بروسلوز یکی از خطرناکترین بیماری های عفونی مشترک بین انسان و حیوانات است. از نظر اپیدمیولوژی دام های اهلی مخصوصاً گربه ها نیز می توانند آلوده شوند و یک باکتریمی گذرا و خفیف داشته باشند، اما نسبتا مقاوم هستند. هدف اصلی مطالعه حاضر، بررسی سرواپیدمیولوژی بروسلوز با تمرکز بیشتر بر بروسلا ابورتوس و ملی تنسیس در گربه های ولگرد، خانگی و جمع آوری شده از گاوداری های شیری شهرستان مشهد می باشد. در این بررسی 140 قلاده گربه شامل، 48 گربه ولگرد، 42 گربه خانگی و 50 گربه صید شده ازگاوداری های شیری شهرستان مشهد مورداستفاده قرارگرفتند و با آزمونهای سرولوژیکی مثل تست های آگلوتیناسیون سریع و لوله ای شامل رزبنگالrose bengal، رایت wright و 2-مرکاپتواتانول(2-me) مورد بررسی قرارگرفتند. همچنین مقایسه بین سن، جنس، وزن و نوع گربه ها (ولگرد، خانگی و صید شده از دامپروریهای شیری) با نتایج آزمونهای سرمی بروسلوز بوسیله تست هایchi square وfisher exact test مورد بررسی قرارگرفتند. نتایج حاصله نشان دادکه از مجموع 140 گربه موردآزمایش، 8 مورد مثبت درتیترهای پایین و به صورت خفیف مشاهده شد .ازاین موارد مثبت فقط دو مورد درآزمون 2-me تیتر مثبت را نشان دادند. ارتباط آماری معنی داری بین جنس گربه(نروماده) با نتیجه سرولوژی مشاهده نشد (p=0.07). اماارتباط معنی داری بین گروههای سنی گربه ها مشاهده شد (p=0.009). ارتباط قابل توجهی بین گربه های ولگرد وگربه های دامپروری مشاهده نشد، اما بین گربه های ولگرد وگربه های خانگی رابطه معنی داری مشاهده شد (p=0.028). بررسی های سرواپیدمیولوژی حاضر نشان داد که اولاً آلودگی بروسلایی درگربه های نر و ولگرد سنین 1-2 سال بیشتر از سایرین است، ثانیا آلودگی بروسلایی درگربه ها به صورت اولیه وخفیف دیده می شود، ثالثا عدم آلودگی درگربه های خانگی نشان دهنده ی وضعیت مطلوب بهداشت وپایش دقیق سلامت درآنها می باشد. گربه های ولگرد می توانند یک عامل احتمالی خطر ابتلا به بروسلوز در جمعیت های انسانی و حیوانی در حومه مشهد باشند و توصیه می شود که در کلان شهرهایی مثل مشهد نظارت وکنترل بیشتری روی گربه های ولگرد بوسیله نهادهای زیربط انجام گیرد. مطالعه بیشتر جنبه های اساسی شیوع، اپیدمیولوژی و ایمونولوژی بروسلوز در گربه ها در ایران ضروری است.

بیماری هیداتیدوزیس زئونوزی است که توسط مرحله لاروی اکینوکوکوس گرانولوزوس در انسان و پستانداران ایجاد می شود. کیست هیداتید دارای قسمتهای مختلفی می باشد که شامل دیواره کیست، مایع کیست و پروتواسکولکسها که هر کدام از این قسمتها دارای مولکولهای ایمونوژن خاصی می باشند و بعضی از این مولکولها بین آنتی ژنهای کیست هیداتید و پروتواسکولکس مشترک می باشند. این مولکولهای ایمونوژن از طریق گیرنده های سطحی سلولهای سیستم ایمنی، مانند tlrها و... قادر به تحریک و مهار سیستم ایمنی می باشند. هدف اصلی مطالعه حاضر بررسی تاثیر آنتی ژنهای پروتواسکولکس بر بیان ژنهای tlr2و tlr4 در سلول های تک هسته ای خون محیطی (pbmcs) بره های سالم تازه متولد شده می باشد. در این بررسی در یک دوره 6 ماهه از گوسفندان آلوده به کیست هیداتید از خط کشتار گوسفندی کشتارگاه صنعتی شهرستان مشهد مبادرت به جمع آوری ریه و کبد گردید. نمونه ها به آزمایشگاه منتقل و پس از استریل کردن سطح کیست اقدام به خارج کردن پروتواسکولکس ها و استخراج آنتی ژنهای پروتوسکولکس و تعیین غلظت آنتی ژنها به روش برادفورد گردید. بعد از خونگیری از 20 راس بره 5 تا 7 روزه pbmcهای خون آنها برای برخورد با آنتی ژنهای حاصله جداسازی شد. سپس pbmcها به مدت 2 و 6 ساعت با میزان 0µg/ml (گروه کنترل) و 5µg/ml (گروه درمان) از آنتی ژنهای پروتواسکولکس در شرایط محیط کشت آزمایشگاهی قرار گرفت. پس از استخراج rna از pbmcهای گروه ها و تبدیل آنها به cdna، با استفاده از پرایمر های اختصاصی tlr2و tlr4، pcr معمولی و real-time qpcr بر روی cdnaهای سنتز شده انجام شد. آنالیز نتایج qpcr نشان داد که آنتی ژنهای پروتواسکولکسهای کیست هیداتید بطور قابل ملاحظه ای باعث افزایش بیان ژنهای tlr2و tlr4 در pbmcهای بره های تازه متولد شده گردید. آزمایشات بیشتری در مورد مکانیسم و عواقب تاثیرات آنتی ژنهای کیست هیداتید جهت درک بهتر واکنشهای متقابل بین میزبان و کیست هیداتید و نقش ایمنی ذاتی در این واکنشها در حال انجام است.

هیداتیدوزیس یک بیماری کرمی زئونوز، که دارای پراکندگی جهانی می باشد و توسط مرحله ی لاروی کرم اکینوکوکوس گرانولوزوس در انسان و حیوانات اهلی ایجاد می گردد. کیست هیداتید عمدتا در کبد و ریه جایگزین و سبب تخریب بافت ها می شود. تنوع و شدت و ضعف حالت های بالینی فقط به علت مدت و شدت عفونت نیست، بلکه به تنوع پاسخ های ایمنی در برابر آنتی ِِِِژن های انگل می باشد. پاسخ های سیستم ایمنی ذاتی اولین سد دفاعی بدن میزبان در مقابل آنتی ژن های خارجی است.در سالیان اخیر اهمیت پاسخ های سیستم ایمنی ذاتی در شناسایی آنتی-ژن ها و تکوین پاسخ های محافظتی ایمنی اکتسابی، به علت کشف گیرنده های شناسایی الگو (prrs)بیش از پیش مورد توجه قرار گرفته است. گیرنده های شبه تول(tlrs) شاخص ترین و مهم ترین prrs می باشند که توسط سلول های مختلف سیستم ایمنی بیان گردیده و در شناسایی الگو های مولکولی وابسته به پاتوژن ها(pamps) نقش دارند. با توجه به نقش احتمالیtlrs در شناسایی آنتی ژن های کرمی و پاسخ های ایمنی در مقابل بیماری های کرمی، ما در این بررسی به تاثیر آنتی ژن های مایع کیست هیداتید گوسفند بر میزان بیان ژن های tlr2 و tlr4 در سلولهای تک هسته ای خون محیطی (pbmcs) بره های سالم پرداختیم. در این مطالعه ابتدا جمع آوری کیست هیداتید از کشتارگاه، سپس استخراج آنتی ژن های مایع کیست هیداتید و تعیین غلظت آنها به روش برادفورد انجام گرفت. سپس، سلول های تک هسته ای خون محیطی (pbmcs)بره های سالم کمتر از یک ماه با روش فایکول جداسازی گردید. پس از آن، لنفوسیت ها و منوسیت های استخراج شده در محیط کشت سلولی با غلظت های 50 و 100gµ(گروه تیمار) و بدون آنتی ژن (گروه کنترل) به مدت 2ساعت و 18 ساعت کشت داده شدند. سپس استخراج rna تام از pbmcs انجام گرفته و سنتز cdna با استفاده از پرایمر های oligo-dtصورت پذیرفت. در نهایت تغییرات میزان بیان tlr2 و tlr4 نسبت به ژن کنترل داخلی gapdh با روش quantitative pcr real-time comparative انجام گرفت. نتایج حاصل از این مطالعه کاهش بیان ژنهای tlr2 و tlr4 در گروه تیمار نسبت به گروه کنترل را نشان داد که احتمالا" نشان دهنده خصوصیات سرکوب ایمنی آنتی ژنهای موجود در مایع کیست هیداتید می باشد. نتایج حاصل از این مطالعه در شناسایی عمیق تر مکانیسم های سلولی مولکولی دخیل، در ایمونوپاتوژنز و تکوین راهکار های نوین پیشگیری از هیداتیدوزیس موثر خواهد بود.

تب کیو یک بیماری مشترک بین انسان و دام است که بوسیله ی باکتری کوکسیلا بورنتی ایجاد می شود. از حیوانات اهلی، گاو، گوسفند و بز بعنوان مخازن اصلی بروز این بیماری در انسان مطرح می باشند. این مطالعه جهت بررسی شیوع سرمی بیماری در جمعیت گوسفند و بز استان خراسان رضوی انجام شد. تعداد 255 رأس گوسفند از 29 گله از 12 شهرستان و 205 رأس بز از 25 گله از 11 شهرستان در استان خراسان رضوی به روش نمونه گیری تصادفی خوشه ای انتخاب شدند. نمونه ی سرم خون این دامها از نظر وجود آنتی بادی علیه باکتری کوکسیلا برونتی توسط کیت الیزای تب کیو ساخت شرکت idexx سوییس موردآزمایش قرار گرفت. شیوع سرمی در گوسفند %5/36 (95%ci: 30.6 - 42.4% ) و در بز %8/29 (95%ci: 23.8 - 36.2% ) بود. در تمامی شهرستان های مورد بررسی وجود آلودگی، هم در گوسفندان و هم در بزها مشخص شد. شیوع سرمی در شهرستان های مختلف در گوسفند و در بز به ترتیب در دامنه ای بین %7/72-5/4 و %1/57-7/6 بود. در 26 89.6%; 95%ci: 78.6 – 100%)) گله ی گوسفند مورد بررسی و در 22 (78.5%; 95% ci: 63.5-93.5% ) گله ی بز مورد بررسی، حداقل یک نمونه مثبت یافت شد. در مدل رگرسیون لاجستیک در هر دو گونه، سن دام ها و شهرستان نمونه گیری ارتباط معنی داری را با شیوع سرمی بیماری تب کیو نشان دادند (p<0.05 ). بین دو گونه از لحاظ آلودگی به عامل بیماری تب کیو، تفاوت معنی داری وجود نداشت (0.147 p=). نتایج این مطالعه شیوع سرمی نسبتاً بالا در جمعیت گوسفند و بز در این منطقه از کشور را نشان داد. با توجه به پتانسیل عامل در ایجاد بیماری در انسان، توجه به این بیماری و انجام مطالعات بیشتر اپیدمیولوژیک در دام و انسان (بویژه افراد در معرض خطر) ضروری به نظر می رسد.

بیماری bvd یک بیماری ویروسی از جنس پستی ویروس و خانواده فلاوی ویریده است. از نظر اپیدمیولوژی این ویروس در نشخوارکنندگان بسیار خطرناک بوده و سبب خسارات اقتصادی زیادی شامل کاهش کارایی تولیدمثلی، کاهش تولید شیر، سرکوب سیستم ایمنی، تولد گوساله های ناقص الخلقه و یا گوساله های دارای عفونت پایدار در گله گاوها می شود. هدف اصلی مطالعه حاضر، بررسی کارایی تولیدمثلی در بین گاوهایی با آنتی بادی سرمی بر ضد ویروس bvd می باشد. در این بررسی 140 رأس گاو و تلیسه نژاد هلشتاین در سه گله از گاوداریهای صنعتی اطراف مشهد به طور تصادفی برای خونگیری انتخاب شدند. حضور آنتی بادی بر ضد ویروس bvd در خون گاوها با تست الایزای غیر مستقیم آنالیز شد. ارتباط بین نتایج آزمایش الایزا ( مثبت بودن یا منفی بودن نسبت به بیماری bvd ) با پارامترهای کیفی تولیدمثلی از قبیل تعداد زایش، روزهای باز، فاصله گوساله زایی، جفت ماندگی ، وضعیت تولد جنین، تعداد تلقیحات منجر به آبستنی و سن دامها مورد بررسی قرار گرفت. سپس در گاوهای مورد مطالعه اطلاعات بدست آمده با استفاده از روش آماری spearman correlation testمورد تجزیه و تحلیل آماری قرار گرفت. نتایج آزمون های آماری انجام شده نشان داد که بین تلیسه، گاو، جفت ماندگی و سایر پارامترهای کیفی مرتبط با تولیدمثل مورد بررسی در این مطالعه با نتیجه آزمون الایزای سرم ارتباط معنی داری وجود نداشت. هم چنین بین عواملی از قبیل سن، تعداد زایش، فاصله گوساله زایی، روزهای باز و تعداد تلقیح منجر به آبستنی با میزان عیار ضد ویروس bvdدرسرم گاوها ارتباط معنی داری وجود نداشت. ولی در مورد پارامترهای سن گاوها وتعداد زایش آنها با وجود آنتی بادی سرمی رابطه مستقیمی وجود داشت اما معنی دار نبود. با توجه به اینکه تقریباً تمام گاوهای مورد بررسی در طول زندگیشان حداقل یکبار ویروس bvd آلوده شده اند مطالعه بیشتر جنبه های اساسی اثرات این ویروس بر بیولوژی و کارایی تولیدمثل گاوها در ایران ضروری است.

درماتیت آتوپیک، درماتوزی شایع در سگ ها و در واقع دومین دلیل ایجاد خارش در آن هاست. این بیماری به عنوان یک بیماری پوستی خارش دار و التهابی با زمینه ی ژنتیکی همراه با تظاهرات مشخص بالینی، شناخته می شود. نقش کلیدی را در این بیماری، ایمنوگلوبولین های e برعهده دارند که اغلب درمقابل آلرژن های محیطی تولید می شوند. شواهدی روز افزون نشان دهنده ی وجود نقص هایی در سیستم ایمنی ذاتی است که مجموعاً می توانند بر بروز و شدت درماتیت‎‎ آتوپیک اثر بگذارند. اختلال در بیان ژن گیرنده های شبه تول، می تواند یکی از این علل رخداد علایم بالینی خاص در درماتیت ‎‎آتوپیک باشد. به غیر از درماتیت آتوپیک بسیاری از درماتیت ها با منشا آلرژیک در سگ سانان شناسایی شده اند که علایم این بیماری را تقلید کرده و از تشخیص های تفریقی آن به حساب می آیند. در مطالعه ی حاضر، بیان ژن گیرنده ی شبه تول 4 (tlr4) در سلول های تک هسته ای خون سگ- های نژاد تریر مبتلا به آلرژی پوستی ناشی از درماتیت آتوپیک و غیر آتوپیک به روش real-time quantitative pcr (qpcr) مورد ارزیابی قرار گرفت. بدین منظور از بین سگ های مبتلا به بیماری های پوست و مو، مراجعه کننده به بیمارستان آموزشی دانشکده ی دامپزشکی دانشگاه فردوسی مشهد (در بازه ی زمانی مهرماه 1390 تا تیرماه 1391)، تعداد 24 قلاده سگ در سه گروه مورد مطالعه قرار گرفتند:8 سگ مبتلا به درماتیت آتوپیک, 8 سگ مبتلا به درماتیت های آلرژیک غیر آتوپیک, 8 سگ سالم (فاقد بیماری پوست و مو). پس از اخذ نمونه ی خون از سگ های مورد مطالعه، در شرایط سترون، سلول های تک هسته ایی خون محیطی جدا شدند. سپس rna تام از پلت های pbmc خون سگ ها استخراج گردید. در ادامه رونوشت برداری معکوس و ساخت cdna صورت گرفت. محصولات حاصله با پرایمرهای اختصاصی tlr4تحت فرایند pcr معمولی و qpcr قرار گرفتند. محصولات فرایند pcr معمولی تحت انجام الکتروفورز قرار گرفته و باند های اختصاصی ژن tlr4در محل مورد انتظار بر روی ژل مشاهده شدند. همچنین منحنی ذوب حاصل از فرایند qpcr پیک منفرد حاصل از بیان ژن را در دمای صحیح نشان داد . نتایج حاصل از انجام تجزیه و تحلیل آماری تغییرات بیان ژن به علت ایجاد اختلالات مشاهده شده در استاندارد سازی و تنظیم دقیق`آزمون qpcr ،غیر قابل اتکا تلقی شده و بنابراین نیاز به انجام مطالعات بیشتری بر روی جنبه های مولکولی سیستم ایمنی مبتلایان به درماتیت های آلرژیک همچنان وجود دارد.

آفلاتوکسین ها (afs) ازخطرناک ترین مایکوتوکسین ها و متابولیت های سمی هستند که بوسیله قارچ ها در مواد غذایی تولید می شوند و دارای اثرات سمی، موتاژنیک، تراتوژنیک، کارسینوژنیک و تضعیف کننده سیستم ایمنی می باشند. پاسخ های سیستم ایمنی ذاتی، اولین سد دفاعی بدن در برابر پاتوژن ها می باشند. گیرنده های شناساگر الگو (prrs) بخصوص tlrs، از مولکول های مهم ایمنی ذاتی و سلول های تک-هسته ای خون محیطی (pbmcs) مانند مونوسیت ها، از مهم ترین سلول های ایمنی ذاتی محسوب می شوند. دوز پایین آفلاتوکسین ها معمولا در غذای حیوانات وجود داشته و ممکن است قابل شناسایی نباشد، ولی مطالعات اخیر نشان داده که این دوز می تواند در انسان و حیوانات بخصوص گاو باعث تضعیف سیستم ایمنی و افزایش ابتلاء به بیماری های عفونی و غیرعفونی شود. هدف اصلی مطالعه حاضر بررسی اثر مخلوط آفلاتوکسین ها بر بیان ژن tlr4 در pbmcs گاوهای سالم است. در این مطالعه بعد از خونگیری از گاوهای سالم، pbmcs با روش فایکول جدا شد و در معرض دوزهای پایین مخلوط آفلاتوکسین های (ng/ml1) afb1، (ng/ml5/0) afb2، (ng/ml25/0) afg1و (ng/ml25/0) afg2در زمان های مختلف (15، 30، 45 دقیقه، 1، 5/1، 2، 3، 4، 5، 6 و 18 ساعت) قرار گرفت و تغییرات بیان ژن tlr4 با روش qpcr سنجیده شد. آنالیز نتایج، افزایش معنادار بیان ژن tlr4 را در زمان های 45 دقیقه، 2 و 5 ساعت نشان داد. تغییر بیان ژن در زمان های 15 و 30 دقیقه، 3، 4، 6 و 18 ساعت زیاد قابل توجه نبود اما در زمان های 1 و 5/1 ساعت کاهش بیان ژن tlr4 دیده شد. این نتایج نشان می دهد که در معرض قرارگیری با آفلاتوکسین ها منجر به اختلال در میزان بیان ژن tlrها در سلول های ایمنی می شود. یافته-های حاضر بینش جدیدی در زمینه مطالعه اثرات و جنبه های مختلف مولکولی آفلاتوکسین ها و prrها در حیوانات ایجاد می کند.

آفلاتوکسین ها سموم طبیعی هستند که انواع گوناگونی از غذای انسان و خوراک دام را آلوده می کنند و منجر به تهدید سلامت انسان و دام می شوند. هدف از این مطالعه تعیین سطح آفلاتوکسین b1 در اجزا خوراک دام (شامل کنسانتره، سیلوی ذرت و خوراک آماده) جمع آوری شده از مزارع پرورش گاو شیری مشهد بود. سطوح آفلاتوکسین b1 با روش الایزا که روشی سریع و حساس می باشد، سنجیده شد. در تمامی 72 نمونه، حضور آفلاتوکسین b1 با دامنه غلظت4 تا 127 میکروگرم در کیلوگرم و میانگین غلظت 28 میکروگرم در کیلوگرم تشخیص داده شد. سطح آفلاتوکسین b1 در71 نمونه بیش از حداکثر مجاز تایید شده در ایران (5 میکروگرم در کیلوگرم) برای نمونه های خوراک گاو شیری مشاهده شد. خوراک آماده بالاترین سطح آلودگی را با دامنه غلظت 119-6 میکروگرم در کیلوگرم (میانگین غلظت 6.3±38میکروگرم در کیلوگرم) نشان داد، بدنبال آن کنسانتره با دامنه غلظت 127-4 میکروگرم در کیلوگرم (میانگین غلظت 6.5±32 میکروگرم در کیلوگرم) و سیلوی ذرت با دامنه غلظت 40.5-8.5 میکروگرم در کیلوگرم (میانگین غلظت 1.5± 16 میکروگرم در کیلوگرم). بیشترین آلودگی در زمستان (میانگین غلظت 9.3±42 میکروگرم در کیلوگرم) رخ داد، بدنبال آن پاییز (میانگین غلظت 2.8±27 میکروگرم در کیلوگرم)، بهار (میانگین غلظت 4.1± 26 میکروگرم در کیلوگرم) و در آخر تابستان (میانگین غلظت 2.8± 18.5 میکروگرم در کیلوگرم). نتایج نشان داد اختلاف آماری قابل توجهی بین میزان آفلاتوکسین نمونه های سیلوی ذرت و خوراک آماده وجود داشت (0.05p<). طبق نتایج بدست آمده از این مطالعه، از آن جایی که این مایکوتوکسین سلامت حیوانات را متاثر می سازد و شیر آلوده می تواند خطری جدی برای بهداشت عمومی باشد، نظارت دائمی برای آفلاتوکسین b1 توسط صنعت خوراک، همچنین آگاهی دادن بخش پرورش دهندگان بسیار توصیه می شود و مفید است.

هدف از این بررسی، ارتباط بین عیار پادتن تولید شده در گاو های شیری پر تولید بر علیه ویروس bvd و پارامتر های خونی مرتبط با ایمنی غیر اختصاصی است. لذا فرض بر این است که ارتباطی بین پادتن تولید شده و یافته های خون شناسی مرتبط با ایمنی غیر اختصاصی در گاوهای شیری پر تولید وجود ندارد. در این مطالعه 140 نمونه سرم از گاوداری صنعتی پرورش گاوهای شیری نژاد هلشتاین اطراف مشهد با مدیریت تقریباً یکسان اخذ گردید. آنتی بادی ضد ویروس bvd در خون گاوها با استفاده از تست الایزای غیر مستقیم، مورد ارزیابی قرار گرفت. شمارش گلبول های سفید خون و آزمایشات بیوشیمیایی شامل: اندازه گیری پروتئن تام ، آلبومین، گلوبولین و شاخص التهاب در نمونه های سرم اخذ شده، انجام گرفت و ارتباط بین سلولهای ایمنی خون از قبیل: لنفوسیت ها، نوتروفیل ها ، مونوسیت ها، ائوزینوفیل ها و تعداد تام لکوسیت ها با نتایج تست الایزای ویروس bvd با استفاده از آزمون های آماری spearman correlation ،pearson correlation و نرم افزار spss ویراست 16 آنالیز شد. نتایج حاصله نشان داد که تعداد 138 (57/98%) راس از 140 راس گاو از لحاظ حضور پادتن علیه ویروس bvd مثبت بود، که تعداد بیشترین عیار آلودگی در 84 (60%) راس متعلق به گاوهایی بود که میزان pp value آنها بین 75 تا 125 بود. بقیه نمونه ها تعداد 28 (20%) رأس در دامنه ی 25 تا 75 و 26 (18.57%) راس در دامنه بالای 125 بودند. در pp value های بسیار بالا میزان نوتروفیل های خون تمایل به کاهش را نشان دادند، همچنین در pp value های پایین و بسیار بالا میزان لنفوسیت ها و ائوزینوفیل ها به ترتیب افزایش و کاهش را نشان دادند. اگرچه ارتباطاتی بین میزان آلودگی سرمی و پارامترهای خونی مذکور دیده شد ولی هیچکدام از این ارتباطات از نظر آماری معنی دار نبود. با توجه به اینکه تقریباً تمام گاوهای مورد مطالعه در گاو داریهای مذکور حداقل یک بار به ویروس bvd آلوده شده اند، مطالعه بیشتر جنبه های اساسی ایمونوبیولوژی ویروس bvd و اثرات آن بر سلولهای سیستم ایمنی گاو های شیری پر تولید در حال انجام است.

ویروس bvd از جنس پستی ویروس و خانواده فلاوی ویریده می باشد. این ویروس خطرناک خسارات اقتصادی زیادی شامل کاهش تولید شیر و کارایی تولیدمثل، سرکوب سیستم ایمنی و تولد گوساله های ناقص الخلقه ایجاد کرده و همچنین باعث تولد گوساله های دارای عفونت پایدار در گله می گردد. هدف اصلی مطالعه حاضر، بررسی ارتباط بین وضعیت سلامت بافت پستان و میزان آنتی بادی ایجاد شده ضد ویروس bvd در تعدادی از گاوهای شیری نژاد هلشتاین دامپروریهای صنعتی اطراف مشهد می باشد. در این بررسی، 139 رأس گاو هلشتاین از سه گاوداری صنعتی اطراف مشهد بطور تصادفی برای نمونه گیری خون و شیر انتخاب شدند. برای انتخاب گاوهای با وضعیت متفاوت سلامت پستان از روش cmt استفاده گردید. نمونه های شیر جهت تعیین تعداد سلول های سوماتیک و میزان ترکیبات آن (پروتئین، چربی، اوره) جمع آوری شد. نمونه های خون برای تعیین عیار آنتی بادی ضد ویروس bvd در آنها با آزمایش الایزای غیر مستقیم، آنالیز شدند. برای تعیین ارتباط بین وجود یا عدم وجود آنتی بادی ضد ویروس bvd با الایزا و ورم پستان، از آزمو نهای مربع کای و fisher’s exact استفاده گردید. سپس در گاوهای مورد آزمایش رابطه فاکتورهای سلولی و بیوشیمیایی شیر ( scc، پروتئین، چربی و اوره) با نتیجه الایزا بوسیله روش spearman correlation test بررسی شد. نتایج آزمایشها نشان داد که تعداد 137 رأس (56/98%) از 139 رأس گاو از لحاظ حضور آنتی بادی ضد ویروس bvd مثبت بوده، که تعداد 45 رأس (37/32%) دارای ورم پستان تحت بالینی و 35 رأس (17/25%) دارای ورم پستان بالینی بودند. بین پارامترهای وجود و عدم وجود ورم پستان با مثبت یا منفی بودن آزمایش الایزای سرمی به بیماری bvd ارتباط معنی داری وجود نداشت. همچنین بین عواملی از قبیل scc، پروتئین، چربی و اوره شیر با میزان آنتی بادی ضد bvdv خون گاوهای مورد آزمایش رابطه معنی داری مشاهده نشد. البته ارتباط معکوس و نزدیک به معنی دار بین میزان آنتی بادی ضد bvdv و scc شیر گاوها مشاهده شد. با توجه به اینکه تقریباً تمام گاوهای مورد بررسی در طول زندگی شان حداقل یک بار به ویروس bvd آلوده شده اند، مطالعه بیشتر جنبه های اساسی ایمونوبیولوژی ویروس bvd و اثرات آن بر سیستم ایمنی پستان گاو های شیری پر تولید در دانشکده در حال انجام است.

منطقه ی چلپو با اقلیم نیمه خشک کوهستانی در جنوب غربی استان خراسان رضوی، شمال کاشمر (کوهسرخ) قرار دارد.کانی سازی رآلگار، اورپیمنت و پیریت در زون آلتراسیون آرژیلیکی- پیریت منشأ ورود عنصر سمی آرسنیک به منابع آب و خاک منطقه است. به منظور بررسی ژئوشیمیایی آلودگی ناشی از آرسنیک زمین زاد در این منطقه و اثرات زیست محیطی آن با اشاره بر سیستم ایمنی و سلامت انسان، نمونه برداری از منابع خاک و آب منطقه و همچنین نمونه گیری از نشانگرهای زیستی مو، ادرار و خون افراد ساکن در منطقه انجام شد. اندازه گیری غلظت آرسنیک در نمونه های خاک و آب با روش icp-es و در نشانگرهای زیستی مو و ادرار با جذب اتمی (aas) انجام شد. غلظت آرسنیک در 26 نمونه خاک برداشت شده از منطقه بین 1/7 تا 8/1448 میلی گرم درکیلوگرم متغیر بود. با توجه به مقادیر ارائه شده توسط usepa (1983) برخی از خاک ها آلوده به آرسنیک بوده و ارزیابی آلودگی خاک با شاخص زمین انباشت (igeo) و فاکتور غنی شدگی (ef) رده های متفاوتی از آلودگی و غنی شدگی آرسنیک را در خاک های منطقه نشان داد. عنصر سمی آرسنیک پس از آزادسازی در جزء آلی خاک تجمع یافته و منشأ آن در خاک، ناشی از حضور کانی سازی در منطقه و فرآیندهای خاکسازی در نیمرخ خاک است. یازده منبع آب سطحی و زیرزمینی (رودخانه، چشمه و چاه) برای تعیین یون های اصلی (na, ca, mg, hco3, so4, cl) و فرعی (as, b, br, sr, k) مورد بررسی قرار گرفت. غلظت عنصر سمی آرسنیک از 12 تا 606 میکروگرم بر لیتر متغیر بوده و در تمامی نمونه ها بالاتر از حد استاندارد (10 میکروگرم بر لیتر) اعلام شده توسط who در سال 2011 است. بررسی های هیدروژئوشیمیائی و نمودار گیبس نشان داد که برهمکنش آب- سنگ (هوازدگی) و تبخیر، فرآیندهای کنترل کننده ی شیمی منابع آب هستند. بر اساس داده های موجود، منشأ اولیه ی آرسنیک در آب، اکسیداسیون کانی های سولفیدی آرسنیک دار بوده و در مرحله ی بعد آرسنیک از قبل جذب شده بر روی سطح اکسیدها تحت تأثیر تغییر شرایط فیزیکوشیمیائی، دوباره به فاز محلول در آمده است. غلظت آرسنیک در نشانگرهای زیستی مو و ادرار گرفته شده از 11 فرد مورد بررسی، بالاتر از حد طبیعی ارائه شده توسطatsdr بود که با توجه به مطالعات صورت پذیرفته نشانگرهای زیستی ادرار و به خصوص مو برای بررسی "در معرض قرارگیری" آرسنیک مناسب هستند. خونگیری وریدی از 26 فرد بومی انجام شد. با توجه به میزان هموگلوبین و دیگر پارامترهای خونی، که در تعیین کم خونی ها به کار می رود، 44 درصد از جمعیت مورد مطالعه دارای انواع کم خونی خفیف و کم خونی مرزی خفیف بودند که می تواند مرتبط با اثرات سمی آرسنیک بر بدن باشد. با توجه به عدم مشاهده ی تغییرات قابل توجه در تعداد سلول های ایمنی (گلبول های سفید) افراد دچار کم خونی، محتملا تأثیر غالب تر آرسنیک آب آشامیدنی بر گلبول های قرمز افراد مورد بررسی می باشد. البته با توجه به بیماری های مختلف در افراد مورد بررسی، اثرات مزمن آرسنیک می تواند مرتبط با عملکرد سلول های ایمنی باشد که می توان با مطالعات مداوم و عمیق تر در مورد افرادی که در مواجهه با آرسنیک هستند همراه با در نظر گرفتن اثرات مزمن آرسنیک در جمعیت ها و تفاوت های محیطی، اقلیمی درک بهتری از اثرات آرسنیک در سلامت انسان داشت. مطالعات ما روی اثرات عمیق آرسنیک در درون تن و برون تن انسان و حیوانات ادامه دارد.

چکیده مشتقات فوران، نشر کننده فلوئورسانس بسیار خوبی برای واکنش های نورتابی شیمیایی پراکسی اکسالات ها می-باشند. واکنش پراکسی اکسالات ها مانند بیس (2،4، 6- تری کلروفنیل) اکسالات با هیدروژن پراکسید می تواند با شکل-گیری حدواسط دی اُکستان دی اُن انرژی را به یک فلوئورسر انتقال دهد. مشتق جدید فوران (دی اتیل-2- (ترشیوبوتیل-آمینو)-5- دی فنیل-3و4- فوران دی کربوکسیلات) به عنوان فلوئورسر برای سیستم پراکسی اکسالات مورد استفاده قرار گرفته است که می تواند نور آبی را تولید کند. رابطه میان شدت نورتابی شیمیایی و غلظت فلوئورسر، پراکسی اکسالات ، سدیم سالیسیلات و هیدروژن پراکسید بررسی شده است. پارامترهای سینیتیکی شامل شدت در ماکزیمم نورتابی، زمان در ماکزیمم شدت، بازده کل نورتابی، ماکزیمم شدت تئوری و ثابت های سرعت شبه درجه اول صعودی و نزولی توسط برازش کامپیوتری منحنی های شدت بر حسب زمان نورتابی شیمیایی تعیین شدند. نتایج نشان داده که مشتق جدید فوران می تواند به عنوان یک نشر کننده فلوئورسانس آبی با راندمان کوانتومی بالا در واکنش پراکسی اکسالات استفاده شود. اثر کتکول آمین ها (دپامین، اپی نفرین و متیل دوپا) در شدت نورتابی شیمیایی سیستم بیس (2،4، 6- تری کلروفنیل) اکسالات- دی اتیل-2- (ترشیوبوتیل آمینو)-5- دی فنیل-3و4- فوران دی کربوکسیلات- هیدروژن پراکسید- سدیم سالیسیلات مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان داد که نور نشر شده از این سیستم نورتابی شیمیایی در حضور دپامین تضعیف اما در حضور اپی نفرین و متیل دوپا تقویت می شود. از آنجائیکه یک رابطه خطی بین غلظت کتکول آمین ها و تغییرات شدت نورتابی شیمیایی مشاهده شد، بنابراین یک روش جدید برای اندازه گیری کتکول آمین ها معرفی گردید. بررسی آماری نشان داد که در شرایط بهینه این رابطه در محدوده های غلظتی 7/12-5/0، 83/1-06/0 و 52/3-069/0 میکروگرم بر میلی لیتر به ترتیب برای دپامین، اپی نفرین و متیل دوپا با ضرایب همبستگی بزرگتر از 99/0 خطی بودند. حد تشخیص های (3 (s/n = به دست آمده کتکول آمین ها با ترتیب ذکر شده نیز 3/0، 03/0 و 04/0 بودند. انحراف های استاندارد نسبی (rds) محاسبه شده برای 5 بار اندازه گیری غلظت 1 میکروگرم بر میلی لیتر کتکول آمین ها با ترتیب ذکر شده 9/1%، 5/2% و 2/5% بودند. یک مدل حدواسط ادغام شده برای تعیین پارامترهای سینیتیکی این سیستم نورتابی شیمیایی در حضور و غیاب کتکول آمین ها مورد استفاده قرار گرفت. نتایج نشان داد که کتکول آمین ها نه تنها می توانند شدت نورتابی را تغییر دهند، بلکه می توانند ثابت سرعت های صعودی و نزولی را نیز تغییر دهند. در نهایت توانایی به کارگیری سیستم نورتابی شیمیایی برای اندازه گیری کتکول آمین ها در نمونه های دارو مورد ارزیابی قرار گرفت. اثر کاتالیزوری کمپلکس تک هسته ای (n-(2-(2- آمینو اتیل آمینو) اتیل) 1h-پیرول-2-کربوکسامید-مس (ii) در شدت نورتابی شیمیایی سیستم لومینول - فلورسئین- هیدروژن پراکسید در محیط قلیایی بررسی شد. نتایج نشان داد که شدت نورتابی شیمیایی لومینول- فلورسئین-هیدروژن پراکسید کاتالیز شده با کمپلکس تک هسته ای مس (ii) قویاً افزایش می یابد. توانایی این کمپلکس در مقایسه با چند کمپلکس مرسوم بررسی و ملاحظه شد این کمپلکس فعالیت کاتالیزوری قابل توجهی از خود نشان می دهد. تاثیر پارامترهای موثر بر شدت نورتابی شیمیایی شامل غلظت لومینول ( m2-10- 4-10)، فلورسئین ( m 3-10- 5-10) و هیدروژن پراکسید (m 3-1) با استفاده از روش سطح پاسخ و طرح آزمایشی باکس-بنکن (box-behnken) بررسی شدند. نتایج نشان دادند از میان سه متغیر بررسی شده غلظت لومینول و هیدروژن پراکسید دارای بیشترین تاثیر بر میزان شدت نورتابی شیمیایی بودند. با توجه به مدل تجربی به دست آمده توسط روش سطح پاسخ، ارتباط میان متغیرهای مورد مطالعه و میزان شدت نورتابی شیمیایی مناسب تشخیص داده شد. اثر کاتالیزوری کمپلکس های دو هسته ای مس (ii) در واکنش نورتابی شیمیایی لومینول- هیدروژن پراکسید مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان داد این کمپلکس ها تجزیه هیدروژن پراکسید به آنیون رادیکال سوپراکسید که باعث اکسیداسیون لومینول می شود را کاتالیز می کنند. نتیجه قابل توجه این بود که این کمپلکس ها واکنش نورتابی شیمیایی لومینول را در محیط بازی تنها در حضور اکسیژن محلول و حتی در ph 5/7 در حضور غلظت پایین هیدروژن پراکسید، کاتالیز می کنند، در واقع باعث کاهش ph بهینه واکنش نورتابی شیمیایی لومینول- هیدروژن پراکسید می-شوند. به منظور دستیابی به بالاترین شدت نورتابی شیمیایی پارامترهای موثر شامل: ph، غلظت هیدروژن پراکسید، لومینول و کمپلکس ها بهینه شدند. تحت شرایط بهینه، اثر بعضی از اسیدهای آمینه در نورتابی شیمیایی سیستم لومینول- هیدروژن پراکسید کاتالیز شده با کمپلکس های دو هسته ای مس (ii) مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان داد که تنها اسیدهای آمینه گوگرددار سیستئین و گلوتاتیون می توانند شدت نورتابی شیمیایی لومینول کاتالیز شده با این کمپلکس ها را کاهش دهند بنابراین از این پدیده می توان برای اندازه گیری این ترکیبات استفاده نمود. اثر خاموش کنندگی هگزی تیازوکس در نورتابی شیمیایی سیستم لومینول- هیدروژن پراکسید کاتالیز شده با نانو ذرات طلا مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان داد که هگزی تیازوکس موجب تضعیف واکنش نورتابی شیمیایی این سیستم می شود. بر این اساس، روش جدیدی برای اندازه گیری هگزی تیازوکس معرفی شد. به منظور بررسی اثر سه متغیر آزمایشی شامل غلظت لومینول، هیدروژن پراکسید، ph در شدت نورتابی شیمیایی لومینول کاتالیز شده با نانوذرات طلا و دستیابی به حداکثر شدت نشر از طرح آزمایشی باکس-بنکن (box-behnken) استفاده شد. در شرایط بهینه، شدت نورتابی شیمیایی خالص با غلظت هگزی تیازوکس در محدود? غلظتی 35/0- 017/0 میلی گرم به لیتر با ضریب همبستگی 997/0 خطی بود. حد تشخیص (3s/n=) به دست آمده برای هگزی تیازوکس نیز با استفاده از نمودار معیارگیری 011/0 میلی گرم به لیتر بود. انحراف استاندارد نسبی (rds) محاسبه شده برای 7 بار اندازه گیری غلظت 25/0 میلی گرم به لیتر 2/4% بود. همچنین، این روش نورتابی شیمیایی برای اندازه گیری سم هگزی تیازوکس در میوه نارنگی و آب شیر به کار گرفته شد. نانوذرات هسته-پوسته، سیلیکا-پلی اتیلن گلیکول دوپه شده با فلوئورسرهای 10،9-دی فنیل آنتراسن (dpa)، مشتق تری اتوکسی سیلان ردامین b و سیانین 5 سنتز و شناسایی شدند. این ساختارها شامل: نانوذرات سیلیکا-پلی اتیلن-گلیکول دوپه شده با تنها یک فلوئورسر، دو و هر سه فلوئورسر بودند. رفتارهای الکتروشیمیایی، نورتابی الکتروشیمیایی فلوئورسرهای دوپه شده در ساختار نانوذرات سیلیکا-پلی اتیلن گلیکول، در حضور 2- (دی بوتیل آمینو) اتانول (dbae، به عنوان گونه هم واکنش دهنده) در بافر آبی مورد بررسی قرار گرفتند نتایج نشان داد که فرایند انتقال انرژی رزونانسی فورستر (fret) موثری بین فلوئورسرهای دوپه شده شکل می گیرد به گونه ای که رنگ نور نشری بر اساس انتخاب نوع فلوئورسر پذیرنده-انرژی ساطع می شود. بنابراین با استفاده از این نانو ذرات می توان گونه های نورتاب جدید با کارایی نورتابی الکتروشیمیایی بهتر در محیط آبی و محفاظت شده توسط ماتریکس سیلیکا در برابر واکنش های الکتروشیمیایی ناخواسته، فراهم نمود. همپنین با توجه به اینکه نورتابی الکتروشیمیایی هیدروکربن های آروماتیک چند حلقه ای تنها در محیط آلی امکان پذیر است در این راستا با به کارگیری نانوذرات هسته-پوسته، سیلیکا-پلی اتیلن گلیکول به عنوان بستر، نورتابی الکتروشیمیایی 9،10-دی فنیل آنتراسن در محیط آبی بررسی شد. از آنجائیکه طی فرآیند سرطانی شدن یک بافت تغییرات فراوانی در سطح متابولیت های حیاتی سلول رخ می دهد بر این اساس، از طیف سنجی مادون قرمز تبدیل فوریه(ftir) به عنوان یک روش سریع و غیر مخرب برای تشخیص بافت های سالم از سرطانی بافت معده انسان استفاده شد. به این منظور، طیف های جذبی هر دو قسمت سالم و سرطانی بافت های معده چهار بیمار مبتلا به سرطان معده (رنج سنی 2 ± 65) پس از آماده سازی در ناحیه cm-1 4000-600 توسط دستگاه ftir ثبت شدند. طیف ها در دو ناحیه cm-1 3100-2800 و cm-1 1800-900 به طور جداگانه مورد آنالیز قرار گرفتند. نتایج نشان داد سطح متابولیت های حیاتی سلول در بافت های سرطانی نسبت به سالم کاهش می یابد. این بررسی نشان داد با استفاده از تکنیک ftir می توان جهت اندازه گیری نسبت متابولیت های نمونه های بافت سالم و سرطانی استفاده نمود و این تکنیک می تواند برای تشخیص سرطان توسعه یابد.

ویروس bvd یک rna ویروس تک رشته ای است که متعلق به جنس پستی ویروس و خانواده فلاوی ویریده می باشد. این ویروس یکی از معمول ترین پاتوژن های گاوان است که منجر به خسارات اقتصادی فراوانی از جمله کاهش تولید شیر، افت کارایی تولیدمثلی، سرکوب سیستم ایمنی و ناقص الخلقه زایی می شود. همچنین ویروس bvd باعث تولد گوساله های دارای عفونت پایدار یا persistent infection (pi) در گله می گردد. این ویروس در قسمت های مختلف بدن مثل دستگاه های گوارشی، تناسلی، تنفسی و غیره می تواند ایجاد عفونت کند. هدف اصلی مطالعه حاضر، بررسی ارتباط بین عیار آنتی بادی ویروس bvd و وجود این ویروس در خون گاوهای شیری هلشتاین با استفاده از آزمون های elisa و rt-pcr می باشد. در این بررسی، 140 رأس گاو هلشتاین از سه گاوداری صنعتی اطراف مشهد، بطور تصادفی برای نمونه گیری خون انتخاب شدند. سرم ها جهت ردیابی آنتی بادی و تعیین درصد مقادیر مثبت یا percent positivity (pp) آنتی بادی ضد ویروس bvd، با آزمایش الایزای غیر مستقیم، آنالیز شدند. خون کامل نمونه ها در گروه های 10 تایی با هم مخلوط شدند و سپس جهت ردیابی مولکولی ویروس bvd مورد استفاده قرار گرفتند. در این مطالعه با استفاده از تکنیک معمول بیولوژی مولکولی پس از استخراج rna از خون و سنتز cdna با کیت های تجاری و استفاده از پرایمر اختصاصی،pcr انجام شد و باند اختصاصی (اندازه 244 جفت باز) ژنوم ویروس bvd، برای جستجو با الکتروفورز ژل آگارز 5/1 % بررسی شد. نتایج آزمایش ها نشان داد که تعداد 138 رأس (56/98 %) از 140 رأس گاو از لحاظ حضور آنتی بادی ضد ویروس bvd، مثبت بودند و تنها 2 رآس آنتی بادی منفی بودند که در rt-pcr نیز حضور ویروس تنها در خون این 2 رآس (42/1 %) شناسایی شد که نشان دهنده pi بودن آنهاست. همچنین مطالعه حاضر این نکته را تأیید می کند که تقریباً تمام گاوهای مورد بررسی در طول زندگی شان حداقل یک بار به ویروس bvd آلوده شده اند و درصد بالای سروپازیتیوی ویروس bvd نشان دهنده نیاز شدید این مناطق به برنامه های کنترلی و پیشگیری از bvd است. یکی از مهمترین اهداف برنامه های کنترلی شناسایی و حذف دام های pi می باشد که با استفاده از روش pcr اختصاصی استفاده شده در این مطالعه روی نمونه های خون کامل، می توان دام های pi را در سطح گله با هزینه های بسیار پایین تر و صرفه جویی در وقت، شناسایی کرد.

آفلاتوکسین ها متابولیت های ثانیه قارچ های از جمله خانواده آسپرژیلوس هستند که به عنوان آلودگی محصولات کشاورزی و خوراکی بحساب می آیند و تاثیرات مخرب زیادی بر سلامت انسان دارند. این ترکیبات به حرارت مقاوم بوده و به دلیل ساختارهای شیمیایی کوچکشان از سدهای زیستی به راحتی عبور می کنند. ناراحتی های کبدی، سرطان و ناهنجاری های ژنی از جمله پیامدهای مهم حضور این ترکیبات در تغذیه افراد است. تحقیقات اخیر مشخص نمود این ترکیبات قادر به ایجاد استرس اکسیداتیو و القاء التهاب در سلول هستند. در این تحقیق برای بررسی مکانیزم تاثیرات التهابی مخلوط آفلاتوکسین ها (afb1,afb2,afg1, afg2)در بدن انسان، از سلول های تک هسته ای خون محیطی (pbmc) استفاده گردید. نتایج بررسی های بیان ژنی بوسیله روش واکنش زنجیره ای پلی مراز کمی نشان داد که در سلول های تیمار شده با غلظت های بسیار پایین آفلاتوکسین ( ng/ml1) پس از دو ساعت از تیمار ژنهای گیرنده های شبه تول(tlr) 4 و 2 افزایش چشمگیری یافت. همچنین برای تایید نتایج بیان ژن های myd88 به عنوان پروتئین آداپتور مسیر پیامی و cd14 به عنوان گیرنده همیار tlr4 در سلول های تیمار شده و کنترل بررسی گردید که در اینها هم افزایش معنی داری نسبت به گروه کنترل مشاهده گردید.همچنین بررسی ها تا 24 ساعت پس از تیمار نشان داد که روند افزایش همچنان در سلول های تیمار شده دیده می شود. بررسی های بیشتر در شرایط مشابه با غلظت ng/ml2 انجام شد. نتایج این آزمایش نشان داد در طی 24 ساعت افلاتوکسین ها باعث سرکوب بیان tlrها می شوند. نتایج این پروژه برای اولین بار نشان داد که مخلوط آفلاتوکسین ها در دوز بسیار پایین می تواند در زمان بسیار کوتاه بیان ژنهای tlr که واسطه های التهابی محسوب می شوند را افزایش دهد.

آفلاتوکسین ها (afs) بویژه آفلاتوکسین b1 (afb1) از جمله خطرناک ترین مواد زیستی با ویژگی های کارسینوژن و موتاژن بوده که سلامت انسان را در سراسر جهان بویژه کشورهای در حال توسعه مانند ایران به خطر انداخته است. شناخت مکانیسم های مولکولی که این توکسین در انسان ایجاد می کند، از اهمیت ویژه ای برخوردار است. تحقیقات بسیار اندکی در مورد این مکانیسم ها در سیستم ایمنی انسان صورت پذیرفته است. در تحقیق حاضر، چالش afb1 با سلول های متفاوت سیستم ایمنی شامل مونوسیت ها، لنفوسیت ها، t-cells های cd8 و سلول های دندرتیک مشتق از مونوسیت ها (mddcs) در آزمایش های جداگانه مورد بررسی قرار گرفت. در آزمایش اول بر روی مونوسیت ها و لنفوسیت ها پس از مشخص نمودن ژن های موثر cyps، که در فعال نمودن afb1 نقش دارند، این سلول ها با غلظت های 10 و 100 نانوگرم در میلی لیتر afb1 به مدت 2 و 12 ساعت چالش داده شد و ژن های cyp1a1، cyp3a4 و cyp1b1 در مونوسیت ها و cyp1a1 در لنفوسیت ها بیشترین واکنش را به حضور afb1 نشان دادند. همچنین آنالیز سیکل سلولی بر روی این سلول ها توقف سیکل سلولی در فاز s توسط afb1 بویژه در لنفوسیت ها را نشان داد. در آزمایش دوم تاثیر afb1 بر بیان ژن های akr7a2 و gstm1 در مونوسیت ها و لنفوسیت ها در چالش با afb1 ارزیابی شد و سیستم سم زدایی gsts واکنش شدیدتری به حضور afb1 نشان داد. در آزمایش سوم تغییرات عملکرد ctls در مواجه با afb1 از طریق اندازه گیری میزان پرفورین و گرانزایم b با استفاده از فلوسایتومتری نشان داد که afb1 در غلظت مورد بررسی احتمالاً تغییر قابل توجهی در میزان گرانزایمb و پرفورین در ctlها ایجاد نمی کند. آزمایش چهارم شامل اندازه گیری تغییرات بیان ژن های مرتبط با عملکرد mddcs در چالش با 10 نانوگرم در میلی لیتر afb1 در زمان های 2 و 12 ساعت به همراه ژن های کلیدی مرتبط با متابولیسم afb1 و سایتوکاین های مهم مرتبط با عملکرد mddcs مورد بررسی قرار گرفت. نتایج این آزمایش حاکی از تاثیرات التهابی شدید afb1 بویژه در زمان 12 ساعت در mddcs بود. در مجموع afb1 حتی در غلظت بسیار پایین 10 نانوگرم در میلی لیتر باعث تغییرات در عملکرد برخی از فرایند های مهم سلول های سیستم ایمنی گردید، که نهایتاً می تواند باعث اختلال در پاسخ مناسب آن سلول ها در مقابل عوامل پاتوژن داخلی و خارجی گردد. نتایج این پژوهش راهگشای مطالعات آینده در جهت طراحی سیستم های ردیابی afb1 در مقادیر کم در سیستم ایمنی انسان با استفاده از مولکول هایی است که بیشترین تاثیرپذیری را هنگام درمعرض قرارگیری با afb1 دارند.

مطالعه حاضر با هدف بررسی تاثیر عصاره گل گیاه گل گاو زبان ایرانی بر روی میزان فعالیت نوتروفیل های خون گاو های شیری پر تولید انجام گرفته است. نمونه خون از 10 گاو شیری سالم و نژاد هولشتاین اخذ شد و نوتروفیل نمونه ها در آزمایشگاه با استفاده از روشhypotonic lysis به طور تقریبا خالص جداسازی شد. در یکی از این آزمایش ها، که بررسی عصاره گل گیاه گل گاو زبان ایرانی روی میزان فعالیت نوتروفیل ها با استفاده از تکنیک کمی لومینسانس بود، تحریک نوتروفیل ها با pma، latex beadو pansorbin® انجام شد و نشان داده شد که نوتروفیل های گروه تیمار شده با عصاره گل گیاه گل گاو زبان نسبت به گروه کنترل، رادیکال آزاد (مخصوصاً داخل سلولی) بیشتری تولید کردند. این نشانه بارزی از افزایش فعالیت نوتروفیل ها می باشد. همچنین میزان کمی لومینسانس حاصل از فاگوسیتوز میکرو ذرات (latex bead و pansorbin®) و محرک های غیر ذره یا محلول، مثل pma، نشان از افزایش قدرت بلع نوتروفیل های مواجهه شده با عصاره گل گیاه گل گاو زبان بود. آزمایشی دیگر که برای بررسی میزان و قدرت فاگوسیتوز و باکتری کشی نوتروفیل ها علیه باکتری پاتوژن استافیلوکوکوس اورئوس با استفاده از تکنیک های چالش بین نوتروفیل ها و پاتوژن استافیلوکوکوس اورئوس با روش کشت باکتری و شمارش کلنی های باکتری در محیط کشت انجام شد، نشان داد که % فاگوسیتوز و قدرت کشتن پاتوژن استافیلوکوکوس اورئوس در نوتروفیل های گروه تیمار شده با عصاره گل گیاه گل گاو زبان به طور معنی داری بیشتر از گروه کنترل بود. آزمایش سوم که برای بررسی میزان تولید h2o2 (کلیدی ترین رادیکال های آزاد داخل سلولی) توسط نوتروفیل با استفاده از تکنیک فلوسیتومتری انجام گرفت، نشان داد که نوتروفیل های تیمار شده با عصاره گل گیاه گل گاو زبان افزایش تولید فلورسانس (تولید رادیکال های آزاد داخل سلولی مفید در مبارزه با پاتوژن ها) را نسبت به گروه کنترل نشان دادند. در آخرین آزمایش هم تاثیر عصاره گل گیاه گل گاو زبان بر % نکروز نوتروفیل ها مورد بررسی قرار گرفت. برخلاف نتیجه ای که مورد انتظار ما بود، % نکروز نوتروفیل ها در گروه تیمار شده با عصاره گل گیاه گل گاو زبان بیشتر از گروه کنترل بود. نتایج آزمایشات به طور کلی نشان داد که عصاره گل گیاه گل گاو زبان می تواند به عنوان یک ماده تقویت کننده سیستم ایمنی تاثیر چشم گیری روی فعالیت سلول های سیستم ایمنی ذاتی داشته باشد و بایستی مطالعات بیشتری در زمینه کشف ماده موثره درون عصاره این گیاه انجام شود تا بتواند در آینده به طور گسترده مورد استفاده قرار بگیرد.

با توجه به اینکه afb1 یکی از معضلات زیستی امروزه بویژه در محصولات کشاورزی ایران است در این تحقیق تأثیر این توکسین را بر سیستم ایمنی انسان در شرایط برون تن مورد ارزیابی قرار داده شد. برای این منظور تاثیر دو دز 10 و 100 ناگرم در میلی لیتر afb1 بر بیان فاکتور مهم رونویسی ژن های پیش التهابی nf-kb با روش real time pcr بررسی گردید. بدین منظور ابتدا از 20 نفر دانشجو داوطلب نمونه خون گرفته، سپس با روش فایکولینگ pbmc جداسازی شده و در مجاورت با آفلاتوکسین b1 با غلظت های 10 و 100 نانوگرم در میلی لیتر به مدت 2 ساعت چالش داده شد. cdna حاصل از rna بدست آمده از پلیت های سلولی، چالش یافته و کنترل، با بکارگیر یپرایمرهای اختصاصی برای ژن هدف (nf-kb) و ژن مرجع (beta-actin) مورد آزمایش qrt-pcr قرار گرفت. آنالیز واریانس نشان داد که در تیمار 10 نانوگرم در میلی لیتر افزایش nf-kb معنی دار نبوده اما در تیمار 100 نانوگرم در میلی لیتر افزایش nf-kb کاملاً معنی دار است. نتایج حاصل نشان داد که دز های کم و متوسط afb1 نیز می تواند اثرات ایمنوتوکسیک بسیار قوی در انسان داشته باشد. از این رو بکارگیری استراتژی هایی جهت غیرفعال کردن یا کاهش اثرات این توکسین کاملا ضروری است.

درماتیت آتوپیک سگ ها (cad) یک بیماری پوستی آلرژیک با زمینه ژنتیکی می باشد که سبب خارش شدید و آماس پوست می شود و در نژاد تریر شایع می باشد. cad متعاقب تخریب سد اپیدرمی و تماس تسهیل شده آلرژن با سلول های عرضه کننده آنتی ژن پوست (سلول های لانگرهانس) آغاز می شود و در ادامه سبب القا مسیر آماسی وابسته به tlr4 می شود. هدف این مطالعه بررسی پلی مورفیسم ژن tlr4 در سطح نوکلئوتید ها (snp) در مبتلایان به cad می باشد. در مطالعه ی حاضر از 12 سگ تریر مبتلا به cad مراجعه شده به بیمارستان دانشکده دامپزشکی دانشگاه فردوسی مشهد، نمونه خون اخذ شد. پس از استخراج dna ژنومیک از خون کامل و طراحی پرایمرها و انتخاب قطعه ای از ژن tlr4، شامل بخشی از ژن قسمت خارج سلولی آن تحت عنوان نواحی غنی از لوسین (lrr)، که مستقیماً با مولکولهای وابسته به پاتوژنها یا آلرژنها درگیر می شود ، نسبت به تهیه محصول pcr به طول 1925bp اقدام شد. محصولات pcr توالی یابی شد و سپس با نرم افزار بیوانفورماتیک clc genomic workbench5 آنالیز شدند. سپس با آنالیز جایگاه های برشی آنزیم های اندونوکلئاز بر روی قطعه مورد مطالعه و بررسی مطابقت جایگاه snp های مشاهده شده با آن، در نهایت آنزیم xcei جهت هضم آنزیمی انتخاب شد. آنالیزهای مولکولی قطعه مورد مطالعه نشان داد که snp های عمدتا nonsynonymous ژن tlr4 با فراوانی متفاوت در جایگاهشان دیده شد. در واکنش هضم آنزیمی، تغییر الگوی برش آنزیمی بواسطه وجود snp شماره 495 در یکی از جایگاه های برشی آنزیم xcei ، مشاهده شد. به کمک این نتایج در کنار یافته های مطالعه قبلی (نقص در بیان ژن tlr4 و برهم کنش آن با لیگاند lps) و آنالیز پروتئین tlr4 متعاقب رخداد snpها میتوان به کمک نرم افزارهایی مثل icm و مدل سازی پروتئینی، عملکرد پروتئین tlr4 را در ارتباط با رخداد cadبررسی عمیق تری کرد تا پنجره ای برای یافتن نقش tlr4 در پاتوژنز پیچیده cadباز شود.

امروزه ابتلا به انواع مختلف سرطان از جمله مخاطرات اصلی حیات بشری به شمار می آید. یکی از انواع این بیماری سرطان کولورکتال (crc) است. در این مطالعه ارتباط ژنتیکی ژن سیتوکروم p450 به نام cyp1b1را با سرطان کولورکتال در نمونه های به دست آمده از تومورهای سرطانی منطقه سیستان و بلوچستان مورد ارزیابی قرارداده شده است. در این تحقیق با هدف یافتن پلی مورفیسم در ژن cyp1b1 در بیماران سرطان روده بزرگ، ابتدا تعداد 30 نمونه بافت پارافینه ی از آرشیو بیمارستان امیرالمومنین زاهدان و آزمایشگاه تشخیص طبی دانش تهیه گردید. dna ژنومی با استفاده از کیت مخصوص استخراج گردید. dna استخراج شده با استفاده از پرایمرها اختصاصی دارای سایت برشی به جهت کلونینگ ، این ژن به طول 1658 صورت پذیرفت و سپس برای توالی یابی و مشاهده ی snp های احتمالی به شرکت ماکروژن کره فرستاده شد. در نهایت با توجه به نتایج به دست آمده و عدم اختلاف در توالی به دست آمده با توالی رفرنس پلی مورفیسمی مشاهده نشد.