نام پژوهشگر: فاطمه شاهین
فاطمه شاهین حسین توللی
در این تحقیق از نانو ذرات مغناطیسی اکسید آهن اصلاح شده با آلومینا و نشانش شده با دایتیزون، به منظور پیش تغلیظ و جداسازی مقادیر ناچیز یون های سرب (ii) و کادمیوم (ii) به روش استخراج فاز جامد ناپیوسته و سپس اندازه گیری آن ها با استفاده از اسپکتروفوتومتر جذب اتمی شعله استفاده شده است. در این روش ابتدا نانو ذرات مغناطیسی اکسید آهن ((fe3o4 به روش همرسوبی تهیه شد. در مرحله بعد سطح این نانو ذرات با آلومینا اصلاح شده و معرف دایتیزون روی آلومینا نشانش شد. یون های سرب (ii) و کادمیوم (ii)، پس از جذب روی سطح دایتیزون توسط 3 میلی لیتر mol l -1 hno3 2 شسته شده و با استفاده از دستگاه طیف سنج جذب اتمی شعله اندازه گیری شدند. در مقایسه با سایر روش های استخراج، نانوذرات اکسید آهن اصلاح شده ظرفیت جذب بالایی را علاوه بر سرعت، سهولت جداسازی و قابلیت استفاده مجدد دارا می باشند. مهمترین مزیت این روش عدم نیاز به استفاده از ستون کروماتوگرافی است؛ چرا که جاذب دارای خاصیت مغناطیسی است و در تمامی مراحل، جداسازی جاذب از محلول با استفاده از یک میدان مغناطیسی خارجی امکان پذیر است. پارامترهای موثر بر این سیستم شامل ph، مقدار جاذب، نوع، غلظت و حجم شوینده، مدت زمان هم زدن، و حجم نمونه بهینه گردید. گستره خطی و حد تشخیص روش برای یون های سرب (ii)، به ترتیب برابر 50- 0.5 وµg l-1 0.33 و برای کادمیوم (ii)، به ترتیب برابر 50- 0.5 و µg l-1 0.16 به دست آمد. همچنین انحراف استاندارد نسبی یا rsd روش برای یون های pb (ii)و cd (ii) به ترتیب 1.16 و1.36 بدست آمد. روش پیشنهاد شده، برای اندازه گیری مقادیر ناچیز یون های pb (ii) و cd (ii)در نمونه های آبی مختلف به کار برده شده و نتایج بسیار رضایت بخش بود.
فاطمه شاهین حسین شهبانی ظهیری
سلولز به عنوان فراوان¬ترین ماده آلی قابل تجزیه، شامل پلیمرهای خطی متشکل از واحدهای گلوکز با پیوندهای بتا 1 و4 گلیکوزیدی می¬باشد که می¬تواند به عنوان بهترین ذخیره برای تولید انرژی، غذا و مواد شیمیایی مورد نیاز انسان در نظر گرفته شود. هیدرولیز کامل آنزیمی مواد سلولزی نیازمند همکاری سه آنزیم اندوگلوکاناز، اگزوگلوکاناز و بتاگلوکوزیداز است. تا به امروز ژن¬های بتاگلوکوزیداز با ویژگی¬های مختلف از انواع میکروارگانیسم¬ها مانند مخمر، قارچ¬ها و باکتری¬ها جداسازی و همسانه¬سازی شده¬اند. در پژوهش حاضر از باکتری سرمادوست exiguobacterium sp. sh3. به عنوان منبعی برای استخراج آنزیم¬های سلولازی استفاده شد. جداسازی ژن با استفاده از pcr و طراحی آغازگرهای مناسب از باکتری exiguobacterium sp. sh3 انجام شد و سپس توالی ژن تحت پیشبر t7 در باکتری اشرشیا سویه¬ی bl21 همسانه-سازی و بیان گردید. تأیید بیان پروتئین همسانه¬سازی شده در باکتری e.coli با روش sds-page انجام شد و تیمارهای مختلف برای بررسی ویژگی¬ها و شرایط بهینه¬ی فعالیت آنزیم در نظر گرفته شد. نتایج نشان داد که توالی همسانه سازی شده، پروتئینی 51 کیلودالتونی با خاصیت بتاگلوکوزیدازی تولید می¬کند. فعالیت آنزیم در حضور پارانیتروفنل گلوکوپیرانوزید (p-npg) به عنوان سوبسترا تأیید شد. بنابراین با توجه به نتایج این تحقیق می¬توان جداسازی و همسانه¬سازی آنزیم سلولازی را از طریق باکتری سرمادوست exiguobacterium sp. sh3 انجام داد.