نام پژوهشگر: محمد حسین رضادوست

ترانسفورماسیون مرکبات با ژن کد کننده ی پروتئین پوششی ویروس تریستیزای مرکبات
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه گیلان - دانشکده علوم کشاورزی 1390
  محمد حسین رضادوست   عبدالله حاتم زاده

امروزه ترانسفورماسیون مرکبات در اصلاح این گیاهان اهمیت زیادی یافته است. در این پژوهش عوامل موثر بر کارایی ترانسفورماسیون شامل تأثیر استوسرینگون (100 و 50 و 0 میکرومولار)، مدت زمان هم کشتی (1 و 2 و 3 و 4 روز)، مدت زمان تلقیح (5 و 10 و 15 و 20 و 25 دقیقه) و تأثیر محیط شستشو پس از تلقیح مورد بررسی قرار گرفت. باکتری مورد استفاده در ترانسفورماسیون agrobacterium tumefaciens نژاد eha 105 بود و وکتور مورد استفاده pfgc5941 حامل ژن های انتخابی مقاومت به کانامایسین و مقاومت به علف کش بستا بود. در این پژوهش سعی شد تا 2 بخش از توالی ژنی مربوط به پوشش پروتئینی 2 نژاد دور ویروس تریستیزای مرکبات به گیاه نارنج منتقل شود تا در اثر فعال سازی مکانیسم rna silencing سبب نابودی rna ویروسی گردد. میزان تولید شاخساره های+pcr در پایان پژوهش به 6/13 درصد رسید. در پایان معلوم شد که میزان 50 میکرومولار استوسرینگون در ترانسفورماسیون نارنج بهترین نتیجه را در پی خواهد داشت. در مدت زمان هم کشتی 2 روزه نیز بیش ترین شاخساره های+pcr باززایی شده زمان تلقیح 15 دقیقه نیز به عنوان بهترین زمان معرفی شد. همچنین مشخص شد که شستشوی ریزنمونه ها پس از تلقیح اثری منفی بر تولید شاخساره های+pcr دارد.

مطالعه ریشه زایی درون شیشه ای شاخساره های نارنج (citrus aurantium l) ترانسژنیک
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه گیلان - دانشکده کشاورزی 1392
  لیلا رمانی   بهروز گلعین

ریشه¬زایی در شاخساره¬های ترانسفورم مرحله¬ی بسیار مهمی در تولید گیاه ترانسفورم محسوب می¬شود که به معضل بزرگی در روش¬های ترانسفورماسیون مبتنی بر کشت بافت تبدیل شده است. در این پژوهش پس از تولید گیاهچه ی ترانسفورم به مطالعه ی القای ریشه با استفاده از تنظیم کننده های رشد iba و naa پرداخته شد. همچنین برای اولین بار استفاده از اگروباکتریوم رایزوژنز جهت ریشه زایی شاخساره های ترانسفورم نارنج مورد بررسی قرار گرفت.در پایان نتایج به دست آمده گزارش شد.

بررسی ویژگی های بیوشیمیایی و بیان ژن های وابسته به تنش خشکی در کلزا (brassica napus l.)
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه گیلان - دانشکده کشاورزی 1393
  فاطمه سادات سیدابراهیمی   حسن حسنی کومله

خشکی پدیده ای بحرانی است که همه ساله در بخش هایی از دنیا در زمان های مختلف با دامنه و شدت متفاوت به تولید موفقیت آمیز محصول آسیب می رساند. پژوهش حاضر به منظور بررسی تأثیر تنش خشکی روی برخی صفات مربوط به برگ (مساحت برگ، وزن تر و کلروفیل)، ریشه (وزن تر)، ساقه (وزن تر و طول) و تغییرات فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدان سوپراکسیددیسموتاز، پراکسیداز، کاتالاز، پلی فنل اکسیداز و آسکوربات پراکسیداز و بررسی بیان ژن های گلوتاتیون ردوکتاز1 و فردوکسین (nadph)ردوکتاز روی دو رقم حساس hyola308 و متحمل slm046 کلزا به صورت فاکتوریل در قالب طرح کاملاً تصادفی انجام شد. بدین منظور گیاهچه ها در محیط ms مایع سوسپانسیون در پنج سطح خشکی شامل صفر، 3، 6، 12و 15 در صد پلی اتیلن گلایکول 6000 به طور شناور کشت شدند. صفر، 3، 6، 12، 24، 48 و 72 ساعت پس از اعمال تنش، از گیاهان نمونه های برگی تهیه شد. اندازه گیری های صفات بین دو رقم تفاوت های معنی داری نشان داد. طبق نتایج، سطح و وزن برگ، طول ساقه و وزن ریشه با افزایش مقدار peg و پیشرفت زمان، در هر دو رقم کاهش یافت. با افزایش میزان peg، میزان کلروفیل در رقم حساس افزایش بیش تری نسبت به رقم متحمل داشت. در هر دو رقم تنش خشکی به طور معنی داری سبب کاهش وزن ساقه شد. بر اساس نتایج، شدت واکنش و فعالیت آنزیم سوپراکسیددیسموتاز در رقم مقاوم بیش تر بود. فعالیت آنزیم پراکسیداز در رقم مقاوم در شرایط تنش خشکی شدید و فعالیت این آنزیم در رقم حساس در شرایط اولیه تنش خشکی افزایش داشته است. میزان فعالیت آنزیم کاتالاز در رقم slm046 نسبت به hyola308 در درصدهای پایین peg و 48 ساعت پس از اعمال تنش افزایش یافت. میزان فعالیت آنزیم پلی فنل اکسیداز در رقم slm046 با پیشرفت زمان در تنش های حاوی 12 و 15 درصد peg کاهش یافت و بیش ترین فعالیت این آنزیم در تنش حاوی peg 6 درصد مشاهده شد. میزان فعالیت آنزیم پلی فنل اکسیداز در رقم hyola308 بیش تر از slm046 بود. در محیط های حاوی مقادیر بالای peg، در 48 ساعت پس از اعمال تنش میزان فعالیت آسکوربات پراکسیداز در هر دو رقم افزایش یافت. بر اساس نتایج، تغییر در بیان ژن های فردوکسین nadp+ ردوکتاز و گلوتاتیون ردوکتاز1 تحت تنش خشکی مشاهده شد. به طورکلی میزان بیان ژن گلوتاتیون ردوکتاز1 در رقم حساس بیش تر از رقم متحمل بود. نتایج به دست آمده از مقایسه بیان ژن فردوکسین nadp+ ردوکتاز نشان داد که تیمارهای مختلف peg سبب کاهش بیان ژن در ساعت های بالای تنش در هر دو رقم شده است.