کلی سپتی سمی یکی از بیماری های مهم طیور صنعتی می باشد که توسط اشرشیا کلی بیماری زا برای طیور (apec) ایجاد می گردد و هر ساله خسارات اقتصادی فراوانی به این صنعت وارد می آورد. قدرت بیماری زایی این باکتری بسته به ژن های حدت آن متفاوت می باشد ، یکی از این ژن ها ، ژن iss است که منجر به افزایش مقاوت سرمی این باکتری در برابر سیستم کمپلمان میزبان می گردد. هدف از انجام این مطالعه بررسی فراوانی اشرشیا کلی واجد و فاقد ژن iss در جدایه های مربوط به کلی سپتی سمی و جدایه های مدفوعی و همچنین بررسی ارتباط اجدادی این جدایه ها به روشrapd-pcrمیباشد. جهت انجام این مطالعه ، حضور و عدم حضور ژن iss ، بر روی 41 جدایه اشرشیا کلی به دست آمده از کلی سپتی سمی و 56 جدایه اشرشیا کلی مدفوعی توسط آزمون pcr و پرایمر های اختصاصی این ژن مورد ارزیابی قرار گرفت و مشخص شد که از 47 جدایه اشرشیا کلی مربوط به کلی سپتی سمی 37 جدایه (90.3%) واجد این ژن و 4 جدایه (9.7%) فاقد این ژن بودند و از 56 جدایه مدفوعی 36 جدایه (64.3%) واجد این ژن و20 جدایه(35.7%) فاقد آن بودند. در نهایت 43 جدایه واجد ژن iss و23 جدایه فاقد این ژن به طور تصادفی انتخاب شدند و تو سط آزمون rapd-pcr مورد بررسی های فیلوژنتیک قرارگرفتند. . بررسی الگوی باند های حاصل از rapd-pcr ، بیانگر وجود 33 پروفایل کلی در 66 جدایه مذکور بود که 19 پروفایل مربوط به 43 جدایه iss+ و 17 پروفایل مربوط به 23 جدایه iss- بود. همچنین در پروفایلهای مربوط به گروه واجد ژن iss باند bp 700 در 25 جدایه از43 جدایه دیده شد که از بیشترین فراوانی (%58) و پس از آن باند bp1000 که در 23 جدایه رویت شد از بیشترین فراوانی (53%) برخوردار بود. در پروفایلهای مربوط به گروه فاقد ژن iss باند bp 800 که در 12 جدایه از 23 جدایه دیده شد از بیشترین فراوانی (%52)و پس از آن به ترتیب باند bp650 (9 جدایه) و bp350(8 جدایه) از فراوانی بیشتری(39%)و(34%) برخوردار بودند . با توجه به فراوانی بیشتر ژن iss در جدایه های مربوط به کلی سپتی سمی(90.3%) می توان به نقش مهم آن در افزایش حدت اشرشیا کلی پی برد. بررسی فیلوژنتیک بیانگر تنوع بیشتر پروفایل ها در گروه فاقد ژن iss می باشد. با توجه به یافته های حاضر با کمک آزمون rapd-pcr تا حد قابل قبولی می توان میان جدایه های واجد و فاقد این ژن تفکیک قائل شد. که احتمالا بیانگر وجود کلونهای غیر مشترک در دو گروه می باشد. با توجه به دانسته های ما گمان میرود مطالعه کنونی اولین مطالعه ای در سطح جهانی است که در آن ارتباط فیلوژنتیک جدایه های واجد و فاقد ژن حدت iss توسط آزمون rapd-pcr مورد بررسی قرار گرفته است. کلمات کلیدی: اشرشیا کلی، کلی سپتی سمی، ژن iss ، rapd-pcr

تشخیص مولکولی باکتری لاوسونیااینتراسلولاریس در مدفوع شتر

اشریشیا کُلای آنتروهموراژیک (ehec) پاتوتیپی از e.coli پاتوژن محسوب می گردد که عامل اسهال خونی یا کولیت خونریزی دهنده است. در اثر پیشرفت، کولیت خونریزی دهنده گاها به سندروم همولیتیک یورمیک (hus) تبدیل می گردد که خود علت مهمی برای نارسایی حاد کلیوی (arf) در کودکان و مرگ و میر در بزرگسالان می باشد. شیگا توکسین یک فاکتور حدّت حیاتی در بیماری های ناشی از ehecمی باشد. دونوع از این سم (stx) با عنوان stx 1 و stx 2 تا به حال شناسایی شده اند. واریانت های آنتی ژنیک متنوعی از stx 2وجود دارد: stx2c- - stx2dفرم فعال -stx2e - stx2d stx2f. تفاوت این واریانت ها در فعالیت بیولوژیک ونحوه ارتباطشان با بیماری زایی می باشد. سروتایپ های زیادی از سویه ehec وجود دارد که مهمترین آن از نظر ایجاد همه گیری های گسترده o157:h7 می باشد.انسان از طریق تماس مستقیم با حیوانات حامل، مدفوع آنها، خاک وآب آلوده یا در اثر خوردن گوشت آلوده، سایر تولیدات حیوانی و سبزی و میوه آلوده، به ehec o157:h7 آلوده می شود.نشخوارکنندگان به ویژه گاو و گوسفند به عنوان منابع ehec شناخته می شوند. در حالیکه هیچ گونه علامتی مبنی بر آلودگی از خود نشان نداده و ارگانیسم را از طریق مدفوع دفع می کنند. مطالعاتی حاکی از آن است که کبوتر به عنوان یک مخزن جدی برای سویه های ehec می باشد، به طوری که میکرواُرگانیسم قادر به حیات در مدفوع آن بوده و پتانسیل آلودگی انسان وجود دارد. همچنین تحقیقات اخیرنشان دهنده آن است که کبوتر؛ قادر به حمل سویه های دارای ژنstx2f می باشد که نقش مهمی را در حدت و بیماریزایی hus انسان، ایفا می نماید. این مطالعه در جهت کمک به فهم بهتر ارتباط کلونال مابین سویه های ehec جدا شده از کبوترهای مناطق مختلف جغرافیایی (بابل، گرمسار، فردوس و تهران) به وسیله تکنیک انگشت نگاری مبتنی برروش eric-pcr می باشد.هدف، تشخیص پراکنش ژنتیکی جدایه ها بر اساس شناخت آلل های stx2f می باشد.در مجموع 43 جدایه e. coli که از نظرتحقیقات قبلی مثبت بودن stx2f در آن ها توسط pcr ثابت شده بود، انتخاب شدند.بعد از pcr ، نمونه ها به درون چاله های ژل ریخته شدند.عمل الکتروفورز انجام گرفت. ژل به وسیله اتیدیوم بروماید رنگ آمیزی شد و به وسیله دستگاه اشعه x ،عکس برداری از ژل انجام شد. واژگان کلیدی : ehec، کبوتر، قرابت اجدادی، eric-pcr،پروفایل پروتئینی

خنثی سازی سرم یکی از ویژگی هایست که در اشریشیاکلی های مولد ورم پستان به چشم می خورد.یکی ازژنهای موثردر چنین حالتی ژن افزایش مقاومت سرمی(iss) است. به منظور مطالعه اهمیت وجود این ژن دراشریشیا کلی مولد ورم پستان از 46 موردورم پستان ناشی ازاین باکتری که 5 مورد غیرکلینیکی و بقیه کلینیکی بودند باکتری اشریشیاکلی در دامپروری های اطراف گرمسار جدا گردید. جدایه های بدست آمده تحت آزمون pcr قرارگرفت و نتایج نشان داد درمیان 27 مورد انواع ورم پستان ناشی ازاشریشیاکلی که تعداد باکتری درآنها بیشتراز cut 500 بود ژن iss تنها در 5 مورد (5/18 %) شناسایی شد ودرمیان 18 مورد ورم پستانی که باکتری اشریشیاکلی درآنها کمتر از cut 500 بود حضورژن iss در6 (3/33%)مورد نشان داده شد(p=0.3) . ارتباط منفی(r=- 0.169,p=0.3) میان ورم پستان کلی فرمی وداشتن ژن iss معنی دارنبود. ارتباطی میان حضور ژن iss و شدت ابتلا به ورم پستان یافت نشد.تعداد سلولهای سوماتیک با آزمون t در گروه داری ژن iss با گروه فاقد آن مقایسه شد و اختلاف معنی داری یافت نشد .(p=0.9) ارتباط میان فصل سرد و داشتن ژن iss معنی داربود (p=0.04,r=-0.33)همچنین ارتباط میان فصل سرد پاییز و بیشتر از cut 500 جدا شدن این باکتری معنی داربود (p=0.01, r= 0.4) ازاین مطالعه نتیجه گیری شد وجود ژن عامل حدت مقاومت سرمی درفصل گرم ممکن است دربروز بیماری نقش داشته باشد ولی دردیگر شرایط این مطالعه ارتباطی میان وجودآن با ورم پستان مشاهده نشد.

چکیده فارسی به منظورتعیین شیوع ورم پستان کلی فرمی نمونه شیراز 144 کارتیه مبتلا به ورم پستان کلینیکی83 راس گاو در دامپروری های اطراف گرمسار جمع آوری شد. الگوی رخ داد ورم پستان در ماه های مختلف سال ، نوع ترشحات آلوده ، محل کارتیه درگیر بررسی شد . همچنین تست آنتی بیوگرام به روش کربی بائر، بر روی تمام جدایه های حاصل انجام گرفت. نتایج نشان داد باکتری های کلی فرمی از 51 نمونه شیر مربوط به 33 راس گاو جدا شد. اشریشیا کلی از 72% کاریته های عفونی (>500 cfu) و 62% موارد کاریته های آلوده (< 500 cfu) کشت داده شده جدا شد ولی سویه های کلبسیلا و پروتئوس ولگاریس همگی تنها از مواردعفونت جدا شدند. شایع ترین باکتری مولد عفونت کلی فرمی اشریشیا کلی و سویه های کلبسیلا (8/14 %) بودند. ورم پستان حاد شایع ترین (6/66%)شکل ورم پستان در این تحقیق بود و پس از آن نوع تحت حاد( 27/27% ) و سپس فوق حاد (5/55%)قرار داشت و تنها باکتری مولد حالت فوق حاد اشریشیا کلی بود. شایعترین درجه ورم پستان نوع حاد ، شایعترین ماه درگیری موارد کلی فرمی اردیبهشت ، شایعترین سن درگیری شکم دوم وشایع ترین نشانه وجود ترشحات ابکی فاقد دلمه و چرک و شایعترین کارتیه درگیرچپ عقب بود. موثر ترین آنتی بیوتیک بررسی شده با آزمایش آنتی بیوگرام gentamicin بود. از این مطالعه نتیجه گیری شد که شایع ترین کلی فرم موثر در موارد ورم پستان گاو که در کنترل و درمان به آن باید توجه داشت اشریشیا کلی بود کلمات کلیدی:ورم پستان،گاوشیری، اشریشیا کلی ، سایر باکتری های خانواده آنتروباکتریاسه