نام پژوهشگر: اشرف میامیی

شناسایی هرپس ویروس تی÷ 1 گاوی در جنین‏های سقط شده گاو در استان خراسان رضوی به روش pcr
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده دامپزشکی 1390
  مطهره محمودی نیا   اشرف میامیی

هرپس ویروس گاوی تیپ 1 یکی از مهمترین پاتوژن های گاو می باشد که باعث خسارات اقتصادی مهمی در صنعت گاوداری می‏گردد .این ویروس یکی از عوامل مهم سقط محسوب می‏شود. سقط تنها بخشی از سندرم بزرگتر و پیچیده مرگ و میر جنین و نوزاد به شمار می رود و کمک گرفتن از آزمایش‏های تشخیصی جهت تشخیص قطعی علت سقط در گله‏های گاو ضروری می باشد. در ایران مطالعات سرولوژی محدودی در زمینه شناسایی bhv-1 صورت گرفته که نشان دهنده شیوع بالای آنتی بادی در گله‏های گاوی شیری می باشد.آزمون واکنش زنجیره ای پلیمراز روشی با حساسیت، ویژگی و سرعت بالا جهت شناسایی هرپس ویروس گاوی تیپ 1 در جنین‏های سقط شده می‏باشد. در این مطالعه شناسایی dnaهرپس ویروس گاوی تیپ 1 بوسیله آزمون واکنش زنجیره ای پلیمراز (pcr) بر پایه پرایمرهای ژن گلیکوپروتئینgb انجام شد. 277 جنین سقط شده گاو از گله های گاو خراسان رضوی جمع آوری شد. قطعه 468 جفت کیلو بازی از ژن bhv-1 در 19 نمونه (85/6 %) از جنین های سقط شده شناسایی شد. نتایج این مطالعه نشان داد که عفونت bhv-1 حضور قابل توجهی بعنوان یک عامل فرضی سقط در گله ‏های گاو استان خراسان رضوی دارد .

شناسایی آلودگی به لنتی ویروس های نشخوارکنندگان کوچک در جمعیت گوسفندان استان خراسان رضوی به روش الیزا
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده دامپزشکی 1391
  بهناز نوروزی   محمد عزیززاده

ویروس مایدی-ویزنا و ویروس تورم مفصل- التهاب مغز بزی در حال حاضر به عنوان لنتی ویروس های نشخوارکنندگان کوچک شناخته می شوند. هر دو ویروس سبب ایجاد بیماری های مزمن در دام می گردند. در گوسفند، عمدتا ویروس مایدی-ویزنا موجب بیماری به همین نام می گردد. گوسفند و بز تنها مخازن شناخته شده برای این بیماری ویروسی هستند. این پژوهش اولین مطالعه جهت بررسی شیوع سرمی بیماری در جمعیت گوسفند استان خراسان رضوی می باشد. تعداد 220 رأس گوسفند از 30 گله از 12 شهرستان در استان خراسان رضوی به روش نمونه گیری تصادفی خوشه ای انتخاب شدند. نمونه ی سرم خون این دام ها از نظر وجود آنتی بادی علیه ویروس مایدی-ویزنا/تورم مفصل-التهاب مغز بزی مورد آزمایش قرار گرفت. شیوع سرمی در گوسفند %5/34 (%7/40-%3/28:ci %95 ) بود. در تمامی شهرستان های مورد بررسی وجود آلودگی، در گوسفندان در دامنه ای بین 7/6 تا 2/72 درصد مشخص شد. در 26 گله ی (%8/98-4/74: ci %95؛ %6/86) مورد بررسی، حداقل یک نمونه سرمی مثبت یافت شد. در مدل رگرسیون لوجستیک، فقط سن دام ها ارتباط معنی داری را با شیوع سرمی بیماری مایدی-ویزنا نشان داد (p<0.05 ). با توجه به مسائلی چون مشکل بودن تشخیص درمانگاهی و سیر مزمن بیماری، عدم وجود واکسن و درمان موثر و خسارات اقتصادی هنگفتی که این بیماری ایجاد می کند، انجام مطالعات اپیدمیولوژیک بیشتر و ارائه راهکارهای پیشگیری و کنترل بیماری ضروری به نظر می رسد. نتایج این مطالعه، آلودگی نسبتاً بالا به لنتی ویروس های نشخوارکنندگان کوچک را در جمعیت گوسفندان این منطقه از کشور را نشان داد.

شناسایی آلودگی به هرپس ویروس اسبی-1 و هرپس ویروس اسبی -4در گونه های تک سمی شمال شرق ایران به روش real-time pcr
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده دامپزشکی 1392
  علی سارانی   غلامرضا محمدی

هرپس ویروسهای اسب، جزء پاتوژن های بسیارمهم در بین تمام اعضاء خانواده اکوئیده بوده و به علت ایجاد سندرم های مختلف و ایجاد فرم نهفته از چالش های مهم صنعت پرورش اسب می باشند. این ویروس ها دارای گسترش جهانی بوده و علاوه بر خسارات عمده اقتصادی در همه بخش های صنعت اسب سبب بر هم خوردن آسایش حیوان نیز می گردند. در پژوهش حاضر با توجه به اهمیت بیماری و ضرورت شناسایی دام های آلوده، اقدام به جستجوی هرپس ویروس اسبی 1 و4در جمعیت تک سمی های شمال شرق ایران با استفاده از یک تست تشخیصی مولکولی سریع و دارای حساسیت و ویژگی بالا شده است. نتایج حاصل از تعداد 308 نمونه خون اخذ شده از اسبها و سایر تک سمی های مناطق مختلف شمال شرق ایران نشان داده است که کلیه نمونه ها از نظر وجود هرپس ویروس اسبی 1منفی و 5/74 درصد از اسب ها و 8/14 درصد از سایر تک سمی های مورد مطالعه در این پژوهش واجد dna هرپس ویروس اسبی 4 بودند. در مدل آماری رگرسیون لوجستیک به روش گام به گام عقب گرد ، شاخص نژاد با مثبت شدن تست دارای ارتباط آماری معنی دار بوده است. نسبت شانس آلودگی به هرپس ویروس اسبی 4 در جمعیت اسب های خراسان شمالی2/3 برابر جمعیت اسب های خراسان رضوی برآورد شده است. علاوه بر این در مطالعه حاضر جنس ماده، اسب های با کاربری تولید مثلی ( سیلمی و مادیان مولد)، نژاد و سن از نظر آماری رابطه معنی داری را با مثبت شدن تست نشان داده اند.

شناسایی ویروسنیوکاسلبااستفادهاز روش haemadsorption- rt-pcr در مدفوع نمونه های کلینیکی مشکوک به نیوکاسل ولوژنیک ویسروتروپیک
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده دامپزشکی 1392
  نصراله رهبر   اشرف میامیی

بیماری نیوکاسل یکی از مهمترین بیماری های طیور می باشد که همه ی گونه های پرندگان را درگیر می کند. برای تشخیص این بیماری روش های زیادی در دسترس می باشد, علاوه بر جداسازی ویروس به عنوان استاندارد طلایی در تشخیص این بیماری, روش های تشخیص مولکولی نیز تست هایی قابل اطمینان اند. ممکن است بعد از بهبودی از بیماری گاهی تامدتها دفع ویروس رخ دهد. برای ردیابی ویروس در محیط اطراف مرغ های مادر, هچری, مزارع گوشتی و تخم گذار و تعیین حضور ویروس در مدفوع پرندگان زینتی و غیر زینتی موجود در قفس , بناچار نیازمند روشی برای تغلیظ ویروس باهدف جداسازی و تشخیص می باشیم. این مطالعه بگونه ای طراحی شد که با استفاده از رهیافتی جدید بر اساس یک حقیقت بیولوژیکی پذیرفته شده یعنی پدیده ی همادزورپشن ویروس نیوکاسل تغلیظ گردد. برای افزایش حساسیت تست rt-pcr از نمونه های مدفوع و محیطی به عنوان یک تکنیک غیر تهاجمی تصمیم گرفته شد برای تغلیظ ویروس از تست همادزورپشن استفاده گردد. طی سال 2013 میلادی (1391-1392 شمسی) از 50 گله ی گوشتی ارجاعی به بیمارستان تخصصی طیور ماد با علائم بالینی بیماری نیوکاسل , نمونه های بافتی و مدفوع اخذ گردید.نمونه های مغز, طحال و سکال تانسیل 4 جوجه از هر گله بصورت استریل اخذ گردید و مخلوط گشت. همزمان با نمونه های بافتی, نمونه های مدفوع همان جوجه ها جمع آوری و برای هر گله جداگانه مخلوط گردید. استخراج rna و تست rt-pcrمستقیما بر روی نمونه ای مدفوع و بافتی انجام گرفت. همچنین مقداری از نمو.نه های مدفوع نیز در فرایند همادزورپشن وارد گردیدند و مورد استخراج rna و تست rt-pcr قرار گرفتند. در تمام مراحل کار سعی شد از تخریب و آلودگی rna استخراج شده اجتناب شود. بخاطر شیوع گسترده ی نیوکاسل ولوژنیک در منطقه یک جفت پرایمر یونیورسال برپایه ی توالی های بدست آمده از مطالعات قبلی طراحی گردید و در این تست استفاده گردید.محصول rt-pcr با اندازه ی 384 جفت باز در 38 مورد از 50 نمونه ی بافتی تشخیص داده شد. در نمونه های مدفوعی که مستقیما مورد استخراج rna قرار گرفتند 18 مورددر تست rt-pcr مثبت گردیدند. در نهایت در نمونه های مدفوعی که مورد همادزورپشن قرار گرفته بودند 24 مورد از 50 نمونه ی مورد تست مثبت شدند. مجموعا در نمونه های بافتی , مدفوع و نمونه های مدفوع جذب شده باخون به ترتیب 76%, 36% و 68% بیماری نیوکاسل تشخیص داده شد. نتایج نشان داد که در تشخیص مولکولی و شاید جداسازی ویروس از نمونه های محیطی و مدفوع تغلیظ ویروس بوسیله ی فرایند همادزورپشن امکانپذیر است.

مطالعه سرمی ارتباط مهمترین عوامل ویروسی عفونت های تنفسی (bhv-1,bvdv,brsv,pi3,adeno3) با بیماری پنومونی آنزئوتیک گوساله در برخی از گاوداری های استان خراسان رضوی به روش الیزا
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده دامپزشکی 1388
  فاطمه رشخواری   غلامرضا محمدی

در این مطالعه عوامل ویروسی مسبب پنومونی گوساله های شیری (پنومونی آنزئوتیک)، در 9 گاوداری استان خراسان رضوی از مهرماه 1387 تا اردیبهشت 1388، مورد مطالعه قرار گرفت. از هر گله 5 گوساله بیمار، جهت معاینه انتخاب شده، و از هر گوساله در دو فاز بیماری (حاد و نقاهت) نمونه سرم، اخذ گردید. نمونه های سرم، به روش الایزای غیر مستقیم از نظر وجود آنتی بادی علیه ویروس های bhv-1 ، bvd ، brs ، pi3 ، bav-3 ، مورد بررسی قرار گرفتند. در بین 42 نمونه سرم اخذ شده، شیوع سرمی آنتی بادی برای ویروس های bhv-1 ، bvd، brs ، pi3 ، bav-3 ، به ترتیب، % 69 ، %6 /66 ، % 83/3 ، % 95/2 ، 88 درصد بود. رخداد افزایش عیار آنتی بادی برای ویروس های bvd ، brs ، pi3 ، bav-3، به ترتیب، % 11/9، % 16/6، % 26/1 ، 21/4 درصد بود، و در مجموع 52/3 درصد گوساله ها در مر حله دوم نمونه گیری، علیه یک یا چند ویروس ، افزایش عیار آنتی بادی را نشان دادند. بعلاوه هیچ تفاوت معنی داری بین شیوع سرمی آنتی بادی، علیه ویروس های مختلف و سایز گله وجود نداشت (p>0/05). بر طبق نتایج سرولوژی، ویروس های bhv-1 ، bvd، brs ، pi3 ، bav-3، عوامل بیماریزای شایع، در پنومونی گوساله های شیری، در گله های شیری استان خراسان رضوی، هستند.