نام پژوهشگر: ابوالفضل سرپله

تعیین گروه های سازگاری رویشی نژادهای fusarium oxysporum f.sp. melonis و مدیریت بیماری در ایران
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده کشاورزی 1390
  زهره کربلایی زاده استبرق   ابوالفضل سرپله

خربزه یکی از محصولات مهم جالیزی در ایران می باشد. بیماری های زیادی باعث کاهش محصول یا از بین رفتن این گیاه می شوند. یکی از بیماری های مهم این محصول، بیماری پژمردگی فوزاریومی خربزه می باشد که توسط (fom) fusarium oxysporum f.sp. melonis ایجاد می گردد. در این تحقیق به منظور شناخت ساختار جمعیتی fom، گروه های سازگار رویشی vegetative compatibility groups (vcgs) و نژادهای 48 جدایه از بیمارگر fom که از مناطق مختلف ایران جمع آوری شده بودند تعیین گردید. کارایی ترکیب تریانوم-پی (trianum-p) در کنترل بیولوژیکی بیمارگر و نیز امکان پیوند ارقام حساس خربزه بر روی پایه-های غیر میزبان مورد بررسی قرار گرفت. گروه های سازگار رویشی جدایه ها با استفاده از جهش یافتگان nit روی محیط حاوی کلرات تولید شده بودند تعیین گردید. گروه فنوتیپی جهش یافتگان، بر اساس نحوه رشد پرگنه آن ها روی منابع مختلف نیتروژن تعیین شد. از 91 جهش یافته nit 45/49 درصد متعلق به کلاس فنوتیپی nit 1، 17/24 درصد به کلاس فنوتیپی nit 3 و 88/20 درصد در کلاس فنوتیپی nit m قرار گرفتند. مقدار 5/5 درصد از جهش یافتگان nit در هیچ کلاس فنوتیپی قرار نگرفتند. به منظور تعیین گروه های سازگار رویشی، هر یک از جهش یافتگان با جهش یافتگان جدایه های استاندارد 0130-0136، روی محیط حداقل تلاقی داده شدند. جدایه ها در سه گروه سازگار رویشی 0130، 131 و 134 قرار گرفتند. بیشترین فراوانی جدایه ها مربوط به گروه سازگاری رویشی 134 و در گروه 131 کمترین تعداد جدایه ها قرار گرفت. ارتباطی بین نژاد و پراکنش جغرافیایی و نوع میزبانی که قارچ از آن جدا شده بود با vcg جدایه ها وجود نداشت. اثر آنتاگونیستی تریانوم-پی روی سه جدایهrace-1 ،race-1,2 و 479 قارچ fom مورد ارزیابی قرار گرفت. مکانیسم های آنتاگونیستی مختلف نظیر مایکوپارازیتیسم، قدرت رقابت تغذیه ای، قدرت کلونیزاسیون، تأثیر متابولیت های ترشحی خارج سلولی فرار و غیر فرار تریانوم-پی روی جدایه های این بیمارگر در محیط کشت pda مورد آزمایش قرار گرفت. مطالعات میکروسکوپی و ماکروسکوپی نشان داد که این ترکیب روی هر سه جدایه fom از طریق رفتارهای مایکوپارازیتیسم باعث اختلال رشد و بد شکلی ریسه شده است. این ترکیب در روش های کشت متقابل، ترکیبات غیر فرار و فرار نیز رشد عامل بیماری را به ترتیب به میزان 55/66، 61/34 و 85/32 درصد کاهش داد. در ارزیابی تأثیر ماده بیولوژیک تریانوم-پی روی نژادهای fom از سه روش افزودن سوسپانسیون تریانوم-پی به خاک، تیمار بذری به صورت پوشش بذر و ریشه گیاهچه استفاده گردید. این آزمایش به صورت تجزیه واریانس یک طرفه در پایه طرح کاملاً تصادفی و با سه تکرار برای هر تیمار در گلخانه انجام شد. کمترین شدت آلودگی 77/2 درصد بود. در آزمون افزودن تریانوم-پی به خاک در گلدان های آلوده شده با نژادهای 1 و 1,2، درصد گیاهان سالم به ترتیب 67/66 و 12/61 درصد در مقایسه با شاهد آلوده صفر درصد بود (p<0.05). در آزمون تیمار بذر با سوسپانسیون آنتاگونیست، درصد گیاهان سالم در تیمارهای مایه زنی شده با نژادهای 1 و 1,2 به ترتیب 45/69 و 89/63 بود. در آزمون تیمار ریشه گیاهچه که ریشه نشاگیاهچه ها با سوسپانسیون تریانوم-پی تیمار شده بودند در حضور نژادهای 1 و 1,2 بیمارگر 23/72 و 67/66 درصد از گیاهان بدون آلودگی باقی ماندند. در این مطالعه، اثرات پیوند یک رقم محلی خربزه بر روی کدوی تجاری t-101، در گلخانه مورد بررسی قرار گرفت. پس از کشت پایه و پیوندک در گلدان های محتوی خاک آلوده شده، پیوند به صورت حفره ای رأسی انجام شد. مشخص شد که پایه کدو، نسبت به این بیماری مقاوم است و پیوند ارقام محلی خربزه بر روی پایه های کدو می تواند برای کنترل پژمردگی فوزاریومی مورد استفاده قرار گیرد.

بررسی نقش مواد مترشحه قارچ monosporascus cannonballus در بیماری پوسیدگی ریشه و زوال بوته های خربزه
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه صنعتی شاهرود - پژوهشکده کشاورزی 1392
  بهنوش حسینی   ابوالفضل سرپله

در این تحقیق، مواد مترشحه عامل پوسیدگی ریشه و زوال بوته های خربزه monosporascus cannonballus (با وزن مولکولی زیر 10 کیلودالتون (lmwcs) و بالای 10 کیلودالتون (hmwcs)) با کشت قارچ روی محیط کشت مایع czapeck’sاستخراج گردیدند و به ترتیب با استفاده از الکتروفورز کاغذی با ولتاژ بالا (hvpe) و الکتروفورز ژل سدیم دودسیل سولفات- پلی آکریل آمید (sds-page) خالص سازی و با کمک massspectrometryتوالی هایپروتئینی کد کننده ی این مواد شناسایی گردید. مواد بالای 10 کیلودالتون روی ژل تشکیل سه باند با وزن های مولکولی تقریبی 26، 27 و 57 کیلودالتون را دادند که بر طبق نتایج توالی یابی دو باند 26 و 27 کیلودالتونی به دلیل شباهت بسیار آنها از نظر توالی اسید آمینه ای، ایزوزیم های آنزیم سرین پروتئاز و باند 57 کیلودالتونی به عنوان آنزیم آلفا- مانوزیداز شناخته شدند. آنزیم سرین پروتئاز باعث تجزیه کوتیکول دیواره سلولی میزبان می شود ولی تا کنون چگونگی مکانیسم بیماری زایی آنزیم آلفا- مانوزیداز شناخته نشده است. مواد زیر 10 کیلودالتون در hvpe در یک نقطه واکنش مثبت با رنگ ناین هیدرین نشان دادند و پس از خالص سازی ماده به دلیل کوچک بودن بیش از حد آن شناسایی صورت نگرفت اما به دلیل واکنش رنگی آن با ناین هیدرین، میزان حرکت نسبی آن در کاغذ (1 rm=)، فعالیت های بیولوژیکی از قبیل آب سوختگی به نظر می رسد که این ماده از ماراسمین ها (گروهی از ترکیبات فیتوتوکسینی) باشد. همچنین با تزریق این پروتئین ها و متابولیت ها به برگ های خربزه، خاصیت فیتوتوکسینی آنها به اثبات رسید و این اولین گزارش از وجود ترکیبات فیتوتوکسینی جداسازی شده از m. cannonballusاست که باعث بیماری زایی روی گیاهان خربزه می شوند. همچنین به منظور دست یابی به پایه های متحمل خربزه، کشت بافت گیاهان خربزه در محیط های کشت murashingeand skoog (ms) همراه با غلظت های متفاوت هورمون های 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-d)وbenzyl aminopurine (ba)و غلظت های متفاوت سکروتوم قارچی انجام وپس از حدود 7 هفته مشخص شد که در محیط کشت با ba(mg/l)0/1، 2,4-d(mg/l) 5 و عصاره قارچ 0/7 درصد مقدار کالوس زایی بیشتر استو می توان در این نوع محیط کشت به گیاهان مقاوم به قارچ m. cannonballus دست یافت.