره ی الکلی بومادران را نیز به میزانmg/kg-bw120 روزانه و به صورت گاواژ دریافت نمودند. طول مدت درمان 48 روز تعیین گردید، و گروهی نیز به عنوان کنترل در نظر گرفته شد. 24 ساعت پس از آخرین درمان، پس از اخذ نمونه های سرمی، تمام حیوانات با گاز co2آسان کشی و سپس کالبدگشایی گردیدند. ابتدا بیضه ها اخذ و توزین گردید. پس از ارزیابی پارامترهای خصوصیات اسپرم، بیضه ها پس از طی مراحل ثبوت، تهیه مقطع و رنگ آمیزی های مختلف، از نظر تغییرات مورفولوژِیک، مورفومتریک، شاخص اسپرماتوژنز و میزان بافتی چربی و کربوهیدرات ها، مورد بررسی قرار گرفتند. مقادیر سرمی تستوسترون، lh، fsh، ldh، sod وtaocمورد ارزیابی قرار گرفت. از سویی میزان mda، no و ttmبافت بیضه، اندازه گیری گردید. گروه های 1 و 3 کاهش معنی دار (05/0 p<) در وزن بدن و وزن بیضه ها، tdi، پارامتر های استریولوژیک (قطر لوله های منی ساز، ارتفاع اپیتلیوم لوله های منی ساز، ضخامت کپسول بیضه، تعداد سلول های لیدیک و سلول های رده ی اسپرماتوژنز)، را نشان دادند. در این دو گروه تغییرات ساختاری در بافت بیضه، مانند پرخونی عروق بافت بیضه، ادم بافتی و حفره دار شدن اپیتلیوم، به همراه افزایش معنی دار ضخامت اپیتلیوم مشاهده گردید. تجویز نیکوتین در دزهای mg/kg-bw 2/0 و 4/0، به شکل معنی دار، سبب کاهش مقادیر سرمیfsh، lh، sod،taoc و تستوسترون و افزایش مقادیر سرمی ldhگردید. همچنین در این گروه ها کاهش میزان ttmو افزایش مقادیر mdaو noدر بافت بیضه مشاهده گردید.در حالیکه مصرف همزمان عصاره ی الکلی بومادران به همراه دو دز یاد شده ی نیکوتین، سبب تاثیر مثبت و بهبود معنی دار پارامتر های ذکر شده، گردید. از یافته های این مطالعه ی چنین بر می آید که نیکوتین به واسطه ی اعمال مختلف مانند تاثیرات اکسیدانتی، سبب تخریب و آسیب بافت بیضه می گردد، و عصاره ی الکلی بومادران تاثیرات مثبت خود را با مهار آسیب استرس اکسیداتیو، در جهت بهبود آثار زیان بار نیکوتین برروی ناباروری ایفا می نماید.

چکیده پایان نامه ی شماره 661-2 ک کارشناسی ارشد بافت شناسی دامپزشکی، دانشگاه ارومیه سال تحصیلی: 1392-1391 عنوان پایان نامه: مطالعه تغییرات ناشی از اثرات تخریبی نیکوتین بر ساختار بافت شناسی فولیکول های تخمدان و اثر محافظتی عصاره الکلی گیاه بومادران در موش صحرایی نگارنده: فاطمه بالازاده کوچه نیکوتین آلکالوئیدی (شبه قلیا) از برگ های خشک شده گیاه تنباکو است که از طریق مصرف سیگار مورد استفاده میلیون ها نفر در سراسر جهان می باشد. مصرف نیکوتین هم در زنان و هم در مردان با ایجاد اختلالات باروری همراه است که مسمومیت تولیدمثلی را در انسان و حیوانات آزمایشگاهی موجب می گردد. بومادران گیاه دارویی می باشد که به سبب دارا بودن ویژگی های دارویی متعدد از جمله خواص آنتی اکسیدانتی مورد توجه بسیار قرار گرفته اند. این مطالعه به منظور ارزیابی کارایی عصاره های الکلی گل گیاه بومادران که دارای فعالیت آنتی اکسیدانتی می باشند، به عنوان ترکیبات محافظ در برابر مسمومیت تخمدان ناشی از سم نیکوتین در موش های صحرایی صورت پذیرفت. برای انجام این مطالعه تعداد 25 سر موش صحرایی ماده نژاد ویستار با میانگین وزنی 96/7±55/178 گرم متعاقب یک هفته سازگاری با شرایط محیطی جدید به صورت تصادفی به پنج گروه پنج سری تقسیم شدند. دو گروه از موش ها سم نیکوتین را به میزان 2/.و 4/. میلی گرم به ازای هر کیلوگرم وزن بدن به صورت خوراکی روزانه به مدت 25 روز دریافت کردند. .دو گروه از گروههای فوق، عصاره های الکلی گل گیاه بومادران را متعاقب نیکوتین روزانه به میزان 2/1 گرم به ازای هر کیلوگرم وزن بدن به صورت خوراکی پس از تجویز سم نیکوتین دریافت می نمودند. گروه کنترل نیز در نظر گرفته شد. 24 ساعت پس از آخرین تیمار و متعاقب اخذ نمونه های خون، تمامی موش های صحرایی موجود درپنج گروه ذکر شده آسان کشی و کالبد گشایی شدند و تخمدان ها جدا سازی گردیدند. سپس تغییرات مورفولوژیک و مورفومتریک، شاخص های فولیکوژنز، میزان کربوهیدرات ها و چربی ها و نیز فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز و در مقاطع بافتی تهیه شده از بافت تخمدان مورد ارزیابی قرار گرفتند. علاوه بر این موارد، مقادیر سرمی استرادیول، لاکتات دهیدروژناز (ldh)، و نیزمیزان مالون دی آلدئید(mda)، نیتریت تام (no)و ظرفیت آنتی اکسیدانتی تام(taoc)بافت تخمدان اندازه گیری گردید. گروهی از موش های صحرایی که تنها سم نیکوتین را دریافت کرده بودند کاهش معنی داری در وزن بدن، تخمدان ها ، شاخص های فولیکوژنز به همراه تغییرات مورفولوژیک و هیستومورفومتریک در بافت تخمدان شامل پرخونی عروق خونی، نفوذ سلول های ایمنی، تجمع مایعات ناشی از ادم بافتی در بافت همبند بینابینی را نشان دادند. سلول های گرانولوزا و لایه های تک داخلی ، اووسیت و اووپلاسم اووسیت و مایع فولیکولی در فولیکولهای آترتیک در موش های تحت درمان با سم نیکوتین واکنش ضعیفی نسبت به رنگ آمیزی pas، واکنش بالایی نسبت به رنگ آمیزی های سودان بلک – ب، اویل- رد- او و آلکالین فسفاتاز و نیز افزایش معنی داری را در میزان آپوپتوز نشان دادند. علاوه بر این، تجویز سم نیکوتین کاهش معنی داری در تعداد فولیکولهای سالم و در عین حال افزایش معنی داری در میزان فولیکولهای آترتیک و کیستیک را موجب گردید. همچنین درمان با سم نیکوتین به شکل غیرمعنی داری موجب کاهش مقادیر سرمی هورموناسترادیول و افزایش سطوح سرمی لاکتات دهیدروژناز (ldh)،در کنار کاهش میزان ظرفیت آنتی اکسیدانتی تام و افزایش مقادیر مالون دی آلدئید و نیتریت تامبافت تخمدان گشت. حال آنکه درمان همزمان با عصاره های آبی گل گیاه بومادران بهبود قابل ملاحظه ای را در پارامتر های مذکور سبب گردید. یافته های به دست آمده از این مطالعه نشان می دهد که سم نیکوتین به واسطه اعمال استرس اکسیداتیو می تواند موجبات آسیب بافت تخمدان را فراهم آورد، در حالی که عصاره های آبی گل گیاه بومادران به سبب دارا بودن قابلیت مهار رادیکال های آزاد و فرآیند های اکسیداتیو می توانند به گونه ای موثر در برابر واکنشهای ناخواسته ناشی از این دارو نقش حفاظتی را ایفا کنند.

تعداد 56 قطعه موش سوری نر جوان بالغ (12-8 هفته) به طور تصادفی به هفت گروه شامل گروه کنترل، کنترل شم و تجربی تقسیم شدند. گروه کنترل فقط سرم فیزولوژی را از راه دهانی، و گروه کنترل شم متوترکسات را با دز 20 میلی گرم بر کیلو گرم به روش تزریق داخل صفاقی هفته ای یک بار، گروه های تحربی اول ، دوم و سوم همراه متوترکسات عصاره میوه ذغال اخته را به ترتیب با دز روزانه 250، 500، 1000 میلی گرم بر کیلو گرم وزن بدن از راه دهانی و گروه کنترل منفی بدون تجویز متوترکسات عصاره میوه زغال اخته با دز روزانه 1000 میلی گرم بر کیلو گرم وزن بدن از راه دهانی و گروه کنترل مثبت همراه متوترکسات به طور روزانه ویتامین e با دز 100 واحد بر کیلو گرم از راه دهانی به مدت 35 روز بطور متوالی دریافت کردند. در گروه کنترل شم کاهش معنی داری در وزن بدن، تغییرات مورفولوژیک شدیدی در بافت بیضه شامل واکوئل دار شدن و گسیختگی اپی تلیوم زایا، پرخونی عروق خونی، تجمع مایعات ناشی از ادم بافتی در بافت همبند بینابینی، کاهش معنی دار در میانگین پارامتر های هیستومورفومتری شامل میانگین تعداد سلول های سرتولی، لیدیگ، ماست سل درسطح یک میلی متر مربع و کاهش در میانگین قطر لوله های منی ساز ، ارتفاع اپی تلیوم زایگر، ضخامت کپسول بر حسب میکرومتر و کاهش ضرایب شامل تمایز لوله ای، اسپرمیوژنز و ضریب تجمعی( تمایز سلول های اسپرماتوگونی فعال از اسپرماتوگونی غیر فعال) را نشان دادند. سلول های اسپرماتوژنیک در موش های تحت درمان با داروی متوترکسات واکنش ضعیفی نسبت به رنگ آمیزی pas، واکنش بالایی نسبت به رنگ آمیزی اویل- رد- او و آلکالین فسفاتاز را نشان دادند. علاوه بر این، در گروه کنترل شم کاهش در تعداد و میزان تحرک اسپرم ها و در عین حال افزایش در میزان اسپرم های مرده، غیرطبیعی، آسیب dna وعدم بلوغ هسته را موجب گردید. همچنین درمان با داروی متوترکسات به شکل معنی داری موجب کاهش مقادیر سرمی هورمون تستوسترون و ظرفیت آنتی اکسیدانتی تام و افزایش مقادیر مالون دی آلدئید بافت بیضه گشت. حال آنکه درمان همزمان با عصاره هیدروالکلی زغال اخته با دزهای مختلف بخصوص دز 500 میلی گرم بر کیلو گرم وزن بدن و ویتامین e بهبود قابل ملاحظه ای را در پارامتر های مذکور سبب گردید. همچنین میزان باروری آزمایشگاهی در گروه کنترل شم تعداد جنین های دو سلولی و بلاستوسیت در مقایسه با سایر گروها کاهش و تعداد جنین های متوقف شده افزایش معنی دار نشان داد یافته های به دست آمده از مطالعه حاضر نشان می دهد که داروی متوترکسات به واسطه اعمال استرس اکسیداتیو می تواند موجبات آسیب بافت بیضه را فراهم آورد و بر روی کارآیی تولید مثلی موش سوری تاثیر بگذارد، در حالی که عصاره هیدروالکلی زغال اخته و ویتامین e به سبب دارا بودن قابلیت مهار رادیکال های آزاد و فرآیند های اکسیداتیو می توانند به گونه ای موثر در برابر واکنش های ناخواسته ناشی از این دارو نقش حفاظتی را ایفا کنند.

تحقیق حاضر به منظور ارزیابی اثرات اضافه کردن 17بتا-استرادیول و آلفا-زرالینول به رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ در نگهداری اسپرم قوچ بصورت مایع و در دمای یخچال انجام گرفت. برای این منظور نمونه منی از 4 راس قوچ قزل جمع آوری و پس از ارزیابی اولیه از لحاظ حجم، غلظت، رنگ و حرکت توده ای با هم مخلوط شدند و به 7 قسمت تقسیم شده و هر قسمت با رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ بدون ترکیبات استروژنی (کنترل) و یا حاوی 100 پیکو مولار، 100نانومولار و 100میکرومولار آلفا زرالینول و یا 17بتا-استرادیول رقیق شدند. نمونه های رقیق شده دریخچال (دمای 4 درجه سانتی گراد) نگهداری شده و در ساعات صفر، 24، 48، 72 و 96 از لحاظ سلامت غشای پلاسمایی و کیفیت تحرک اسپرم، قدرت زنده مانی اسپرم ها (viability)، میزان نیتریک اکساید(no) تولیدی و ظرفیت آنتی اکسیدانی تام (tac) مورد ارزیابی قرار گرفتند. سلامت غشای پلاسمایی با روشhost و تحرک اسپرم ها نیز توسط سیستم آنالیز کامپیوتری (casa) و قدرت زنده مانی اسپرم ها با استفاده از رنگ آمیزی ائوزین - نگروزین تعیین گردید. برای سنجش no از روش griess و برای تعیین میزان ظرفیت آنتی اکسیدانتی تام (tac) از روش farpاستفاده شد. بر اساس نتایج بدست آمده، کاهش معنی داری در اکثر پارامترهای تحرکی اسپرم کل بجز (lin وbcf)، اسپرم های متحرک، اسپرم های با حرکت پیشرونده، درصد سلامتی غشای پلاسمایی اسپرم، درصدزنده مانی، درصد اسپرم های متحرک و درصد اسپرم های با حرکت پیشرونده، در محیط حاوی 100میکرومول آلفا-زرالینول در مقایسه با گروه بدون ترکیبات استروژنی (کنترل) مشاهده شد. میزان نیتریک اکساید تولیدی در بین غلظت های مختلف استرادیول و آلفا-زرالنول و در بین زمان های مختلف تفاوت معنی داری با یکدیگر و با گروه کنترل نداشتند. ظرفیت آنتی اکسیدانی بصورت وابسته به غلظت و زمان در گروههای حاوی غلظت های مختلف آلفا-زرالینول و 17بتا-استرادیول اختلاف معنی داری داشتند. بطور کلی با توجه به نتایج این تحقیق اضافه کردن آلفا-زرالینول به میزان بیشتر از 100میکرومول به رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ باعث کاهش کیفیت اسپرم قوچ، در هنگام نگهداری بصورت مایع در دمای یخچال گردید در صورتیکه استرادیول چنین تاًثیری نداشت.

هدف از این تحقیق ارزیابی تاثیر افزودن غلظت¬¬های مختلف کوئرستین به رقیق¬کننده تریس- زرده تخم¬مرغ بر روی اسپرم قوچ بود که برای مدت 72 ساعت در دمای c °4 نگهداری شده بودند. برای این منظور از 4 رأس قوچ اکوتیپ قزل با میانگین سن 6 سال .نمونه های منی با توسط واژن مصنوعی جمع آوری گردید. نمونه های منی پس از ارزیابی اولیه از لحاظ حجم، رنگ، غلظت و حرکت توده¬ای و اطمینان از داشتن کیفیت قابل قبول با هم مخلوط شدند. نمونه های مخلوط شده به 4 قسمت تقسیم شد و هر قسمت با رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ با غلظت های 10،20،30 و صفر(کنترل) میکرو مولار کوئرستین رقیق شدند. نمونه های رقیق شده در دمای c °4 نگهداری شده و در ساعات صفر، 24، 48 و 72 مورد ارزیابی قرار گرفتند. درصد اسپرم های زنده با روش رنگ آمیزی ائوزین-نگروزین،سلامت غشای پلاسمایی اسپرم با روش host , کیفیت تحرک اسپرم ها توسط سیستم آنالیز کامپیوتری (casa) تعیین گردید. میزان ظرفیت آنتی اکسیدانی تام(tac) رقیق کننده پس از جداسازی اسپرم ها با روش frap و میزان آنزیم ldh تولیدی آن با استفاده از کیت مربوطه مورد ارزیابی قرار گرفتند. بر اساس نتایج به دست آمده کوئرستین موجب افزایش معنی داری درصد اسپرم های زنده، اسپرم های با حرکت پیش رونده، اسپرم های متحرک و اسپرم ها با غشای پلاسمایی سالم گردید(p≤0.05). همچنین کوئرستین باعث افزایش معنی دار ظرفیت آنتی اکسیدانی رقیق کننده و نیز کاهش میزان آنزیم ldh آن شد. بطورکلی بر اساس نتایج حاصل از این تحقیق اضافه کردن کوئرستین به رقیق کننده تریس-زره تخم مرغ موجب حفظ بیشتر کیفیت اسپرم های قوچ هنگام نگهداری آن بصورت مایع در دمای c °4 می گردد که می تواند ناشی از اثرات آنتی اکسیدانی آن باشد.

کاهش میزان خون و به تبع آن کاهش اکسیژن رسانی می تواند موجب تغییر در عملکرد و ساختار بیضه و اسپرماتوژنز گردد، همچنین آهن آزاد شده از گلبول های قرمز و به دنبال آن افزایش آهن بافتی ممکن است ایجاد استرس اکسیداتیو نماید. از این رو در مطالعه حاضر تعداد 56 سر موش نر بالغ 20 تا 25 گرمی در 8 گروه مورد استفاده قرار گرفتند. گروه اول کنترل، گروه دریافت کننده سرم فیزیولوژی و گروه دوم کنترل شم که فنیل هیدرازین با دز mg6/gr100/h48 به مدت 35 روز دریافت نمود، گروه سوم به همراه فنیل هیدرازین، ویتامین c با دز mg/kg/day 250 به صورت روزانه و داخل صفاقی تزریق گردید. گروه چهارم به همراه فنیل هیدرازین، ژل رویال را با دز mg100/kg/day به صورت گاواژ روزانه دریافت کردند. گروه پنجم به همراه فنیل هیدرازین، ویتامین c با دز mg250/kg/day و نیز ژل رویال را هم با دز mg100/kg/day به صورت گاواژ، روزانه دریافت کردند. گروه ششم شامل موش هایی هستند که ویتامین c بدون تزریق فنیل هیدرازین دریافت کردند. گروه هفتم شامل موش هایی بودند که ژل رویال بدون تزریق فنیل هیدرازین دریافت نمودند. گروه هشتم شامل موش هایی بودند که ژل رویال و ویتامین c با هم و با دزهای مشابه گروه های قبل بدون تزریق فنیل هیدرازین دریافت نمودند. پس از این مدت نمونه های سرمی، اسپرم و بافت بیضه تهیه شدند. نمونه های سرمی برای آزمایشات سرمی، نمونه اسپرم برای ارزیابی کیفیت اسپرم و بافت بیضه برای مطالعه بافت شناسی، مورفومتری و هیستوشیمی مورد استفاده قرار گرفتند. نتایج نشان دهنده کاهش چشم گیر اکثر پارامترهای مورد مطالعه از قبیل کیفیت اسپرم، تغییرات معنی دار مورفومتری و پارامترهای سرمی و بیضه در گروه های دریافت کننده فنیل هیدرازین بود. همچنین بررسی گروه های دریافت کننده ویتامین c و ژل رویال به عنوان آنتی اکسیدانت نشان دهنده به حداقل رسیدن این تغییرات بود. بطور کلی ویتامین c و ژل رویال به تنهایی و یا با هم قادر به خنثی نمودن عوارض ناشی از آنمی همولیتیک در رابطه با پارامترهای بیضه ای بود، و بنابراین می توان بیان نمود که استرس اکسیداتیو و پروکسیداسیون چربی ناشی از عوارض آنمی همولیتیک دلیل عمده این تغییرات می باشد.

هدف این مطالعه به منظور ارزیابی اثرات زرالنون(zea) بر تغییرات مربوط به بیان ژن های تنظیم کننده های سیکل سلولی cyclind1 و e2f1 در سطح mrna و همچنین برای تحلیل اثرات شبه استروژنی zea بر سیستم تولید مثلی نر صورت گرفته است. مواد و روش کار 30 قطعه موش صحرایی نر بالغ بصورت تصادفی در 5 گروه با عناوین: کنترل (ml 5/0نرمال سالین به صورت داخل صفاقی) و گروههای دریافت کننده zea (mg/kg4،2،1بصورت داخل صفاقی) و گروه استاندارد که 17?-استرادیول (mg/kg1/0 به صورت داخل صفاقی) تقسیم بندی شدند. همه موشها به مدت 28 روز مواد مذکور را دریافت کردند. میزان بیانmrna ی cyclin d1 به روش rt-pcrنیمه کمی بیان پروتئین آن به روشایمنوهیستوشیمیایی بررسی شد. همچنین تغییرات مربوط به mrnaی e2f1از طریق rt-pcr نیمه کمی تعیین شد. آپوپتوز سلولی از طریق آزمایشهای tunel وdna ladder ارزیابی گردید. درصد لوله های منی ساز با ضرایب تمایز لوله ای (tdi)، بازسازی لوله ای (ri) و اسپرمیوژنز (spi) منفی مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: مشاهدات نشان دادند که zea بصورت وابسته به دز آپوپتوز سلولی و آسیب dna را در بافت بیضه افزایش داده بود. قابل ذکر است که دز متوسط zea و 17?-استرادیول فنوتیپ مشابهی را در این خصوص نشان می دادند. بررسی های بیشتر نشان دادند که تجویز دز متوسط zea و 17?-استرادیول بطور قابل توجهی سبب افزایش بیان cyclind1 وe2f1 در بیضه شدند. در مقابل، تغییرات قابل ملاحظه ای در میزان mrnaی ژن های مذکور در دز پایین zea (mg/kg1) روئیت نگردید. این در حالی بود که دز بالاتر zea (mg/kg4) میزان بیان mrnaی هر دو ژن را کاهش داده بود. نتایج ایمنو هیستوشیمیایی مربوط به پروتئین cyclin d1 نشان دادند که میزان بیان این پروتئین در دز متوسط (mg/kg2) افزایش و دز بالا (mg/kg4) کاهش یافته بود. بررسی های هیستومورفومتریک نشان داد که zea در دز متوسط (mg/kg2) و بالا (mg/kg4) درصد لوله های tdi، ri و spi منفی را افزایش داده بود. نتیجه گیری با توجه به یافته های مطالعه حاضر، zea آپوپتوز سلولی را در بافت بیضه بواسطه تغییر در عملکرد سیستم تنظیم کننده سیکل سلولی یعنی cyclind1,e2f1 افزایش می دهد. این امر به نوبه خود می تواند در فرایند های طبیعی اسپرماتوژنز و اسپرمیوژنز تاثیر بگذارد. مضافاً اینکه، zea در دز متوسط اثرات مشابه با 17? -استرادیول القاء می نماید. این در حالی است که دز بالا و پایین zea مکانیسم متفاوتی را نشان میدهد. کلمات کلیدی: زرالنون، بافت بیضه، شکست dna ، آپوپتوز، cyclind1,،e2f1

چکیده ندارد.