نام پژوهشگر: محمدحسین صفری

شناسایی نشانگرهای ssr و est-ssr در چغندر (beta vulgaris l.)
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1391
  محمدحسین صفری   اصغر میرزایی اصل

چغندر قند با نام علمی بتا ولگاریس گیاهی دوساله از خانواده آمارانتاسه می باشد. تاکنون شناسایی نشانگرهای ssr به روش های هیبریداسیون و est-ssr در چغندر صورت گرفته است اما شناسایی نشانگرهای جدید به ویژه نشانگرهای مرتبط با صفات مهم حائظ اهمیت می باشد. از توالی های est موجود در پایگاه های اطلاعاتی و همچنین توالی ژنومی ژن flc-like ، یکی از ژن های کلیدی کنترل کننده گلدهی، جهت شناسایی نشانگرهای چندشکل est-ssr و ssr در چغندر استفاده شد. برای این کار توالی های est چغندر قند مربوط به سال های 2011-2008 از پایگاه ncbi دریافت و سرهمبندی شدند که در مجموع 2147 کانتیگ حاصل شد. از نرم افزارهای phobosv.3.3.12 و ssrlocator v.1 برای شناسایی ssrهای 2 تا 6 نوکلئوتیدی استفاده شد. طراحی آغازگرهای اختصاصی بر اساس توالی های حفاظت شده مجاور ناحیه تکراری صورت گرفت. واکنش زنجیره ای پلیمراز برای این آغازگرها به همراه dna ژنومی 10 لاین و رقم چغندر قند و دو نمونه چغندر ماریتیما انجام شده و پس از جداسازی با ژل 8 درصد پلی اکریل آمید به روش افقی، رنگ آمیزی آن با استفاده از اتیدیوم بروماید انجام گردید. از مجموع 10 جفت 9 جفت تولید باند کرده و 5 آغازگر c981، c1653، c1، c30 و c52 چندشکلی نشان دادند. این نشانگرها مجموعا با 14 الل در هر مکان 2 تا 4 الل تولید کردند. شاخص pic برای این آغازگرها بین 4/0 تا 66/0 بود. همچنین از مجموع 5 جفت آغازگر طراحی شده بر اساس ssrهای موجود در ناحیه پروموتر و اینترون اول ژن flc-like همه آغازگرها قادر به تولید محصول pcr در اندازه مورد انتظار بودند که در این بین آغازگر c744 با 2 الل و شاخص pic برابر با 37/0 چند شکل بود. در مجموع تعداد 4 نشانگر ssr از ژن های کنترل کننده گلدهی و دو نشانگر از توالی های est ناشناخته به دست آمد که چندشکلی مشاهده شده در آن ها ممکن است بر عملکرد این ژن ها اثر گذار باشد و در نتیجه نشانگرهای مناسبی برای عملکرد این ژن ها در ژنوتیپ های مختلف باشند.