نام پژوهشگر: مرضیه وفا
جداسازی و کلونینگ ژن لیپاز باکتری bacillus.thermocatenulatus در مخمرpichia.pastoris
thesis
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زنجان
1387
مرضیه وفا علی حق نظری
مرضیه وفا علی حق نظری
در این تحقیق پس از استخراج dna ژنومی باکتری مولد لیپاز وتکثیر ژن بالغbtl2 با روش pcr، محصول pcr در وکتورpgem5 کلون گردید. سپس ژن btl2 از وکتور کلونینگ خارج و در وکتور بیانی pic9 تحت کنترل پروموتر الکل اکسیداز کلون شدهوسازه حاصل به درون e.coli انتقال داده شد.پس از تایید صحت کلونینگ پلاسمید نوترکیب با آنزیمbglii خطی شد و با الکتروپوریشن به مخمر انتقال داده شد. در نهایت مخمر پیکیا پاستوریس در محیط bmgy کشت داده شد و با متانل تولید آنزیم لیپاز القا گردید. وجود آنزیم در محیط کشت باتست پارانیتروفنیل پالمیتات و روش ایمونوبلات تایید شد.