در این تحقیق به منظور بررسی تنوع سوماکلونالی در طی واکشت های مکرر کالوس های توتون اقدام به کشت ریز نمونه- های برگ و ساقه گیاه توتون ( رقم چپق) در محیط کشت ms که حاوی 4 میلی گرم بر لیتر 2,4-d و 5/0 میلی گرم بر لیتر کینتین بود گردید. بعد از اینکه کالوس ها رشد کردند در محیط کشت دیگر با همان غلظت های هورمونی واکشت شدند. بعد از واکشت چهار، کالوس ها به محیط کشت باززایی ms با غلظت های هورمونی شامل 5/0 میلی گرم بر لیتر 2,4-d ، 4 میلی گرم بر لیتر کینتین ، 1 میلی گرم بر لیتر زئاتین منتقل شد. بعد از تشکیل گیاهچه ها از گیاه اولیه و گیاه باززایی شده ، استخراج dna به منظور بررسی تنوع سوماکلونالی انجام گرفت. و در کل از 20 پرایمر تصادفی و تکنیک rapd-pcr برای بررسی این تنوع استفاده گردید. الگوی الکتروفورزی نتایج rapd وجود پلی مورفیسم را در باند های dna تکثیر شده با چهار پرایمر تصادفی opa-10 ، opr-12، opc-09، ops-11 نشان دادند.وجود تغییرات در ژنوم توتون به خاطر قرار گرفتن طولانی مدت در محیط کشت می باشد .

امروزه سرطان ریه دارای بالاترین آمار مرگ و میر در بین انواع سرطان میباشد لذا تشخیص زودهنگام آن از اهمیت ویژه ای برخوردار است. در پایان نامه حاضر نانوحسگر زیستی بر پایه نانوهیبرید گرافن اکسید-dna برای شناسایی جهش های حذفی عامل سرطان ریه ارائه شده است. در این روش، شناسایی جهش ها با استفاده از پروب dna نشاندار شده با fam و از طریق طیف سنجی فلوئورسانس انجام شده است.

بیماری سرطان سینه از بیماری های مهم جوامع انسانی خصوصا در بین زنان می باشد و تشخیص زود?هنگام این بیماری از اهمیت ویژه ای برخوردار است. روش های متداول برای شناسایی سرطان سینه پرهزینه و وقت گیر می باشد. لذا ارائه روش های ارزانتر وسریعتر مورد توجه ویژه ای قرار گرفته است? با ظهورعلم نانو فعالیت هایی در این زمینه صورت گرفته است. در پایان نامه حاضر، نانو حسگر زیستی بر پایه گرافن اکسید و dna برای شناسایی جهش های موجود در dna ?که باعث بیماری سرطان سینه می شود، ارائه خواهد شد. جهش های مورد بررسی بیشتر به صورت جهش های حذفی بوده و با استفاده از نانوهیبرید گرافن اکسید – dna جهش های مذکور شناسایی خواهد شد.

گیاه شابیزک یا آتروپا بلادونا، یک گیاه علفی چندساله است و مهمترین منبع اقتصادی برای بدست آوردن تروپان آلکالوئیدهای دارویی مانند هیوسیامین و اسکوپولامین در خانواده سلاناسه است. اسکوپولامین و پیش ساز آن، هیوسیامین دارای کاربرد پاراسمپاتولیتک و مهارکننده رقابتی استیل کولین هستند. در این پروژه اثر piriformospora indica، قارچ آندوفیت ریشه¬ و افزایش دهنده رشد گیاهان، بر رشد و تولید آلکالوئیدهای گیاهچه¬های شابیزک و سوسپانسیون سلولی آن بررسی شد. گیاهچه¬ها و سوسپانسیون سلولی شابیزک به مدت دوهفته با قارچ p. indica همزیست شده و سپس مقدار اسکوپولامین و آتروپین تولید شده به وسیله کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا ((hplc اندازه¬گیری شد. همچنین، بیان دو ژن مربوط به آنزیم¬های محدود کننده سرعت شامل پوترسین n-متیل ترانسفراز (pmt) و هیوسیامین 6-?- هیدروکسیلاز (h6h) با استفاده از rt-pcr بررسی شد. افزایش چشمگیری در پارامترهای رشد، مقدار تروپان آلکالوئیدها و بیان ژن دو آنزیم کلیدی درگیر در بیوسنتز تروپان آلکالوئیدها، شامل pmt و h6h، در مقایسه با نمونه¬های شاهد مشاهده شد. افزایش رشد و میزان آلکالوئیدهای مشاهده شده، هماهنگ با میزان افزایش بیان دو ژن اصلی بیوسنتز آلکالوئیدها بود. این نتایج نشان می¬دهد p. indica مقادیر آتروپین و اسکوپولامین گیاه شابیزک و سوسپانسیون سلولی آن را (تا چندین برابر) افزایش می¬دهد. قارچ p. indica می¬تواند در غیاب گیاه میزبان تکثیر شود و درنتیجه می¬تواند برای افزایش متابولیت¬های ثانویه و زیتوده در گیاه شابیزک بکار رود. مطالعه¬ی اخیر روشی موثر برای تولید صنعتی آتروپین و اسکوپولامین به وسیله¬ی کشت گیاه شابیزک در مقیاس وسیع و بدون استفاده از ریشه مویین در بیوراکتور، فراهم می¬کند.