نام پژوهشگر: مهدی گلچین

ارزیابی وجود خصوصیت پرتوانی در سلول های مزانشیمی ماتریکس بند ناف بز با بررسی عامل نسخه برداری اولیه نانوگ
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1328
  مژگان مشرفی   مهدی گلچین

سلولهای مزانشیمی ماتریکس بند ناف منبعی غنی از سلولهای بنیادی چند توان هستند که به خاطر خصوصیات ویژه، میوفیبروبلاست نامیده می شوند. در سلول های بنیادی توانایی تمایز و بازسازی به وجود فاکتورهای رونویسی نانوگ ، oct4، sox2 نسبت داده می شوند. تاکنون وجود این ژن ها را در سلولهای بند ناف انسان، خوک و برخی حیوانات دیگر بررسی کرده اند. اما تا به حال در بز تحقیقی در این زمینه انجام نگرفته است. بنابراین در مطالعه ی حاضر به بررسی خصوصیات کشت سلولهای مزانشیمی ماتریکس بند ناف بز و ردیابی عامل پرتوانی نانوگ در آنها پرداخته شده است. بدین منظور تعدادی رحم کشتارگاهی بز متعلق به جنین های نزدیک زایمان تهیه شد و پس از جداسازی بند ناف آن ها، ژله وارتون به روش کاشت، کشت داده شد. سلول های جدا شده، به منظور ردیابی پروتئین اکتین رشته ای و تشکیل کلونی و وجود فعالیت آلکالین فسفا تازی بررسی شدند. هم چنین سلول ها با غلظت اولیه ی 104 ×2 سلول به مدت 11 روز کشت داده شدند و نهایتاً خصوصیات رشد و زمان دو برابر شدن آن ها محاسبه گردید واز میان ژن های موثر در پرتوانی سلول ها، بیان ژن نانوگ به وسیله ی روش rt – pcr مورد مطالعه قرار گرفت. مشاهدات نشان داد که این سلولها دو شکل ساختاری، دوکی و کروی دارند. زمان دو برابر شدن آن ها کوتاهتر از زمان دو برابر شدن فیبروبلاست های جنینی است و در روز نهم کشت پایه، کلونی های سلولی با قطر متوسط 6/3 ± 169ماکرومتر شکل گرفتند. این سلولها f- actin مثبت و دارای کلونی های آلکالین فسفا تاز مثبت هستند و ژن نانوگ درپاساژ نهم آن ها بیان نمی شود. لذا می توان نتیجه گیری نمود که ماتریکس بند ناف بز منبعی غنی از سلول هایی است که خصوصیات سلولهای بنیادی را از خود نشان می دهند ولی براساس مطالعه ی حاضر نمی توان آن ها را جزو سلولهای بنیادی پرتوان قرار داد.

تعیین شیوع سرولوژیک کوکسیلا بورنتی در گله های بز کرمان با روش الایزای غیرمستقیم
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1388
  سجاد حسینی نسب   محمد خلیلی

تب کیو توسط باکتری گرم منفی، میله ای، کوچک داخل سلولی اجباری، کوکسیلا بورنتی ایجاد می شود. این بیماری زئونوز درسرتاسر دنیا اندمیک است. نشخوارکنندگان اهلی شامل گاو، گوسفند، بز و حیوانات خانگی به عنوان مخازن اولیه برای عفونت انسان مورد توجه هستند. هدف از این مطالعه بررسی حضور آنتی بادی ضدکوکسیلا بورنتی در بز های اطراف کرمان بود. 113 نمونه ی سرمی از 13 گله بز به صورت تصادفی جمع آوری شد. کیت الایزا تب کیو chekit (کمپانی ایدکس، آمریکا) برای شناسایی آنتی بادی اختصاصی ضد کوکسیلابورنتی در بز استفاده شد. نتایج بررسی نشان داد که 63/71 درصد از نمونه های سرمی از نظر حضور آنتی بادی ضد کوکسیلا بورنتی مثبت بودند و تمامی گله ها حداقل یک نمونه مثبت داشتند. این مطالعه حاکی از شیوع بالای آنتی بادی ضد کوکسیلا بورنتی در گله های بز کرمان است. مطالعات قدیمی خیلی کمی (بیش از 50 سال قبل) درباره تب کیو در ایران صورت گرفته است. کوکسیلا بورنتی عامل تب کیو در انسان است و در بز سبب اختلالات تولید مثلی نظیر سقط های شدید می گردد. بنابراین مطالعات بیشتری برای تعیین سیمای اپیدمیولوژی عفونت در سراسر ایران مورد نیاز است.

هیداتیدوزیس در شتر ها و نقش آنها در اپیدمیولوژی اکینوکوکوس گرانولوزوس در کرمان
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1389
  سعید فتحی   محمد میرزایی دهقی

این مطالعه یک بررسی مقطعی است که از مهر88 الی مهر89 با هدف تعیین میزان شیوع هیداتوزیس در شترهای کشتار شده در کشتارگاه کرمان انجام پذیرفت. از مجموع ??? شتر کشتار شده، آزمایش شده در کشتارگاه، ?? نفر (??/ ?? %) آلوده به کیست هیداتید بودند. میزان آلودگی بر اساس سن، از نظر میزان عفونت، شترهایی با سن بالاتر آلودگی بیشتری نسبت به شترهای جوانتر داشتند که از نظرآماری اختلاف معنی داری را نشان می داد (05/0> p). بیشترین میزان آلودگی در فصل پاییز مشاهده شد و اختلاف معنی داری بین شیوع آلودگی در فصول مختلف وجود نداشت (05/p<0). از مجموع ?? شتر آلوده به کیست هیداتید، 21 نفر ( 66/46 % ) کیست را فقط در ریه، 9 نفر (20 %) فقط در کبد، و در 15 نفر(33 /33%) آلودگی را در چندین ارگان داشتند. از مجموع 62 ارگان آلوده ، به کیست هیداتید، ریه با 06/58 در صد، بیشترین ارگان آلوده به کیست بود، کبد با 70/38 در صد و طحال با 22/3 در صد، آلوده به کیست هیداتید بودند. پس از اندازه گیری 361 کیست، مشخص شد که 140 (78/38) کیست اندازه کوچک، 128(45/35) کیست اندازه بزرگ، 33 (14/9) کیست اندازه متوسط را داشتند و 60 (62/ 16) کیست ها کلسیفیه بودند. توزیع کیست ها بر اساس اندازه در ارگان های مختلف معنی دار بود (05/0> p). در مجموع از 361 کیست جدا شده 17/58 % بارور، 20/25% استریل و 62/16% کیست ها کلسیفیه یا چرکی بودند. میزان کیست های کلسیفیه شده در کبد، نسبت به ریه بالاتر بود. میزان باروری کیست ها در ارگان های مختلف اختلاف معنی دار را نشان داد (05/0> p)، کیست های ریه بیشترین میزان باروری را داشتند (05/0> p). همچنین از مجموع 210 کیست که برای زنده بودن مورد آزمایش قرار گرفتند، 120 (14/57) کیست زنده بودند (05/0> p). نتایج نشان داد هیداتیدوزیس یک بیماری انگلی مهم در منطقه می باشد این نتایج شیوع بیماری را در کشتارگاه کرمان نشان می دهد و گویای اطلاعاتی برای پیشگیری و کنترل هیداتیدوزیس می باشد.

ژنوتایپینگ و آنتی بیوگرام جدایه های تولیدکننده شیگاتوکسین و انتروهموراژیک در کبوتران شهر کرمان
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1390
  شیرین دانش دوست   محمود صالحی

مقدّمه: امروزه سویه انتروهموراژیک اشریشیاکلی به عنوان یکی از عوامل مسبب بیماریهای مشترک انسان و دام شناخته شده اند زیرا از طریق مدفوع طیور و کبوتران سالم به محیط، آب و غذا منتقل شده و باعث بیماری در انسان می گردند. مواد و روش کار: در این بررسی نمونه های مدفوع تازه و سواب مدفوعی از 154 کبوتر سالم اخذ گردید. از نمونه های باکتری شناسی اشریشیاکلی جدا شده و با آزمایش های بیوشیمیایی تایید شدند.حساسیت آنتی بیوتیکی جدایه ها به روش انتشار دیسک آزمایش گردید. از تمامی جدایه ها dna به روش لیز استخراج شد. شناسایی پاتوتیپ هابا شناسایی حضور ژن هایeae، stx1 و stx2 ارزیابی گردید وفیلوتایپ آنها تعیین شد. نتایج: از میان 154 نمونه باکتری شناسی 138 جدایه از نظر اشریشیاکلی بودن مورد تایید قرار گرفت. بر اساس نتایج 13 جدایه (43/6 درصد) از نظر حضور یکی از ژن هایeae، stx1 و stx2 مثبت بودند. از میان باکتری های آزمایش شده 8 جدایه (79/5 درصد) واجد ژن eae و چهار جدایه (89/2 درصد) از نظر ژن stx2 مثبت بودند. تنها جدایه مثبت از نظر ژن stx1 در گروه فیلوژنی a قرار داشت. بطور کلی 138 جدایه مورد بررسی در 4 گروه فیلوژنی a (34/54 درصد)، b1 (06/36 درصد)، b2 (62/3 درصد) و d (97/7 درصد) انتشار داشتند. در آنتی بیوگرام بیشترین میزان مقاومت نسبت به سفالکسین و تتراسیکلین و کمترین میزان مقاومت نسبت به فلومکوئین و تری متوپریم بود. کلمات کلیدی: سویه های اشریشیاکلی تولید کننده شیگاتوکسین، انتروهموراژیک، آنتی بیوگرام، کبوتر

تهیه کیت تشخیصی سریع آلودگی گوشت به توکسوپلاسما گوندئی با استفاده از آنتی بادی پلی کلونال متصل به ذرات لاتکس
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1390
  حلیمه شمس الدین مطلق   مهدی گلچین

توکسو پلاسموز گوندئی تک یاخته ای داخل سلولی است و رایج ترین انگل مشترک بین انسان و دام است. این انگل از طریق خوردن اوسیست های محیطی(مثل خوردن آب وسبزی آلوده) و همچنین از طریق خوردن گوشت خام (که کیست انگل در نسوج آن وجود دارد) به بدن انسان و احشام،و از طریق جفت به جنین راه پیدا می کند. این انگل در انسان عوارض زیادی مخصوصا در جنین ایجاد می کند به حدی که می تواند سبب ناهنجاریهای مغزی جنین، سقط و حتی کوری شود. تا کنون روشهای مختلفی برای شناسایی این انگل در محصولات گوشتی بکار رفته است که اکثر آنها وقت گیر و پر هزینه هستند. هدف اصلی این تحقیق تهیه تست لاتکس آگلوتیناسیون سریع است که بتوان نمونه های گوشت آلوده به توکسو پلاسما گوندئی از طریق آن براحتی و سریع تشخیص داده شود. بدین منظور ابتدا جهت تولید آنتی بادی پلی کلونال در مقابل انگل، سیستم ایمنی بدن یک خرگوش توسط آنتی ژن سطحی خالص سویه rh توکسو پلاسما گوندئی تحریک شد و سپس آنتی بادی را از سرم ایمن حاصل با روش کروماتوگرافی میل ترکیبی خالص گردید و فعالیت این آنتی بادی با استفاده از آزمایش الایزا مورد بررسی قرار گرفت. در ادامه آنتی بادی خالص شده به ذرات لاتکس وصل شد و فعالیت آگلوتیناسیون آن در مواجه با آنتی ژن ارزیابی شد. نتایج این تحقیق نشان داد که آنتی بادی متصل شده به ذرات لاتکس می تواند برادی زوآیت انگل توکسو پلاسموز گوندئی و همچنین گوشت هموژنیزه آلوده را در تست آگلوتیناسیون به خوبی شناسایی کند. برای تعیین حساسیت و اختصاصیت تست مذکور در تشخیص انگل ، نیاز به روش های حساس دیگر مثل آزمایش pcr می باشد که در آینده بایستی انجام شود.

بررسی میزان شیوع آلودگی به توکسوپلاسما گوندئی در گوسفندان و بزهای کشتار شده در کشتارگاه کرمان در سال 1390 با روش های pcr و لاتکس آگلوتیناسیون
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1391
  زهره عباسپور بنهنگی   مهدی گلچین

توکسوپلاسما گوندئی تک یاخته ای داخل سلولی و رایج ترین انگل مشترک بین انسان و دام است. مصرف اوسیست های محیطی (مثل خوردن آب و سبزی آلوده) و همچنین خوردن گوشت خام (که کیست انگل در نسوج آن وجود دارد) راه اصلی انتقال انگل به انسان و احشام می باشد. تاکنون روشهای مختلفی مانند سابین فلدمن، nested pcr، real time pcr و pcr- rflpبرای شناسایی این انگل در گوشت های آلوده بکار رفته است. هدف اصلی این مطالعه بررسی میزان شیوع توکسوپلاسما گوندئی در گوسفندان و بزهای کشتار شده در کشتارگاه شهر کرمان در طی یک دوره یک ساله به وسیله روش nested pcr که دارای حساسیت و ویژگی بالایی است به عنوان روشی شاخص، همچنین برآورد حساسیت و ویژگی آزمایش لاتکس آگلوتیناسیون ابداعی را که می تواند به عنوان آزمایشی بسیار سریع، کم هزینه، و اختصاصی و بدون نیاز به دستگاه خاصی قابل انجام باشد، از طریق مقایسه با نتایج حاصل از آزمایش pcr ، بوده است.جهت رسیدن به این هدف 200 نمونه گوشت (103 گوسفند و 97 بز) مورد آزمایش قرار گرفتند. نتایج حاصل از nested pcr نشان داد که شیوع آلودگی به توکسوپلاسما گوندئی در این حیوانات 53 درصد (فاصله اطمینان 95 درصد: 9/59 - 1/46) می باشد و رابطه معناداری بین میزان آلودگی با متغیرهای سن، جنس و گونه یافت نشد. بنابراین سطح بالایی از آلودگی به انگل توکسوپلاسما در حیوانات کشتار شده در کشتارگاه کرمان وجود دارد. مقایسه نتایج حاصل از کیت لاتکس آگلوتیناسیون با نتایج nested pcr نشان داد که این کیت دارای حساسیت (80%) و ویژگی (92%) می باشد لذا می توان این کیت را جهت انجام آزمایش غربالگری جهت شناسایی نمونه های گوشت آلوده به کار برد.

تعیین هویت ژنوتیپی و پروفایل مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه های اشریشیاکلی از عفونت های خارج گوارشی انسان در شهرستان خرم آباد
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1391
  علی کرمی دریکوند   رضا قنبرپور ممقانی

چکیده: هدف از انجام این مطالعه شناسایی ژن های حدت، گروه فیلوژنتیکی و مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه های اشریشیاکلی از موارد بیماری های خارج گوارشی در شهرستان خرم آباد بود. برای این منظور 94 نمونه از افراد بیمار اخذ گردید و نمونه ها در محیط های مناسب جهت شناسایی اشریشیاکلی کشت داده شدند و با استفاده از آزمایشات بیوشیمیایی مورد تایید قرار گرفتند. حساسیت آنتی بیوتیکی جدایه ها با روش دیسک دیفیوژن تعیین گردید. از آزمایشاتpcr جهت شناسایی گروه و تحت گروه فیلوژنی جدایه ها وهمچنین حضور و شیوع ژن های حدت مورد بررسی شامل ژن هایsfa/focde, iucd pape-f, hly استفاده گردید. آنالیز فیلوژنتیکی نشان داد که جدایه ها متعلق به چهار گروه فیلوژنتیکی a(63/60درصد)،b2 (63/10درصد)، b1 (31/5درصد) و d (02/17درصد) قرار داشتند. از بین جدایه مورد مطالعه، 50/42 درصد جدایه ها نسبت به یکی از ژن هایsfa/focde /iucd و papef مثبت بودند که 2 جدایه (17/2 درصد) دارای ژن sfa/focde، 5 (31/5 درصد) جدایه دارای ژن pape-f و 14جدایه (89/14درصد) دارای ژن iucd بودند. تمامی جدایه ها از نظر ژن hly منفی بودند. جدایه های مثبت از نظر ژن sfa/focde، در گروه فیلوژنتیکی a قرار می گیرند. از 5 جدایه مثبت از نظر ژن pape-f، 2 جدایه در گروه فیلوژنتیکی d و 2 جدایه در گروه فیلوژنتیکیa و یک جدایه در گروه b2 قرار می گیرد. از جدایه واجد ژن iucd، 5 جدایه در گروه فیلوژنتیکی d، 3 جدایه در گروه فیلوژنتیکی a، 2 جدایه در گروه فیلوژنتیکی a، 3 جدایه در گروه فیلوژنتیکی b2 و 1 جدایه در گروه فیلوژنتیکی b1 قرار می گیرد. بر اساس نتایج آنتی بیوگرام کمترین مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه ها مربوط به ایمیپنم (36/6درصد) و بیشترین مقاومت مربوط به سفازولین (100 درصد) بود. در این مطالعه 32 الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی متفاوت شناسایی گردید و جدایه های مقاوم متعلق به گروهها وتحت گروههای فیلوژنتیکی متفاوت بودند. کلمات کلیدی: اشریشیاکلی، ژن های حدت، فیلوژنتیکی، مقاومت آنتی بیوتیکی، خرم آباد

مقایسه چند روش استخراج dna ژنومی از بافت روده جهت تشخیص آلودگی به مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1390
  خالیده آذری   رضا خیراندیش

چکیده ندارد.

بررسی فراوانی آنتی بادی ضد کوکسیلا بورنتی در گله های گاو شیری میاندوآب
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1392
  سجاد اکبری   محمد خلیلی

: تب کیو بیماری زئونوزی با انتشار جهانی می باشد که عامل آن باکتری ریکتزیائی، داخل سلولی اجباری به نام کوکسیلا بورنتی است. گاو، گوسفند و بز مخازن اصلی عفونت برای انسان می باشند. حیوانات آلوده تعداد بسیار زیادی باکتری را در ادرار، مدفوع، شیر و نیز از طریق جفت و مایعات جنینی دفع می کنند. عفونت از طریق استنشاق آئروسل های آلوده یا خوردن شیر خام و محصولات لبنی تازه در انسان و حیوانات گزارش شده است. مطالعات بسیار کمی در مورد اپیدمیولوژی بیماری تب کیو در ایران موجود است. مطالعه حاضر بررسی فراوانی آنتی بادی ضد کوکسیلا بورنتی در گله های گاو شیری میاندوآب (آذربایجان غربی) را توصیف می نماید.

تهیه کیت الایزا تشخیصی آنتی بادی های ضد کوکسیلا بورنتی در انسان
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1392
  زهرا نادری پور   مهدی گلچین

باکتری کوکسیلا بورنتی عامل ایجاد بیماری تب کیو است که یک بیماری با گسترش جهانی می باشد. این بیماری یک مشکل سلامت عمومی در بسیاری از کشورها بخصوص در سال های اخیر است. تشخیص تب کیو بر اساس روش های سرولوژی می باشد. از میان روش های تشخیصی سرولوژیکی تب کیو، تکنیک الایزا نسبت به سایر تست های سرولوژی ارجحیت دارد زیرا یک روش قابل اعتماد با حساسیت و ویژگی بالا است. در این مطالعه، جهت تشخیص سرمی فرم حاد این بیماری در انسان، یک کیت الایزا تشخیصی آنتی بادی های ضد کوکسیلا بورنتی فاز ii در انسان طراحی، بهینه سازی و ساخته شد. نتایج بررسی عملکرد کیت طراحی شده نشان داد که حساسیت و ویژگی آن همانند یکی از کیت های تجاری خارجی آن می باشد. همچنین سنجش 45 نمونه سرم انسانی مشکوک در یکی از مناطق آلوده نشان داد که تعداد 9 نمونه (20 %) مثبت، 32 نمونه (11/71 %) منفی و 4 نمونه (88/8 %) حد مرز (border line) می باشند.

بررسی اثر بکارگیری غلظت بسیار کم iptg در بیان بالای آنتی بادی های نوترکیب از نوع scfv در باکتری اشریشیا کلی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1392
  طیبه قاسمی   مهدی گلچین

آنتی بادی های نوترکیب به عنوان ابزار های با ارزشی جهت اهداف مختلف تشخیصی و درمانی پیشنهاد شده اند و می توانند به عنوان جایگزین مناسبی برای آنتی بادی های مونوکلونال موشی مطرح باشند. در این تحقیق بیان بالای آنتی بادی نوترکیب از نوع scfv در باکتری اشریشیا کلی با استفاده از وکتور pet26b بررسی شده است. بدین منظور 10 کلون مختلف بصورت تصادفی از کتابخانه تامیلینسون i انتخاب شد و جهت بیان آنتی بادی های scfv محلول از غلظت های 1، 1/0 و 01/0 میلی مولار iptg استفاده گردید. متعاقباً آنتی بادی های بیان شده در قسمت های مختلف سلول باکتری اشریشیا کلی تعیین گردید. نتایج این تحقیق نشان داد که بهترین غلظت میزان iptg، 01/0 میلی مولار بوده و در این حالت حدود 45% آنتی بادی محلول در فضای پری پلاسمیک باکتری بیان می گردد. بنابراین برای تولید این پروتئین های با ارزش در باکتری اشریشیا کلی با استفاده از سیستم pet غلظت 01/0 میلی مولار ماده تشویق کننده بیان پروتئین توصیه می گردد.

ژنوتایپینگ و تعیین مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک های بتالاکتامازی دسته سفالوسپورین ها در جدایه های اشریشیاکلی از موارد عفونت های بالینی شهرستان
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1392
  فردوس مومنی   رضا قنبرپور

چکیده: این بررسی با هدف ژنوتایپینگ و شناسایی ژن های بتالاکتاماز و همچنین آنتی بیوگرام جدایه های اشریشیاکلی از موارد عفونت های بالینی در شهرستان خرم آباد انجام شد. در این مطالعه 86 جدایه گوارشی و خارج گوارشی از انسان، از نظر حضور ژن های blactx-15، blactx-m، chua، yjaa و tspe4.c2 به روش pcr بررسی شدند. حساسیت آنتی بیوتیکی جدایه ها نسبت به 6 آنتی بیوتیک مورد استفاده شامل پنی سلین ، آمپی سلین ، کلرامفنیکل ، سیپرو فلوکساسین ، جنتامایسین ، کانامایسن ، بود. به روش دیسک دیفیوژن انجام شد. نتایج pcr نشان داد که 86 جدایه مورد بررسی در 4 فیلوتایپ اصلی a 42 جدایه (3/48 درصد)، b1 12 جدایه (95/13 درصد)، b2 10 جدایه (62/11 درصد) و d 22 جدایه (58/25 درصد) انتشار داشتند و در پنج تحت گروه فیلوژنی دسته بندی شدند. بیشترین فراوانی متعلق به تحت گروه a0 (23 جدایه) و کمترین فراوانی متعلق به تحت گروه b23 (10 جدایه) بود. شانزده جدایه (60/18 درصد) از نظر ژن blactx-m و 12 جدایه (95/13 درصد) از نظر هر دو ژن blactx-15و blactx-mمثبت بودند. نه جدایه گوارشی (98/16 درصد) از نظر ژن blactx-m و 7 جدایه (20/13 درصد) از نظر هر دو ژن blactx-15 و blactx-m مثبت بودند. هفت جدایه های غیر گوارشی (21/21 درصد) حاوی ژن blactx-m و 5 جدایه (15/15 درصد) از نظر هر دو ژن blactx-15و blactx-m مثبت بودند. از نظر مقاومت آنتی بیوتیکی، جدایه های گوارشی بیشترین مقاومت را نسبت به پنی سلین (53 جدایه) 100 درصد و کمترین مقاومت مربوط به سیپروفلوکساسین (10 جدایه) 86/18 درصد نشان دادند و در جدایه های خارج گوارشی نیز بیشترین مقاومت نسبت به پنی سلین (33 جدایه) 100 درصد و کمترین مقاومت مربوط به جنتامایسین (10 جدایه) 30/30 درصد بود. بیست وپنج الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی در بین جدایه ها شناسایی گردید که در چهار گروه فیلوژنتیکی انتشار داشتند. کلمات کلیدی: بتالاکتاماز، اشریشیاکلی، فیلوژنی، مقاومت های آنتی بیوتیکی، pcr

ساخت کیت تشخیص سریع اسهال کلی باسیلوزی گوساله ها با روش ایمونوکروماتوگرافی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1392
  فاطمه نصیری   مهدی گلچین

یک کیت نواری ایمونوکروماتوگرافی با استفاده از پروب آنتی بادی scfv– نانو ذرات طلا برای تشخیص سریع سویه های etec باکتری اشریشیا کلی عامل بیماری اسهال کلی باسیلوزی گوساله ها ساخته و بهینه سازی شد. بدین منظور از آنتی بادی نوترکیب scfv ضد فیمبریه k99 به نانو ذرات طلا با قطر 20 نانومتر متصل گردید و روی پد اتصال نوار ایمونوکروماتوگرافی پخش گردید. میزان محدودیت تشخیص چشمی نوار ایمونوکروماتوگرافی تهیه شده 102×1 cfu تعیین گردید. نتایج حاصل از استفاده از آنتی بادی نوترکیب scfv در نوارایمونوکروماتوگرافی نشان داد که عملکرد این آنتی بادی ها بخوبی آنتی بادی های پلی کلونال و مونوکلونال موشی می باشد. بنا بر این بر اساس نتایج حاصل استفاده از آنتی بادی های مونوکلونال نوترکیب در نوار های تست ایمونوکروماتوگرافی، هزینه ساخت این تست را در آینده بسیار ارزانتر می سازد.

بیان بالای آنتی بادی مونوکلنال نوترکیب ضد توکسوپلاسماگوندی در باکتری اشیریشیاکلی به منظور استفاده درکیت های تشخیصی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1392
  علی اکبر رضایی   مهدی گلچین

آنتی بادی های نوترکیب به عنوان ابزار درمانی مفید برای مقاصد درمانی و تشخیصی از اهمیت ویژه ای برخوردارند. در این تحقیق یک تست آگلوتیناسیون سریع به کمک ذرات لاتکس جهت تشخیص آنتی ژن p30 توکسلاسما گوندی ارائه شد. برای بیان بالای آنتی بادی نوترکیب scfv ضد این آنتی ژن، ژن scfv به داخل یک وکتور باکتریایی تحت کنترل پروموتور t7 کلون گردید. نشان داده شد که قرار دادن آنتی بادی نوترکیب مورد نظر در وکتورpet26b با در نظر گرفتن بهترین شرایط بیان پروتئین ، منجر به بیان میزان قابل توجهی آنتی بادی محلول در باکتری اشیریشیا کلی می گردد (8/33 میلی گرم در لیتر). پس از یک مرحله خالص سازی، آنتی بادی نوترکیب به ذرات لاتکس متصل گردید و این ذرات برای آزمایش آگلوتیناسیون مورد استفاده قرار گرفتند. نتایج آزمایش حاکی از آن بود که این ذرات توانایی تشکیل آگلوتیناسیون با آنتی ژن کامل توکسوپلاسماگوندی و گوشت های آلوده به این انگل را داشتند. بنابراین از این تست سریع می توان برای تشخیص نمونه های مواد غذایی آلوده به این تک یاخته استفاده نمود.

بررسی مولکولی کلی باسیلوز در گوساله های اسهالی نوزاد در شهرستان کرمان
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1392
  مصطفی روستا   مهدی گلچین

اسهال ناشی از عفونت با سویه های انتروتوکسیژنیک باکتری اشریشیاکلی (اسهال سفید) ازعوامل مرگ در گوساله های تازه به دنیا آمده می باشد. این بیماری می تواند باعث مرگ گوساله ها از اولین ساعات بعد از تولد تا هفته ها بعد گردد، مهمترین عامل در پاتوژنز این بیماری توانایی اتصال فیمبریه های k99,f41 به سلولهای اپیتلیال روده می باشد. اسهال بعد از تولید توکسین های روده ای بخصوص توکسین مقاوم به حرارت sta)) شروع می شود. هدف ازانجام مطالعه حاضر بررسی و وقوع بیماری کلی باسیلوز گوساله ها و میزان شیوع آن در شهر کرمان با استفاده از روش pcr بوده است. در این تحقیق در مجموع 155 نمونه های مدفوعی از گوساله های اسهالی و غیر اسهالی اخذ گردید که از این تعداد، 107 نمونه مدفوع اسهالی و 48 نمونه مدفوع غیر اسهالی بودند. dna از نمونه های e. coli مثبت استخراج شد و بر روی آنها آزمایش multiplex pcr انجام گردید. بر اساس نتایج باکتری e. coli از 78 نمونه اسهالی جدا گردید که از بین آنها 24 نمونه واجد عوامل حدت فوق( اکثراٌ دارای ژن های sta, k99) بودند. از 48 نمونه غیر اسهالی، باکتری اشریشیاکلی از تمامی نمونه ها جدا گردید و تنها 10 جدایه واجد ژن های حدت تشخیص داده شدند. درپایان سویه های توکسین زای روده ای باکتری اشریشیاکلی نقش مهمی در وقوع اسهال در گوساله های شهر کرمان دارند. کلمات کلیدی: اشریشیا کلی، انتروتوکسیژنیک، k99، کرمان، pcr.

بررسی رابطه بین هوش هیجانی و توانمند سازی کارکنان در شرکت کارخانه چینی ایران (ایرانا)
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علم و فرهنگ - دانشکده علوم انسانی 1392
  مهدی گلچین   بهزاد مشعلی

در این پژوهش به بررسی بررسی رابطه بین هوش هیجانی و پنج مولفه آن (خود انگیزی، خود آگاهی، خود کنترلی، مهارت های اجتماعی وآگاهی اجتماعی) بر توانمند سازی کارکنان در شرکت چینی ایران (ایرانا) پرداخته شده است. جامعه آماری این تحقیق، کارکنان شرکت چینی ایران (ایرانا) می باشد. برای نمونه گیری از روش نمونه گیری تصادفی طبقه ای استفاده شد. به منظور رد یا پذیرش فرضیه ها از ضریب همبستگی اسپیرمن استفاده شد. با توجه تحلیل های آماری رابطه بین هوش هیجانی و تمام مولفه های آن به جز خود کنترلی با توانمندسازی کارکنان در شرکت چینی ایران (ایرانا) پذیرفته شده است. همچنین با توجه به نتیجه آزمون فریدمن مهارت های اجتماعی بیشترین و خود کنترلی کمترین تأثیر را بر روی توانمندسازی کارکنان در شرکت چینی ایران (ایرانا) دارد. با توجه به نتایج پیشنهاد می شود هوش هیجانی متقاضیان شغل سنجیده شود و در شرایط مشابه افرادی که هوش هیجانی بیشتری دارند، استخدام شوند. همچنین دوره های آشنایی با هوش هیجانی و مهارت های افزایش آن به عنوان بخشی از آموزش های حین خدمت گنجانده شود.

ساخت کتابخانه ی فاژی آنتی بادی سنتتیک، از قطعه متغیر زنجیره سنگین ایمونوگلوبولین های انسانی، جهت جداسازی آنتی بادی های مونوکلونال نوترکیب
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1393
  مریم علی بیکی   مهدی گلچین

آنتی¬بادی¬های تک دامنه (یا نانوبادیها) یک قطعه آنتی بادی هستندکه شامل یک مونومر دامنه آنتی¬بادی های متغیر می¬باشند و به صورت انتخابی، توانایی اتصال با یک آنتی ژن خاص را دارند. آنهامولکول¬های کوچکی هستند (kda 15 - 12) و دارای اختصاصیت ومیل ترکیبی بالا برای اهداف خود می¬باشند و سمیت ذاتیکمی دارند. هدف ازمطالعه¬ی حاضرساخت سنتتیک یککتابخانه¬ینمایش فاژنانوبادیاز دامنهمتغیرزنجیره¬ی سنگینایمونوگلوبولینانسانی باتنوعبالا می¬باشد. روش کـــار: برای ســــاخت کتــابخانه از زنجیــــره¬ی سنگیــــن نـــانوبادی¬ها، vh انسانــــی (v3-23/dp-47, 4h4b) از کتابخانه¬ی مصنوعی dab استخراج شد و با کمک روش کلونینگ معمولی داخل فاژمید وکتور pit2 کلون شد، سپس کتابخانه¬ی ژنی به دخل سلول e. coli tg1 ترنسفوم گردید. نتایج: دامین متغیر از زنجیره¬ی سنگین انسانی با موفقیت داخل وکتور pit2کلون گردید. نتیجه گیری: امکان جداسازینانوبادیهایخاص در برابرآنتی ژن هایمختلفاز کتابخانهساخته شدهوجود دارد که برایتشخیص و درمانپیشنهاد می¬شود.

بیان پپتید سنتتیک m2e-ha2 ویروس آنفلوانزا بر روی سطح باکتریوفاژ m13 به منظور افزایش قدرت آنتی ژنیسیتی آن
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1393
  حدیث فتحی زاده   مهدی گلچین

تکنیک نمایش روی سطح فاژ می تواند برای بیان پپتیدهای کوچک مورد استفاده قرار گیرد. از جمله فاژهایی که در این روش مورد استفاده قرار می گیرند فاژ رشته ای m13 می باشد. این فاژ می تواند پپتیدهایی با تعداد اسید آمینه کم را بر سطح پروتئینهای پوششی خود از جمله پروتئینهای pviii و piii بیان کند و فاژهای نوترکیب بوجود آمده قادر به القاء پاسخ های ایمنی سلولی و همورال می باشند که این مسئله فاژ را به یک سیستم تحویل آنتی ژن جذاب تبدیل کرده است. هدف از مطالعه حاضر نمایش یک پپتید مصنوعی شامل دو اپی تپ m2e وha2 ویروس آنفلوانزا بر روی سطح پروتئین pviii فاژ رشته ای m13 می باشد. به این منظور ابتدا ژن پپتید آنفلوانزا و ژن gviiiمربوط به فاژ با استفاده از روش assembly pcr به یکدیگر اتصال داده شدند، سپس ژن بدست آمده داخل فاژمید وکتور pit2 کلون شد و در سلول اشریشیاکلی سویهtg1 بیان گردید و در نهایت فاژ نوترکیب حاصله خالص سازی شد. نتیجه توالی یابی نشان داد که ژن پپتید و ژن gviii به درستی در فاژمید وکتور کلون شده است . بیان پپتید مورد نظر بر روی سطح فاز در آزمایشات وسترن بلاتینگ، دات بلاتینگ و الایزا با استفاده ازآنتی بادی پلی کلونال مورد بررسی قرار گرفته و تایید شد. نتایج به دست آمده نشان داد که فاژ نوترکیب بدست آمده، که پپتید m2e -ha2 بر روی سطح آن بیان گردیده است، می تواند جهت ایمنی زایی مورد استفاده قرار گیرد.

بیان پپتید سنتتیک m2e-ha2 ویروس آنفلوانزا بر روی سطح باکتریوفاژ m13 به منظور افزایش قدرت آنتی ژنیسیتی آن
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1393
  حدیث فتحی زاده   مهدی گلچین

تکنیک نمایش روی سطح فاژ می تواند برای بیان پپتیدهای کوچک مورد استفاده قرار گیرد. از جمله فاژهایی که در این روش مورد استفاده قرار می گیرند فاژ رشته ای m13 می باشد. این فاژ می تواند پپتیدهایی با تعداد اسید آمینه کم را بر سطح پروتئینهای پوششی خود از جمله پروتئینهای pviii و piii بیان کند و فاژهای نوترکیب بوجود آمده قادر به القاء پاسخ های ایمنی سلولی و همورال می باشند که این مسئله فاژ را به یک سیستم تحویل آنتی ژن جذاب تبدیل کرده است. هدف از مطالعه حاضر نمایش یک پپتید مصنوعی شامل دو اپی تپ m2e وha2 ویروس آنفلوانزا بر روی سطح پروتئین pviii فاژ رشته ای m13 می باشد. به این منظور ابتدا ژن پپتید آنفلوانزا و ژن gviiiمربوط به فاژ با استفاده از روش assembly pcr به یکدیگر اتصال داده شدند، سپس ژن بدست آمده داخل فاژمید وکتور pit2 کلون شد و در سلول اشریشیاکلی سویهtg1 بیان گردید و در نهایت فاژ نوترکیب حاصله خالص سازی شد. نتیجه توالی یابی نشان داد که ژن پپتید و ژن gviii به درستی در فاژمید وکتور کلون شده است . بیان پپتید مورد نظر بر روی سطح فاز در آزمایشات وسترن بلاتینگ، دات بلاتینگ و الایزا با استفاده ازآنتی بادی پلی کلونال مورد بررسی قرار گرفته و تایید شد. نتایج به دست آمده نشان داد که فاژ نوترکیب بدست آمده، که پپتید m2e -ha2 بر روی سطح آن بیان گردیده است، می تواند جهت ایمنی زایی مورد استفاده قرار گیرد.

بررسی میزان شیوع سرمی آنتی بادی های ضدکوکسیلا بورنتی (فاز ii) در دانشجویان دامپزشکی دانشکده دامپزشکی دانشگاه شهید باهنر کرمان پاییز 1392
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1393
  علی قربانی   حمید شریفی

تب کیو یک بیماری مشترک با گسترش جهانی است که مشکل سلامت عمومی در خیلی از کشور ها می باشد و علی رغم اهمیت آن تا کنون در خصوص تب کیو، مطالعات اندکی در ایران انجام شده است. از این رو این مطالعه با هدف مشخص کردن شیوع سرمی تب کیو (آنتی بادی های ضد کوکسیلا بورنتی فاز ii) و تعیین ارتباط بین 8 فاکتور خطر: سن، جنسیت، مقطع تحصیلی، تماس با حیوانات و ترشحات آنها، نگهداری حیوان در خانه، مصرف لبنیات غیر پاستوریزه، میزان آگاهی از تب کیو و محل سکونت با تیتر سرمی مثبت تب کیو (فاز ii) در دانشجویان دامپزشکی دانشکده دامپزشکی دانشگاه شهید باهنر کرمان (جنوبشرق ایران) است که این اولین مطالعه در ایران است. روش الیزا به علت دارا بودن حساسیت و اختصاصیت بالا غالباً بیشترین روشی است که برای تشخیص بیماری استفاده می شود. در مطالعه حاضر 121 نمونه خون (سرم) از دانشجویان اخذ و با استفاده از کیت تشخیصی الیزای غیر مستقیم آزمایش شدند. سپس داده ها با استفاده از آمار توصیفی و فاصله اطمینان 95 %، تست های آماری مجذور کای و رگرسیون لاجستیک و با کمک نرم افزار آماری spss 19 تجزیه و تحلیل شدند. نتایج نشان داد42 سرم (] 43/18% – 22/26 % = ci 95 %[ 34/7 %) از کل سرم ها مثبت بودند. نتایج حاصل از رگرسیون لاجستیک نشان داد که ارتباط بین سن (p-value = 0.038, or = 0.82 95% ci = [0.69 - 0.99]) و جنسیت )در خانم ها(p-value = 0.05, or = 2.22 95% ci = [1.00 - 4.90] با تیتر سرمی مثبت تب کیو (فاز ii) وجود دارد. در نتیجه، بر اساس نتایج مطالعه حاضر شیوع سرمی بالایی از تب کیو (فاز ii) در بین دانشجویان دامپزشکی مشاهده شده است و حل این مشکل نیازمند، پیشگیری و مراقبت بیشتر از این بیماری در مراکز آموزشی کشور ها و دانشجویان دامپزشکی، خصوصا در خانم ها می باشد.

تهیه آنتی بادی نوترکیب (scfv) برعلیه پپتید سنتتیک m2e-ha2 ویروس آنفلوانزا
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1393
  فیروزه زارع پور   مهدی گلچین

ویروس آنفلوانزا عضو خانواده ارتومیکسوویروس و جنس ارتومیکسوویریده می باشد و بر اساس پروتئین مرکزی به تیپ های a، b و c تقسیم می شود. ویروس های آنفلوانزای a بر اساس واکنش-های سرولوژیکی دو آنتی ژن سطحی هماگلوتینین (ha) و نورآمینیداز (na) به 144 تحت تیپ تقسیم بندی می شوند. تیپ a ویروس آنفلوانزا دستگاه های تنفسی، گوارشی و عصبی بسیاری از انواع پرندگان و پستانداران را درگیر می کند. شدیدترین نوع بیماری به صورت حاد و عمومی می باشد که با مرگ و میر بالا در طی دوره کوتاه مشخص می گردد. به همین دلیل سبب خسارات اقتصادی زیادی در صنعت طیور می شود. اما ویروس های آنفلوانزا با بیماری زایی کمتر در طیور، محدود به دستگاه تنفس و گوارش می شوند. هدف از مطالعه حاضر جداسازی آنتی بادی های مونوکلنال نوترکیب علیه این ویروس مهم بوده است که می تواند در آینده در تست های تشخیصی استفاده شود. بدین منظور آنتی ژن سطحی ویروس خالص شده، روی سطح ایمونوتیوب ها پوشانده شد تا به عنوان یک هدف برای انتخاب آنتی بادی هایی از لیبراری های فاژی تاملینسون i و j و لیبراری dab استفاده شود. کلونی های قادر به تشخیص آنتی ژن توسط سه مرحله اتصال، جداسازی و تکثیر جدا گردیدند. ویژگی آنتی بادی های انتخاب شده در شناخت آنتی ژن فوق با آزمایشات الایزا، ha و hi تایید شد. نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که آنتی بادی های نوترکیبی که قادر به شناخت آنتی ژن با میل ترکیبی بالا بودند جدا گردیدند. بنابراین این آنتی بادی های تک زنجیره ای محلول جدا شده، کاندیدهای خوبی برای به کار بردن به عنوان آنتی بادی های نوترکیب مونوکلنال در کیت های تشخیصی برای شناسایی ویروس در نمونه های آلوده می باشند.

بررسی میزان شیوع آلودگی به لیشمانیوز پوستی در شهر وحومه محمد آباد، شهرستان جبرفت، استان کرمان و تعیین گونه انگل به روش nested-pcr در سال 1387
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1388
  سمیه پور اسماعیلیان   محمد میرزایی

چکیده ندارد.