سقط جنین گوسفندان از دیر باز یکی از بزرگترین مشکلات صنعت گوسفند داری نه تنها درکشور ما بلکه در اغلب کشورهای پرورش دهنده گوسفند بشمار می رود وهمه ساله باعث تحمیل خسارات سنگین اقتصادی بردامداران منطقه می گردد. کمپیلوباکتریوزکه در گذشته به ویبریوز معروف بوده، بعدازبروسلوز و لپتوسپیروز مهمترین عامل سقط جنین گوسفندان می باشد. زیرگونه های کمپیلوباکتر و بویژه کمپیلوباکترژژونای و فتوس بیشترین سقط جنین ها را در کشورهای دیگرایجاد کرده اند. هدف از اجرای این طرح بررسی میزان سقط جنین های کمپیلوباکتریایی در گوسفند داری های اطراف تبریز بوده است. بمنظور اجرای این پروژه تعداد132جنین سقط شده بهمراه جفت های مربوطه از مهرماه تااسفندماه سال1390از گوسفندداری های اطراف تبریز جمع آوری شده ودرمجاورت یخ به آزمایشگاه دانشکده ارسال گردید. در آزمایشگاه بعدازکالبدشکافی ازمحتویات شیردان ،کبد،کلیه ،طحال ،ریه، مغز وجفت نمونه برداری شده وتازمان اسخراج dna درفریزر20 - درجه سانتیگراد نگهداری شد. بعداز استخراج dna (accuprep genomic dna extraction kit, bioneer, s. korea) حضور ویا عدم حضورکمپیلوباکترهای مختلف (فتوس ، کولای وژژونای) توسط کیت تجاری بررسی شدند. براساس نتایج بدست آمده 12 نمونه( 09/9%) نسبت به کمپیلوباکترفتوس فتوس و2 نمونه(51/1%) نسبت به کمپیلوباکتر ژژونای واکنش مثبت نشان دادند. موردی از آلودگی جنین ها نسبت به کمپیلوباکتر کولای مشاهده نگردید. این گزارش اولین گزارش از سقط جنین های گوسفندی ایجاد شده بوسیله گونه های کمپیلوباکتریایی از تبریز می باشد.

سرطان در سگ ها به طور معمول رخ می دهد و نیازمند توجه فوری و قاطع دامپزشک می باشد. بدلیل پیشرفت در بهبود مراقبت های دامپزشکی، سگ ها تا سنین بالا زندگی می کنند که باعث شیوع بالای انواع سرطان ها در این زمان می شود. سرطان امروزه علت بیماری های منجر به مرگ در سگ ها به شمار می رود و به همین ترتیب اهمیت زیادی در جامعه بدست آورده است. فاکتورهای محیطی و ژنتیکی (آلودگی هوا، آلودگی آب، عوامل عفونی و پرتوهای یونیزه و غیریونیزه و بویژه هورمون ها و داروها، خطرات شغلی و فاکتورهای خطرساز مربوط به زندگی مثل رژیم غذایی) تاثیر زیادی روی وقوع زمان سرطان دارند. بنابراین امروزه تاکید بیشتری برروی توسعه یادگیری درباره فاکتورهای ژنتیکی و محیطی است که در سرطان های سگ سانان روی تغییرات سلولی و مولکولی تاثیر دارند. تومورهای پستان سگ سانان نصف تومورهای سگ های ماده را شامل می شود که تقریبا 50-40? از آنها به صورت بدخیم رخ می دهد، هدف از اجرای این طرح بررسی میزان موتاسیون های رخ داده در اگزون شماره یک از ژن p53در تومورهای بافت پستان سگ به روش واکنش زنجیره ای پلی مراز(pcr) و تعیین توالی آنها بوده است. بمنظور اجرای این پروژه تعداد 26 نمونه بلوک پارافینه شده بافت تومور پستانی مربوط به آرشیو بخش پاتولوژی دانشکده دامپزشکی تبریز، مورد استفاده قرار گرفت. لام های تهیه شده از بلوک های پارافینه، به وسیله دستگاه میکروسکوپ نوری olympus-ch30 (ساخت ژاپن)، مربوط به بخش پاتولوژی دانشکده دامپزشکی تبریز، به منظور تایید وجود تومور و تشخیص نوع تومور، مورد مشاهده قرار گرفتند و تصاویر مربوط به لام ها، بوسیله دوربین olympus dp12,u-tvo.5xc-2(japan). تهیه شد. پس از برش و استخراج dna به 2 روش جوشاندن و استفاده از کیت ژل سیلیکا و پس از ارزیابی غلظت dna موجود، با روش pcr و تعیین توالی dna مورد بررسی قرار گرفت. پس از تکثیر بخشی از ژن p53، محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز، تعیین توالی شد. این محصول با وزن حدود 500 جفت باز به روش 2طرفه سنجر تعیین توالی شد. نتایج سکانس کردن با استفاده از نرم افزارهای blast مورد جستجوی همانندی نوکلئوتیدی قرار گرفت. نتایج حاکی از شباهت بسیار زیاد توالی های بدست آمده با بخشی از ژن p53 ثبت شده در بانک جهانی ژن می باشد. توالی های بدست آمده به شکل in silico مورد ترجمه قرار گرفت و نتایج همانندی توالی اسیدهای آمینه، توسط نرم افزارهای موجود در سایت expasy مورد مقایسه قرار گرفت. در تمامی نمونه ها یک موتاسیون به شکل اضافه شدن یک توالی ممتد 27 اسیدآمینه ای در فاصله بین اسید آمینه های 30-57، مشخص شد.

بیماری لکوز انزوتیک گاو یک بیماری ویروسی در گاوهای بالغ است که مشخصه آن دگرگونی نئوپلاستیک لنفوسیت ها در بافت های لنفی بویژه عقده های لنفاوی است. شیوع عفونت در گله های گاوان بخصوص گاوهای شیری بالا است اما فقط تعداد کمی از این گاوان نشانه های ابتلاء به لنفوسارکوم را نشان می دهند. موتاسیون در ژن p53 نقش مهمی در پاتوژنز لکوز انزوتیک گاوان بازی می کند. مطالعات قبلی حاکی از آن است درگاو های آلوده به این ویروس، که نشانه های ابتلاء به تومور را نشان می دادند و تکثیر غیرعادی لنفوسیت های b را داشتند، ژن p53 جهش یافته بود اما در خون محیطی گاوهای سالم و نیز گاوهای حامل یا به ظاهر سالم، جهش در این ژن یافت نشد. در این پایان نامه برآن شدیم موتاسیون های رخ داده در اگزون شماره یک از ژن p53 را در گاوهای مبتلا به لکوز انزوتیک به روش زنجیره پلی مراز(pcr) مطالعه کرده و توالی آن را تعیین کنیم. بمنظور اجرای این پروژه تعداد 26 نمونه بلوک پارافینه مربوط به لنفوسارکوم گاو از آرشیو بخش پاتولوژی دانشکده دامپزشکی تبریز، مورد استفاده قرار گرفت. لام های تهیه شده از بلوک های پارافینه، به وسیله میکروسکوپ نوری مدل olympus-ch30 (ساخت ژاپن)، به منظور تایید وجود تومور، تشخیص نوع آن، تعیین اندازه لنفوسیت های توموری شده و تعیین درجه بدخیمی آن مورد مشاهده قرار گرفتند و تصاویر مربوط به لام ها، بوسیله دوربین olympus dp12,u-tvo.5xc-2(japan) تهیه شد. سپس استخراج dna این نمونه ها به 2 روش جوشاندن و استفاده از کیت ژل سیلیکا انجام شد و پس از ارزیابی غلظت dna موجود به وسیله الکتروفورز، تکثیر بخشی از ژن p53 با pcr انجام گرفت. محصول این واکنش با وزن حدود 500 جفت باز به روش 2طرفه سنجر تعیین توالی شد. نتایج سکانس کردن با استفاده از نرم افزارهای blast مورد جستجوی همانندی نوکلئوتیدی قرار گرفت. در بین نمونه های مورد مطالعه، ابتلاء 8 مورد از گاوان به لکوز آنزئوتیک از نظر هیستوپاتولوژیکی مورد تائید قرار گرفت. در بین لنفوسارکوم های تشخیص داده شده، ازنظر انتشار لنفوسیت های توموری، 7 مورد دارای الگوی انتشار diffuse، 1 مورد فولیکولار، ازنظر اندازه لنفوسیت ها، 4 مورد دارای لنفوسیت های بزرگ، 1 مورد لنفوسیت های کوچک، 3 مورد مخلوط لنفوسیت های بزرگ و کوچک، ازنظر هسته، 4 مورد دارای هسته شکافته و 4 مورد دارای هسته غیرشکافته و میانگین اندیس میتوز 125/2 بود. از 8 مورد ذکر شده، یک مورد دارای بدخیمی پائین و هفت مورد دارای بدخیمی متوسط بودند و درنهایت نوع لنفوسارکوم ها از نظر تشخیص نهایی یک مورد diffuse large noncleaved lymphosarcoma، سه مورد diffuse large cleaved، سه مورد diffuse mixed و یک مورد follicular small cleaved بود. نتایج مطالعه مولکولی حاکی از شباهت بسیار زیاد توالی های بدست آمده با بخشی از ژن p53 ثبت شده در بانک جهانی ژن بود. توالی های بدست آمده به تصویر in silico مورد ترجمه قرار گرفت و نتایج همانندی توالی اسیدهای آمینه، توسط نرم افزارهای موجود در سایت expasy مورد مقایسه قرار گرفت. در نمونه های کار شده هیچ جهشی در اگزون شماره یک از ژن p53 مشاهده نشد.

سقط جنین گوسفندان از دیر باز یکی از بزرگترین مشکلات صنعت گوسفند داری نه تنها درکشور ما بلکه در اغلب کشورهای پرورش دهنده گوسفند بشمار می رود و یکی از آرزوهای بزرگ دامپزشکان شناسایی و مقابله با عوامل ایجادسقط جنین می با شد. گونه های مختلف لپتوسپرا و بویژه لپتوسپیرا اینترروگانس مهمترین عامل سقط جنین در بین گله های گوسفند و بزدر کشور ما هستند . این بیماری مسری بوده و از طریق تماس با مواد دفع شده از رحم(از قبیل جنین، جفت و ترشحات رحمی) وادرار بسرعت در میان گله منتشر شده وباعث سقط جنین های گسترده می گردد. که این مسئله از یکطرف موجب ضرر اقتصادی و از طرف دیگر موجب انتشار بیماری در بین جمعیت انسانی می گردد. هدف از این بررسی عبارت از بر آورد صحیح از میزان سقط جنین های لپتوسپیرایی در بین گله های گوسفندی اطراف تبریز می باشد.در این مطالعه آینده نگردر اواخرفصل پاییز، بعداز آبستن شدن گوسفندان به دامداریها مراجعه و از آنان خواسته خواهد شد که در صورت مشاهده سقط جنین مراتب را به ما گزارش نمایند تا همزمان ازجفت و جنینها(محتویات شیردان،کبد،کلیه ها،طحال و ریه ها)نمونه برداری و از مادران سقط کرده خونگیری بعمل آید (حدود135 نمونه جنین بر اساس فرمول فیشر). سپس در آزمایشگاه برای تشخیص موارد سقط جنین لپتوسپیرایی از پروتکل pcr برای تشخیص گونه لپتوسپیرا اینترروگانس وازآزمایش matبرای تشخیص گونه های سرولوژیک لپتوسپیرا استفاده خواهد گردید. در نهایت نتایج حاصل از دو روش, باکمک نرم افزار spss version 16و روش آماری mcnemar مقایسه خواهد گردید.

تومور های پستانی، شایع ترین تومور های بدخیم در سگ های ماده بوده و پس از نئوپلاسم های پوست، دومین نئوپلاسم شایع در سگ ها محسوب می گردد. میزان موارد ابتلاء سالانه آن در دنیا در حدود000,100/198 تخمین زده می شود. رخداد کلی نئوپلاسم های پستان در سگ 4%-3% گزارش شده است. بر طبق اعلام سازمان بهداشت جهانی، تومورهای پستانی به 6 دسته کارسینوم، سارکوم، کارسینوسارکوم، تومورهای خوش خیم، تومورهای طبقه بندی نشده و دیسپلازی خوش خیم تقسیم بندی می شوند. فاکتور رشد شبه انسولینی نقش مهمی را در تنظیم رشد سلولی، تمایز و آپوپتوز دارا می باشد. این مولکول در تکامل و تنظیم بسیاری از بافت ها از جمله بافت پستانی دارای اهمیت بوده و ممکن است در فرایند سرطان زایی دارای نقش باشد. با عنایت به پژوهش های اندک در این مورد در کشور ما و سایر کشورهای جهان و نیز شیوع بالای تومور پستانی در سگ ها، این تحقیق با هدف بررسی بیان ژن گیرنده فاکتور رشد شبه انسولینی یک (igf-1r) در تومورهای پستانی خوش خیم و بد خیم و بافت حاشیه ای تومور صورت گرفت و در ضمن آن، رابطه این یافته ها با درجه بدخیمی تومورهای مورد مطالعه و سیمای هیستوپاتولوژیک آنها بررسی گردید. در این مطالعه، بررسی بیان ژن گیرنده igf-1r به روش ایمونوهیستوشیمی (ihc) بر روی بلوک های پارافینی انجام شد. ضمن آنکه در کلیه نمونه ها، بررسی های هیستوپاتولوژیک با استفاده از رنگ آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین و روش های رنگ آمیزی اختصاصی صورت گرفت. نتایج حاصل از مطالعه نشان داد که بیان متوسط گیرنده دارای اثر مثبت در پیش آگهی و میزان تمایز تومور می باشد.

زمینه و هدف: مطالعات زیادی اثر اسید¬های چرب را بر پارامتر¬های تولید مثلی در نشخوار کنندگان بررسی کرده¬اند. اسید¬های چرب قادرند به طور مستقیم در فولیکول نقش ایفا کنند و اثرات آن¬ها می-تواند برحسب نوع اسید چرب در دسترس بافت، تغییر کند. با این حال مطالعات کمی تأثیر لینولئیک اسید را بر رویان نشخوار کنندگان بررسی کرده است. از آن جایی که لینولئیک اسید، از لحاظ بیولوژیکی اسید چرب مهم و فعالی است و در محدوده وسیعی از فرآیند¬های تولید مثلی نقش دارد و تغییر در نسبت در دسترس بودن آن می¬تواند این فرآیند¬ها را تحت تأثیر قرار دهد، لذا هدف مطالعه حاضر بررسی اثرغلظت¬های مختلف لینولئیک اسید بر روی تسهیم و تکوین رویان¬های تولید شده در آزمایشگاه و هم چنین تأثیر آن بر روی بیان ژن bax به عنوان شاخص آپوپتوز می¬باشد. مواد و روش کار: تعداد 450 تخمدان گوسفند بالغ، بلافاصله بعد از کشتار، از کشتارگاه تبریز جمع آوری و در دمای 30 تا 40 درجه سانتی گراد، به آزمایشگاه انتقال داده شد. بعد از شستشوی تخمدان-ها، اووسیت¬های با دو لایه سلول کومولوس و بیش¬تر استحصال، و در آزمایشگاه جهت بلوغ آزمایشگاهی، در محیط بلوغ کشت داده شدند. اووسیت¬های¬ بالغ شده در گروه¬های تیماری به مدت20 ساعت با غلظت 50، 100 و 200 میکرومولار لینولئیک اسید و کنترل (لینولئیک اسید به محیط لقاح اضافه نشد) در محیط لقاح همراه با اسپرم تهیه شده از دام زنده، تیمار شدند. بعد از 20 ساعت، لقاح ارزیابی، و برای بررسی مراحل رشد و نمو و تکوین رویانی به مدت 48 ساعت در غلظت¬های مذکور لینولئیک اسید در محیط کشت sof کشت داده شدند. رویان¬ها جهت اندازه گیری بیان ژن bax، با استفاده از تکنیک rt real time pcr مورد بررسی قرار گرفتند. یافته¬ها: نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که میزان تسهیم در گروه کنترل بیش¬ترین، و در گروه تیمار شده با غلظت 200 میکرومولار لینولئیک اسید کم¬ترین بود، هر چند از لحاظ آماری تفاوت معنی داری مشاهده نشد. هم چنین میزان تسهیم به صورت وابسته به دوز لینولئیک اسید و با رابطه¬ای معکوس کاهش پیدا کرده بود، اما با وجود این کاهش، از لحاظ آماری معنی دار نبود. اگر چه میزان تکوین سلولی نیز همانند میزان تسهیم، از لحاظ آماری تفاوت معنی داری را نشان نداد، اما گروه کنترل بیش¬ترین و گروه تیمار شده با 200 میکرومولار لینولئیک اسید کم¬ترین تکوین به مرحله هشت را سلولی نشان دادند. هم چنین میزان بیان ژن bax در گروه تیمار شده با 200 میکرومولار لینولئیک اسید بیش¬تر از سایر گروه¬های تیماری بود. نتیجه گیری: مطالعه حاضر نشان داد که اضافه کردن لینولئیک اسید به محیط کشت اثرات منفی بر روی تکوین رویان گوسفند دارد، اگر چه نتایج حاصل از این مطالعه معنی¬دار نبود. این اثرات منفی در غلظت 200 میکرومولار بیش¬ترین و در غلظت¬های 50 میکرومولار و 100میکرومولار کم¬تر مشاهده شد. هم چنین لینولئیک اسید منجر به افزایش بیان ژن bax شد، که می¬تواند نشان دهنده تأثیر لینولئیک اسید بر آپوپتوز باشد.

پروتئین p53 که سرکوبگر تومور نیز نامیده می شود، داری سه نقش مهم: کنترل رشد سلول، مرگ برنامه ریزی شده سلول و ترمیم dna می باشد، نقص در پروتئین p53 در اثر موتاسیون ژن p53 (تششعات، مواد شیمیایی، ویروس ها) باعث ایجاد تومور می گردد. آدنوماتوز ریوی گوسفند که تحت عنوان جاگزیکت نیز شناخته شده است، یکی از بیماری های مزمن تنفسی است که با سرطانی نمودن یاخته های تنفسی به صورت پیشرونده، تمام ریه را درگیر می سازد. عامل ایجاد کننده آن، ویروسی از خانواده رتروویرس ها می باشد در این مطالعه جهش در اگزون هفت و هشت ژن p53 در آدنوماتوز ریوی بررسی شده است. روش کار: صد نمونه ریه ضبط شده از گشتارگاه صنعتی تبریز جمع آوری گردید، که یازده مورد از این ریه ها از طریق پاتولوژی آدنوماتوز ریوی تشخیص داده شد. در ادامه بلوک های مربوط به آدنوماتوز ریوی مثبت با استفاده از روش ایمنوهیستوشیمی به منظور مطالعه جهش در ژن p53 رنگ آمیزی گردید، که از این تعداد 6 مورد جهش در ژن p53 را نشان دادند. سپس برای بررسی جهش در اگزون 7 و8 ژن مورد نظر، dna بافتی استخراج گردید و بعد از pcr برای تعیین توالی به کمپانی بایونر کره جنوبی فرستاده شد. نتایج حاصل از تعیین توالی نشان دادند که هیچ گونه جهشی در اگزون 7 و8 ژن p53 در بیماری آدنوماتوز ریوی وجود ندارد. این اولین مطالعه برای بررسی ارتباط بین جهش در ژن )p53 اگزون 7 و8) و آدنوماتوز ریوی می باشد. مطالعات بیشتر باید برای بررسی ارتباط این ژن با آدنوکارسینوم ریوی صورت بگیرد.

در حیوانات گونه های کاندیدا از عوامل ایجاد بیماری های مخاطی و جلدی و در پاره ای موارد عفونت های سیستمیک هستند. همچنین کاندیدا آلبیکنس در بین گونه های کاندیدا شایع ترین گونه شناخته شده است. تاکنون از دیدگاه اپیدمیولوژی مولکولی مطالعات محدودی بر روی استرین های حیوانی انجام شده است و این در حالی است که تایپینگ مولکولی برای تعیین ساختار جمعیتی و اخذ تصمیمات صحیح در پیشگیری و درمان عفونت ها ضروری است. تعیین نوع 25s rdna از روش های مفید در تایپینگ و نیز تشخیص استرین های کاندیدا آلبیکنس بوده است. از طرفی توالی های نوکلئوتیدی تکراری (rps) مبنایی برای تعیین تنوع ژنتیکی در کاندیدا آلبیکنس می باشند و بر این اساس کاندیدا آلبیکنس را گروه بندی می کنند. همچنین برخی از پرایمرهای مورداستفاده قادر به تفکیک بین گونه کاندیدا آلبیکنس از سایر گونه های ازنظر ژنتیکی نزدیک به کاندیدا آلبیکنس نیز می باشد. تکثیر ژن 25s rdna به طور رایجی برای تایپینگ کاندیدا آلبیکنس مورداستفاده است و بر این اساس به 5 گروه اصلی تقسیم می شود. مواد و روش ها در این مطالعه از 27 نمونه کاندیدای جداشده از حیوانات سگ، گربه و اسب، گاو و پرندگان استفاده گردید. استرین های موردبررسی پس از تشخیص فنوتیپی اولیه با یک روش pcr-rflp مورد تائید قرار گرفتند. استخراج dna به روش فیزیکی –شیمیایی انجام گردید و سپس به منظور بررسی کیفیت استخراج، الکتروفورز شدند. در ابتدا قطعه its از rdna قارچ با واکنش pcr و با استفاده از جفت آغازگر its4-its1 تکثیر داده شد. الگوی هضم آنزیمی محصولات pcr با استفاده از آنزیم msp1 موردبررسی قرار گرفت. در مرحله بعد روش های تایپینگ مولکولی مورداستفاده قرار گرفت؛ و بر این اساس تکثیر ناحیه 25s rdna یا abc تایپینگ با پرایمرهای مشخص ca-int استفاده شد که درواقع قسمت قابل تغییر و جابجا شدنی از ناحیه اینترون rdna 25s را اندازه می گیرد. نتایج در مطالعه حاضر ژنوتایپ a با 40.7% رایج ترین ژنوتایپ به دست آمده بود و پس ازآن ژنوتایپ های e 22.5% و سپس b و c هرکدام 18.5% شیوع داشتند. از نکات مهم در نتایج تحقیق حاضر جداسازی تیپ e است. این ژنوتایپ یک گروه جدید در گروه بندی کاندیدا آلبیکنس با استفاده از تعیین تایپ 25s rdna است. از سوی دیگر با استفاده از روش rep-pcr با پرایمر as-i که قسمت های داخلی از نواحی alt مورد هدف قرار می گیرد، از 27 استرین موردبررسی 17 الگوی منحصربه فرد یا 17 ژنوتایپ به دست آمد. این الگوها بر اساس باندهای تشکیل شده در الکتروفورز محصول pcr مشخص گردید. ژنوتایپ های as1 و as2 از سایر ژنوتایپ ها رایج تر بودند. سایر ژنوتایپ ها از فراوانی مشابهی برخوردار بوده اند. بحث و نتیجه گیری نتایج حاصل از abc تایپینگ با نتایج به دست آمده از روش rep-pcr تطبیق داده شد و هم تراز گردید تا به یک الگوی ژنوتایپی با جزئیات بیشتر برسد. نهایتاً از 27 استرین موردبررسی 22 ژنوتایپ حاصل گردید که نشان می دهد این روش دارای قدرت تفکیک قابل توجهی برای بررسی اختلافات درون گونه ای است که از جنبه های مختلف حائز اهمیت است. جداسازی 22 ژنوتایپ مختلف از این نظر جالب توجه است که در حیوانات کمتر چنین نتایجی به دست آمده است. نتایج تحقیق حاضر، تنوع ژنتیکی در جمعیت کاندیدای جداشده از حیوانات را نشان می دهد و همانند مطالعات صورت گرفته در انسان، جمعیت هتروژن در کاندیدای جداشده از حیوانات نیز وجود دارد.