نام پژوهشگر: سیده زینب موسوی ثانی

ساخت زیست حسگر dna بر مبنای نانوذرات طلا در تشخیص دورگه سازی و ساختار سه رشته ای dna
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه مازندران 1390
  سیده زینب موسوی ثانی   جهانبخش ریوف

در این پایان نامه، از الکترودهای خمیر کربن برهنه و اصلاح شده با نانوذرات طلا جهت تشخیص مستقیم پدیده ی دورگه شدن و سه رگه سازی dna استفاده شد. الکترودهای کارخمیر کربن و خمیر کربن اصلاح شده با نانوذرات طلا در بافر استات m 5/0 (8/4ph=) حاوی nacl با غلظت mm ?/??، با اعمال پتانسیلv 8/1 نسبت به ag|agcl|kcl (3m)، به مدت 5 دقیقه فعال سازی شدند و سپس اسید نوکلئیک تک رشته کاوشگر بر روی آن ها تثبیت شد و بدین ترتیب زیست حسگرهای الکتروشیمیایی dna تهیه گردید. پس از آن، علامت تجزیه ای اکسایش ذاتی بازهای گوانین به روش ولتامتری پالس تفاضلی آشکارسازی شد. پارامترهای آزمایشی نظیر زمان فعال سازی و پتانسیل فعال سازی الکترود کار و زمان و پتانسیل تثبیتdna ی کاوشگر در سطح الکترود خمیر کربن اصلاح شده با نانوذرات طلا بهینه شدند و سایر آزمایشات در شرایط بهینه انجام شدند. شدت علامت های بدست آمده از توالی های یکسان، در سطح الکترودهای خمیر کربن برهنه و اصلاح شده با نانوذرات طلا مقایسه شدند. این مقایسه نشان داد که حضور نانوذرات طلا سبب افزایش شدت علامت گشته است. در مرحله بعد برای مطالعه انتخابگری زیست حسگرهای الکتروشیمیایی تهیه شده، به dna ی هدف، توالی هایdna غیرمکمل به کار گرفته شد. علامت اکسایش گوانین قبل و بعد از دورگه شدن dna با توالی هدف مکمل و توالی های غیرمکمل درسطح الکترودهای مذکور بررسی شد و مشخص گردید که به واسطه دورگه شدن ضعیف dna با توالی های غیرمکمل، علامت تجزیه ای اکسایش گوانین پس از دورگه شدن افزایش چشمگیری نشان نمی-دهد. در حالیکه این افزایش بعد از دورگه شدن قوی dna با توالی هدف مکمل، قابل ملاحظه می باشد. بنابر این زیست حسگرهای الکترو شیمیائی تهیه شده، انتخاب پذیری خوبی به dna ی هدف نسبت به توالی های dna غیر مکمل نشان می دهند. حد تشخیص dna ی هدف تک رشته بر سطح الکترود خمیر کربن برهنه و خمیر کربن اصلاح شده با نانوذرات طلا برای دورگه سازی dna به ترتیب nm ???/? و pm ??/? محاسبه شد. در قسمت بعدی این کار، از الکترودهای خمیر کربن برهنه و اصلاح شده با نانوذرات طلا برای مطالعه پدیده سه رگه شدن dna استفاده شد. در این مطالعه، ولتامتری پالس تفاضلی به عنوان یک روش ساده و سریع الکتروشیمیایی مورد استفاده قرار گرفت. همچنین انتخابگری زیست حسگرهای الکتروشیمیائی تهیه شده به dna ی هدف دورشته ای نیز مطالعه گردید. حد تشخیص dna ی هدف دورشته ای در سطح الکترود خمیر کربن برهنه و خمیر کربن اصلاح شده با نانوذرات طلا برای سه رگه سازی به ترتیب nm?????/? و pm ????/? محاسبه شد.