نام پژوهشگر: غلامرضا مطلب

ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره گیاه پونه (mentha pulegium) توسط mae
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1391
  آرش سوزنگر   مسعود نجاتی

فعالیتهای اکسایشی یکی از علل مهم فساد شیمیایی مواد غدایی می باشد. یکی از ساده ترین روش ها برای کاهش اکسایش، استفاده از آنتی اکسیدان ها می باشد. در سال های اخیر توجه زیادی به سوی آنتی اکسیدان های طبیعی (استخراج شده از گیاهان) معطوف گردیده است. در این مطالعه میزان ترکیبات آنتی اکسیدانی عصاره پونه استخراج شده به روش مایکروویو و سنتی مقایسه گشت. میزان دفاع آنتی اکسیدانی عصاره پونه با استفاده از روش (2,2 diphenyl-1-picrylhydrazyl) dpph بر مبنای میزان مهار رادیکال آزاد و تفاضل سطح زیر پیک کروماتوگرام-های hplc تعیین گردید. در روش مایکروویو از 5/0 گرم گیاه پونه در 10 میلی لیتر از حلال های اتانول، متانول و آب استفاده گردید. پس از بهینه یابی نوع حلال، توان دستگاه مایکروویو، زمان استخراج و درجه حرارت استخراج بهینه گشت. در مقایسه عصاره حاصل از روش مایکروویو و سنتی مشاهده شد عصاره گیری به روش مایکروویو با متغیرهای بهینه بدست آمده، بازده بهتری برای مهار رادیکال های آزاد دارد. به منظور ارزیابی آماری نتایج از نسخه 15 نرم افزار spss جهت اجرای آنالیز واریانس استفاده شد که آنالیز واریانس اختلاف معنی داری بین عصاره گیری به روش مایکروویو و سنتی نشان نمی دهد ( p> 0.05). در عین حال میانگین میزان ترکیبات آنتی اکسیدانی عصاره استخراج شده به روش مایکروویو بیشتر از میانگین میزان ترکیبات آنتی اکسیدانی عصاره استخراج شده به روش سنتی است. بنابراین پیشنهاد می شود ارزیابی جامعتری از وضعیت آنتی اکسیدانی عصاره پونه به روش مایکروویو و همچنین اجزای موثره عصاره به روش gc-ms و بکارگیری آن ها در مدل های غذایی در آینده به عمل آید.

ارزیابی و مقایسه فعالیت آنتی اکسیدانی برگ و ساقه گیاه گزنه (urtica dioica) به روش mae
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1391
  محمدرضا لهراسبی دشتکی   مسعود نجاتی یزدی نژاد

آنتی اکسیدان ها ترکیباتی هستند که با داشتن حلقه های فنولی، باعث جذب رادیکال آزاد و مانع از اکسیداسیون، فساد و تغییر رنگ چربی ها می شوند. گیاهان دارویی، منابع غنی ترکیبات فنولی (اسیدهای فنولی، فلاونوئیدها و تاننها) هستند که از مهم ترین آنتی اکسیدان های طبیعی به شمار می آیند. فعالیت آنتی اکسیدانی ترکیبات فنولی گیاهان، عمدتأ به دلیل ویژگی های اکسایش-کاهش(redox) و ساختار شیمیایی آنهاست که می-توانند نقش مهمی در خنثی کردن رادیکال های آزاد، احیاء فلزات انتقالی و فرونشاندن(quenching) مولکول های اکسیژن فعال ایفا نمایند. این ترکیبات به طور موثر از واکنش رادیکال های آزاد دارای اکسیژن و نیتروژن فعال با بیومولکول ها(پروتئین، آمینواسید، لیپید و dna) جلوگیری کرده و منجر به کاهش آسیب و یا مرگ سلولی، بیماری های قلبی-عروقی، دیابت و سرطا ن ها می گردند. آنتی اکسیدان های موجود در رژیم غذایی، جهت حفظ سلامتی بدن حائز اهمیت هستند. تخریب ناشی از فعالیت این مولکولها، موجب بروز بیماری های مزمن می شود. در مطالعه حاضر، فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره های آبی، متانولی و اتانولی اندام های هوایی گیاه دارویی گزنه از منطقه قمصر کاشان بررسی می گردد. ابتدا استخراج عصاره با روش استخراج به کمک امواج ریزموج(mae) انجام می شود. سپس معرف شیمیایی 2،2-دی فنیل-1-پیکریل هیدرازیل(dpph) به عصاره ها افزوده شده و از روی میزان پیشرفت واکنش بین این عصاره ها و معرف مذکور، میزان فعالیت آنتی اکسیدانی آن ها تعیین می گردد. جهت پیگیری میزان پیشرفت واکنش، روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا(hplc) بکار گرفته می شود. پارامترهای موثر بر روی راندمان استخراج از قبیل توان دستگاه mae، نوع حلال استخراج کننده، درجه حرارت و زمان استخراج بررسی و بهینه خواهند شد. در نهایت با محاسبه میزان dpph باقیمانده در محلول، فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره ها مقایسه می گردد.

ارزیابی و مقایسه فعالیت آنتی اکسیدانی مغز و برگ درخت گردو (juglans regia) با استفاده از امواج فراصوت
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1392
  فرزانه رضامند پارسایی   مسعود نجاتی یزدی نژاد

رادیکال های آزاد و گونه های فعال اکسیژن و اثرات آنها بر سیستم های بیولوژیک، در سال های اخیر مشکلات زیادی را ایجاد کرده اند. این عوامل می توانند بطور برگشت ناپذیر به مولکول های حیاتی نظیر اسیدهای نوکلئیک، پروتئین ها، لیپیدها و لیپوپروتئین ها آسیب وارد نمایند. آنتی اکسیدان ها قادرند سیستم های بیولوژیک را در برابر این عوامل محافظت نمایند و نقش موثری بر سلامتی انسان ایفا کنند. به همین دلیل در مطالعه حاضر، فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره های الکلی و آبی مغز و برگ درخت گردو بررسی گردید. ابتدا عصاره گیری به کمک امواج فراصوت و نیز روش سنتی انجام شد. سپس معرف شیمیایی 2،2- دی فنیل- 1- پیکریل هیدرازیل (dpph) به عصاره ها افزوده شده و از روی میزان پیشرفت واکنش بین این عصاره ها و معرف مذکور، میزان فعالیت آنتی اکسیدانی آنها تعیین گردید. جهت پیگیری میزان پیشرفت واکنش، روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (hplc) بکار گرفته شد. مبنای کار، کاهش ارتفاع و سطح زیر پیک محلول استاندارد dpph پس از واکنش با آنتی اکسیدان است. به منظور بهینه سازی شرایط استخراج توسط امواج فراصوت، پارامترهای موثر بر راندمان استخراج از قبیل نوع حلال استخراج کننده، دما و زمان بررسی شدند. در نهایت، نتایج بدست آمده توسط نرم افزار spss مورد تحلیل آماری قرار گرفت. آنالیز واریانس (anova)، بیانگر آنست که بین روش های استخراجی اختلاف معنی داری وجود دارد (p<0.05).

شناسایی ژن آمینوپپتیدازn1 آنوفل استفنسی ناقل اصلی مالاریا:کاندیدی برای واکسن های بلوک کننده انتقال
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1392
  صادق شبانی   نوید دین پرست

مالاریا یکی از شایع ترین بیماری ها در سطح جهان است که سالانه 400 میلیون نفر به آن مبتلا شده که 5/1 میلیون نفر از آنها از بین می روند. واکسن های ممانعت کننده از انتقال، ابزارهای ارزشمندی برای ریشه کنی مالاریا هستند. آنتی بادی های پلی کلونال تولید شده بر علیه آنزیم آمینو پپتیداز n1 معده میانی این ناقل، قادر هستند تا از تکامل جنسی انگل پلاسمودیم فالسیپارم در معده میانی آنوفل گامبیه ممانعت کنند. در این مطالعه، ابتدا توالی نواحی کدکننده ژن آمینو پپتیداز n1 مربوط به آنوفل استفنسی با استفاده از پرایمرهای طراحی شده برای نواحی حفاظت شده و اگزون جانگشن شناسایی، و سپس قطعه های شناسایی شده کلون و توالی یابی شد. در این تحقیق 2059 نوکلئوتید از 3245 نوکلتوتید ژن آمینو پپتیداز n1 آنوفل استفنسی شناسایی شد که دارای شباهت بالغ بر 87 درصد با ژن مشابه در آنوفل گامبیه است. جایگاه فعال آنزیم (اسید آمینه227-216) در پستانداران از جمله انسان در این آمینو پپتیداز نیز حفاطت شده بود. موتیف gamen در موقعیت 359-355نیز در این آمینوپپتیداز حفاظت شده است که جهش در اسید آمینه گلوتامیک باعث غیر فعال شدن کامل آنزیم میشود. این توالی دارای موتیف اضافه تری به نام defensin نسبت به آنوفل گامبیه است که در سلول های حشرات و حیوانات خاصیت آنتی باکتریال دارند.این یافته برای اولین بار در جهان ثابت می کند که آمینو پپتیداز معده میانی یکی از آنوفل ها دارای خاصیت آنتی باکتریال است. بررسی بیوانفورماتیک، توالی حفاظت شده gaaggcatt را در این ژن شناسائی کرد که پروتئین های تولیدی توسط آن دارای خاصیت اپیتوپی بوده،که می تواند به پاراتوب های تولید شده به وسیله mhc i متصل شود که تائیدی بر کاندید بودن این ژن بعنوان واکسن می باشد.همچنین در این تحقیق نواحی از ژن آرستین و یکی از ژن های خانواده سرین ترئونین کیناز شناسائی شدند.آرستین در بویائی و مقاومت به سموم حشره کش نقش دارد از طرفی، سرین ترئونین کیناز ها در تکثیر ، تمایز و آپوپتوزیس سلول ها، چرخه انسولین وتخمک زایی پشه ماده نقش دارند. لذا با توجه به پراکندگی و ظرفیت انتقال آنوفل استفنسی (ناقل اصلی مالاریای منطقه خاور میانه تا خاور دور و چین) نتایج این طرح می تواند به منظور تولید یک tbv برای کلیه کشورهای منطقه ذکر شده کاربرد داشته یافته های این تحقیق می تواند برای سازمانهای بین المللی که در مبارزه و کنترل مالاریا نقش دارند،خصوصا who، ارزشمند باشد. واژگان کلیدی: آنوفل استفنسی ، آنزیم آمینو پپتیداز n1، واکسن ممانعت کننده از انتقال و بیماری مالاریا

غربالگری جهش های اگزون های 1 و 5 و 9 ژن پرومیلوسیتیک لوکمیا(pml )در بیماران مبتلا به آدنوکارسینومای معده به روش pcr-sscp
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم 1392
  منا جواهری   سوده غفوری فرد

زمینه و هدف: آدنوکارسینوم معده چهارمین نوع بدخیمی متداول در سراسر جهان و دومین عامل مرگ ومیر ناشی از سرطان در هر سال است. ترانسفورماسیون بدخیم سلول های معده نتیجه یک پروسه چند مرحله ای شامل تغییرات ژنتیکی و اپی ژنتیکی مختلف در ژن های بیشمار در ترکیب با فاکتور های مختلف و زمینه ژنتیکی میزبان است. بیان سرکوبگر تومور pml در کارسینوم معده کاهش یافته یا از بین رفته است و با سطح افزایش یافته تهاجم لنفاوی و پیشرفت tnm staging در ارتباط است. pml در پروسه های مختلف سلولی از جمله آپوپتوز، تعمیر dna آسیب دیده، تنظیم چرخه سلولی و پیری سلولی نقش دارد. در دنیا هیچ گونه مطالعه ای بر روی جهش های این ژن در بیماران مبتلا به آدنوکارسینومای معده انجام نگرفته است. روش بررسی: در این مطالعه ی توصیفی- آزمایشگاهی به شناسایی جهش در اگزون های1 و 5 و9 ژن pml در 50 بیمار مبتلا به آدنوکارسینومای معده در استان های تهران، اصفهان، مازندران، فارس و سیستان و بلوچستان پرداخته شد. dna از نمونه های بافت پارافینه تمام بیماران و نمونه های خون افراد سالم به روش استاندارد فنل- کلروفرم استخراج شد. اگزون های مورد بررسی توسط واکنش زنجیره ای پلیمراز (pcr) تکثیر شدند. سپس جهش های ژن pml با استفاده از روش pcr-sscp برای 3 اگزون، مورد بررسی قرار گرفتند. نمونه های مشکوک به وسیله ی واکنش تعیین توالی برای حضور هر نوع تغییر ژنی کنترل شدند. نتایج: با توجه به بررسی های انجام شده هیچ گونه جهشی در اگزون های 1 و 5 و 9 ژن pml این بیماران یافت نشد. بر اساس مطالعه ی حاضر، نتایج ما نشان دادند که جهش در این 3 اگزون ژن pml احتمالا سهم بسیار ناچیزی در بیماران آدنوکارسینومای معده دارد و اهمیت بالینی قابل توجهی در این بیماری ندارد. با این وجود با توجه به وسیع بودن ژن و دارا بودن 9 اگزون، مطالعه ی قسمت های دیگر ژن و همچنین طوایف و جمعیت های مختلف در سراسر کشور پیشنهاد می گردد. تحقیقات بیشتر نقش این ژن و رابطه اش با آدنوکارسینومای معده را تعیین می کند و اطلاعات ضروری را در مورد نقش این ژن در پیشبرد آدنوکارسینومای معده و طرّاحی استراتژی های درمانی بر اساس این ژن فراهم می آورد. واژگان کلیدی: آدنوکارسینومای معده- ژن pml – تکنیک pcr-sscp

بررسی تغییرات متیلاسیون پروموتر ژن her2 در سرطان پستان
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1392
  لیلا حسین زاده   مهتا مظاهری نایینی

سرطان پستان، شایع ترین سرطان در بین زنان و دومین عامل مرگ و میر بعد از سرطان ریه می باشد. این سرطان 32% کل سرطان های زنان را تشکیل می دهد. در کنار تغییرات ژنتیکی متعدد شناخته شده، تغییرات اپی ژنتیکی متعددی کشف شده اند که در فرایند تومورزایی در بافت پستان دخیلند و به تغییر پایدار در الگوی بیان ژن ها در سلول ها منجر و باعث ایجاد و پیشرفت بدخیمی می شوند. پروتوانکوژن her2 پروتئینی را رمزگذاری می کند که مسیرهای انتقال پیام درون سلولی مهمی را هدف قرار داده و نقش مهمی در رشد، تمایز، بقا و چسبندگی سلول ایفا می کند. این ژن توسط سازوکارهای مختلف ژنتیک و اپی ژنتیک مثل هایپرمتیلاسیون، غیرفعال می شود. هدف از این مطالعه ارزیابی میزان متیلاسیون پروموتر ژن (her2) و مشخص نمودن ارتباط احتمالی آن با برخی فاکتورهای پروگنوستیک در بیماران مورد مطالعه می باشد. 40 عدد نمونه از بافت پستان و خون بیماران مبتلا به سرطان پستان از نوع کارسینوم داکتال مهاجم، که به مرکز بیماری های پستان جهاد دانشگاهی مراجعه نموده اند و نیز 10 نمونه از خون و بافت افراد سالم مراجعه کننده به این مرکز، جهت استفاده به عنوان کنترل گردآوری شد. پس از استخراج dna از بافت و خون، غلظت آن توسط دستگاه اسپکتروفتومتر تعیین شده و نمونه های مناسب در فریزر°c 70- قرار داده شد. وضعیت متیلاسیون ژن هدف با استفاده از روش methylation specific pcr بررسی گردید. بعد از انجام الکتروفورز، تجزیه و تحلیل داده ها با استفاده از نرم افزارspss ver19 و انجام سه تست chi square وficher exact test برای متغیرهای دو حالته و kruskal wallis test برای متغیرهای سه حالته و نیز با سطح معنی داری p>0.05 استفاده گردید. پس از بررسی نمونه ها، 30% از نمونه های بافت و 30% از نمونه های خون هایپرمتیلاسیون نشان دادند. ارزیابی نتایج نشان داد که هایپرمتیلاسیون her2 با فاکتورهای مورد مطالعه ارتباط معنی داری ندارد. اما همانطور که انتظار می رفت با عدم بیان ژن her2 به عنوان یک فاکتور پیش آگهی دهنده ارتباط معنی داری (p=0.03) نشان داد، که خود، بیان کننده نقش بسزای متیلاسیون در غیرفعال سازی این ژن در بیماران ایرانی است.

مطالعه اثر جایگزینی فنیل آلانین 17 با سرین بر فعالیت آنزیمی لیپاز کایمریک باسیلوس ترموکاتنولاتوس
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم 1392
  سید حسینعلی خالقی نژاد   علی اصعر کارخانه

لیپازها (تری آسیل گلیسرول آسیل هیدرولاز ec 3.1.1.3 ) از مهم ترین آنزیم های صنعتی هستند که در صنایع مختلف از جمله صنایع غذایی، شوینده ها، تولیدات دارویی، چرم، پارچه، لوازم آرایشی، و کاغذ کاربرد دارند. لیپازهای باکتریایی عضوی از خانواده ?/? هیدرولازها هستندکه تری آسیل گلیسرول ها را در فاز بین آب-چربی هیدرولیز می کنند. لیپاز باسیلوس ترموکاتنولاتوس (btl2) نوعی لیپاز ترموآلکالوفیل است که در دمای 75-60 درجه سانتیگراد و ph برابر 10 -8 فعالیت می کند. این ویژگی ها باعث تبدیل این لیپاز به یک گزینه مناسب برای کارهای تحقیقاتی و همچنین کاربردهای صنعتی شده است. این پژوهش به بررسی اثر جایگزینی فنیل آلانین 17 با سرین بر فعالیت لیپاز کایمریک باسیلوس ترموکاتنولاتوس ( که کل توالی پنتا پپتیدی (ala-his-ser-gln-gly) ناحیه زانوی هسته دوست لیپاز باسیلوس ترموکاتنولاتوس با توالی پنتا پپتیدی (gly-glu-ser-ala-gly) ناحیه مشابه از لیپاز قارچ کاندیدا روگوزا جایگزین شده بود) می پردازد. بدین منظور ابتدا مطالعات بیوانفورماتیکی و پیشگویی ساختمان جهت بررسی اثر جایگزینی فنیل آلانین 17 با سرین بر ساختمان لیپاز انجام شد. سپس جهش مورد نظر با استفاده از روش جهش زایی در محل در ژن نوترکیب btl2 ایجاد شد. در مرحله بعد لیپاز btl2 جهش یافته در باکتری e.coli کلون و بیان شد. در پایان فعالیت آنزیمی لیپاز های کایمریک در حضور سوبستراهای مختلف اندازه گیری شد. همچنین اثر عوامل مختلف از قبیل دما، ph، دترجنت ها، حلال های آلی و یونهای فلزی بر روی فعالیت آنزیم مورد بررسی قرار گرفت. نتایج بدست آمده نشان داد که فعالیت آنزیمی لیپاز کایمریک جدید برای همه سوبستراهای بکاربرده شده به غیر از تری بوترین (4c) بیشتر از آنزیم کایمریک قبلی می باشد، همچنین جهش ایجاد شده، در بیشتر موارد مقاومت آنزیم کایمریک جدید را نسبت به عوامل بررسی شده از قبیل دترجنت ها، حلال ها و یونهای فلزی را افزایش داده است.

بررسی اثر عصاره آبی و الکلی عناب بر بیان ژن p53 در سلول های سرطانی تخمدان
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1392
  مریم غلامی   محمدرضا عابدینی

سرطان تخمدان از کشنده ترین بدخیمی های زنان است. این سرطان پنجمین سرطان شایع در بین زنان می-باشد. درمان اولیه سرطان تخمدان نتایج کلینیکی خوبی را نشان می دهد اما بیماران پس از مدتی به درمان مقاوم می شوند. امروزه مقاومت به شیمی درمانی سدی در برابر درمان موفق سرطان تخمدان به حساب می آید. بنابراین یافتن داروهایی موثرتر یا مکمل درمان، همراه با عوارض جانبی کمتر برای افزایش طول عمر این بیماران ضروری است. در دو دهه اخیر توجه محققین به داروهای گیاهی به عنوان عوامل ضد توموری و ضد-سرطانی بیشتر شده است. مطالعات انجام شده در رابطه با خواص درمانی عناب نشان می دهد که این گیاه دارای اثرات درمانی بسیار زیادی می باشد. مطالعات صورت گرفته بر روی چندین رده سلولی سرطانی نشان داده است که عصاره عناب به تنهایی یا همراه با دیگر ترکیبات گیاهی فعالیت ضد سرطانی دارد. ثابت شده است که پیشرفت تومور در نتیجه عدم تعادل بین تکثیر و مرگ سلولی، که از طریق سیگنال های مختلف و مسیر های آپوپتوزی تنظیم می شود، می باشد. ژن های مختلفی در تنظیم آپوپتوز شرکت دارند. p53 یکی از مهمترین تنظیم کننده های این فرایند می باشد. p53 نقش های متفاوتی از جمله تنظیم چرخه سلولی، القای آپوپتوز، نوترکیبی dna، تفکیک کروموزومی و پیری سلول دارد. امروزه p53 به عنوان ژنی شناخته شده است که نقش کلیدی در تمام انواع سرطان ها دارد و در 60 درصد سرطان های تخمدان جهش در این ژن مشاهده شده است. هدف از این مطالعه بررسی اثرات سیتوتوکسیک عصاره آبی و الکلی میوه عناب و بررسی تغییرات بیان ژن p53 در پاسخ به این ماده در سلول های ov2008 تخمدان بود. بدین منظور سلول های ov کشت شدند و پس از 24 ساعت کشت، سلول ها با غلظت های مختلف عصاره های آبی و الکلی عناب به مدت 24، 48 و 72 ساعت تیمار شدند. تاثیر عصاره ها بر حیات سلولی توسط آزمایش mtt بررسی شد. غلظت موثر تعیین شد و سلول ها برای استخراج rna کشت شدند. پس از استخراج rna و سنتز cdna، real-time pcr انجام شد. در نهایت آنالیز آماری و تفسیر داده ها انجام شد. نتایج mtt نشان داد که تنها عصاره آبی میوه عناب به صورت وابسته به زمان و غلظت به طور معنادار موجب کاهش حیات سلولی شده است (p<0.05) و عصاره الکلی تاثیر قابل توجهی بر روی حیات سلولی ندارد. نتایج rt-pcr نشان داد که بیان ژن p53 در زمان های 12 و 36 ساعت به طور معناداری افزایش یافته است (p<0.05). همچنین افزایش غلظت عصاره بر روی میزان بیان این ژن تاثیر معناداری نداشته است(p>0.05). امید است با شناخت مکانیسم های عمل این گیاه دارویی و طراحی داروهای نوین بتوان جلوی پیشرفت سرطان تخمدان را گرفت و به این ترتیب به افزایش طول عمر این بیماران در برابر این قاتل خاموش کمک کرد.

استخراج عصاره گیاه کلپوره به کمک امواج فراصوت و ارزیابی خاصیت آنتی اکسیدانی آن با استفاده از dpph
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم 1392
  صفیه یوسفی   مسعود نجاتی یزدی نژاد

رادیکال¬های آزاد و گونه¬های فعال اکسیژن و اثرات آنها بر سیستم¬های بیولوژیک، در سال¬های اخیر مشکلات زیادی را ایجاد کرده¬¬اند. این عوامل می¬توانند بطور برگشت¬ناپذیر به مولکول¬های حیاتی نظیر اسیدهای نوکلئیک، پروتئین¬ها، لیپیدها و لیپوپروتئین¬ها آسیب وارد نمایند. آنتی¬اکسیدان¬ها قادرند سیستم¬های بیولوژیک را در برابر این عوامل محافظت نمایند و نقش موثری بر سلامتی انسان ایفا کنند. به همین دلیل در مطالعه حاضر، فعالیت آنتی¬اکسیدانی عصاره¬های الکلی وآبی کلپوره بررسی گردید. ابتدا عصاره¬گیری به کمک امواج فراصوت و نیز روش سنتی انجام شد. سپس معرف شیمیایی 2،2- دی فنیل- 1- پیکریل هیدرازیل (dpph) به عصاره¬ها افزوده شده و از روی میزان پیشرفت واکنش بین این عصاره¬ها و معرف مذکور، میزان فعالیت آنتی¬اکسیدانی آنها تعیین گردید. جهت پیگیری میزان پیشرفت واکنش، روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا(hplc)بکار گرفته شد. مبنای کار، کاهش ارتفاع و سطح زیر پیک محلول استاندارد dpph پس از واکنش با آنتی-اکسیدان است. به منظور بهینه¬سازی شرایط استخراج توسط امواج فراصوت، پارامترهای موثر بر راندمان استخراج از قبیل نوع حلال استخراج کننده، دما و زمان بررسی شدند. در نهایت، نتایج بدست آمده توسط نرم¬افزار spss مورد تحلیل آماری قرار گرفت. آنالیز واریانس (anova)، بیانگر آنست که بین روش¬های استخراجی اختلاف معنی¬داری وجود دارد (p<0.05).

بررسی بیماری نکروزعصبی ویروسی(vnn)درکفال ماهیان دریای عمان و خلیج فارس (liza klunzingeri &mugil cephalous) به روش های هیستوپاتولوژی، سرولوژی(آنتی بادیهای درخشان) و میکروسکوپ الکترونی(tem)
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه سیستان و بلوچستان - دانشکده علوم پایه 1392
  ویدا سرابندی   جلیل ذریه زهرا

بیماری نکروز عصبی ویروسی (vnn)یک بیماری مهلک به ویژه درماهیان با ارزش اقتصادی است. این بیماری بیش از پنجاه گونه از ماهیان را تحت تأثیر قرار می دهد و حدود هفتاد گونه نیز به صورت حامل، فاقد علایم بالینی ولی دارای ویروس عامل این بیماری هستند. ماهیان مبتلا علایم بالینی از قبیل شنای مارپیچی، شنای نیزه ای، کم اشتهایی، تغییر در رنگدانه ها، تورم کیسه شنا، برگشتن بر روی پشت و شنای خوابیده بر پشت و خونریزی های زیرجلدی را نشان می دهند. در مطالعات میکروسکوپیک علایم اصلی یعنی واکوئولاسیون مغز، شبکیه چشم و نخاع مشاهده می گردد. در واقع سیستم عصبی مرکزی هدف اصلی این ویروس است. عامل ایجاد کننده این بیماری ویروسی از نوع بتانوداویروس و از خانواده نوداویریده می¬باشد. این بیماری قبلا از سراسر جهان به استثنای قاره آفریقا گزارش شده بود لیکن اخیراً از سواحل سنگال و لیبی گزارش های منتشر نشده ای وجود دارد و مقاله ای نیز از وقوع بیماری در تونس والجزایر دریافت شده است.با توجه به جداسازی ، شناسائی و تایید بیماری نکروز عصبی ویروسی در کفال ماهیان دریای خزر، شناسائی و جداسازی ویروس این بیماری در سواحل ایرانی دریای عمان و خلیح فارس برای دومین بار درکشور و در جهان صورت پذیرفت. در مطالعه حاضر برای بررسی ماهیان کفال دریای عمان و خلیج فارس از روش آسیب شناسی استفاده شد. در بررسی های صورت گرفته در این مطالعه مشخص شد که ردپای این بیماری در ماهیان مورد بررسی مشاهده می شود لیکن جهت تائید تشخیص نیاز به مطالعات تکمیلی و بررسی های بیشتر در آینده وجود دارد . نتایج این تحقیق و تحقیقات تکمیلی در آینده در کنترل ، پیشگیری و برنامه های اپیدمیولوژیک این بیماری در آینده شیلاتی کشور و منطقه می تواند بسیار حائز اهمیت باشد .

بررسی بیان ژن p53 در بیماران مبتلا به سرطان مری با استفاده از روش reverse transcriptase real- time polymerase chain reaction
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم 1393
  سمیه سنچولی   غلامرضا مطلب

سرطان مری با 386000 مرگ و میر در سال ششمین عامل مرگ ناشی از سرطان در جهان است، این سرطان مانند سایر سرطان ها حاصل مجموعه عامل های محیطی و تغییرات ژنتیکی است .شیوع سرطان مری در ایران بسیار بالاست. از این لحاظ بالاتر از سایر کشورها قرار داریم. میزان بروز جهش در ژن p53 در هر دو نوع سرطان مری (کارسینوم سلول سنگفرشی مری escc و آدنوکارسینوم مری eac ) بالا گزارش شده است. p53 یکی از شناخته شده ترین ژن های بازدارنده تومور است که در نیمی از تومور های انسانی موتاسیون پیدا کرده است ، از مهمترین پروتئین هائیست که در برابر آسیب های وارده به dna فعال می شود بنابراین به عنوان هدف مهمی برای تحقیقات شناخته می شود ، در این تحقیق بیان ژنp53که یکی از فاکتورهای مهم ایجاد سرطان مری است در بیماران مبتلا به سرطان مری در ایران مورد مطالعه قرار گرفت. 15 نمونه بافت پارافینه سرطان مری و 15 نمونه پارافینه سالم جمع آوری شده از مراکز مختلف پزشکی درمانی (زابل ، زاهدان ، کاشان ) جهت اندازه گیری بیان ژنp53 توسط روشreverse transcriptase real – time polymerase chain reaction آنالیز گردید. تمامی واکنش های pcr با سه تکرار برای ژنp53 و کنترل داخلی(b-actin) توسط متد(livac) انجام شد. تفاوت در بیان ژن هدف در بیماران و کنترل توسط روش t-test محاسبه شد. تمامی آنالیزها توسط نرم افزار spss انجام گرفت. نتایج نشان داد افزایش بیان ژن p53 در افراد بیمار نسبت به افراد سالم دارای اختلافی معنی دار بود. از سوی دیگر اختلاف معنی داری در بیان ژن p53 در جنس مذکر و مونث در دو گروه مشاهده نگردید. ) p>0.05 )

بررسی بیان انکوژن ras در بیماران مبتلا به سرطان مری
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1393
  عصمت ملاشاهی   مهتا مظاهری ناینئی

سرطان مری با حدود386000 مرگ و میر در سال، هشتمین سرطان شایع و ششمین عامل مرگ ناشی از سرطان در جهان است. کارسینومای مری در ایران احتمالا به علت عوامل ژنتیک و یا محیطی مختلف دارای شیوع بالائی می باشد. پروتئین های ras تحریک کننده های کلیدی رشد بسیار زیاد سلول ها برای غشای سلولی به هسته می باشند و عملکرد نادرست و اشتباه rasمنجر به رشد و توسعه بی نظمی فوق العاده و در نتیجه سرطان می شود. بیان انکوژن rasسرطان مری مورد مطالعه قرار گرفت. بدین منظور در استان سیستان و بلوچستان نمونه¬های (بلوک¬ها) پارافینه به تعداد 15 نمونه سرطانی و 15 نمونه افراد سالم از آرشیو بخش پاتولوژی بیمارستان امیرالمومنین زابل تهیه گردید و از روش real time-pcr جهت ارزیابی بیان ژن و از روش ??ct برای آنالیز داده¬ها استفاده شد. تمام واکنش¬های pcr در سه تکرار برای ژن¬های ras و کنترل داخلی بتا اکتین توسط متد (livac) 2-??ct انجام شد. تفاوت سطح بیان ژن هدف در بیماران و افراد سالم معنی دار نبود. بین بیان ژنras در دو گروه بیمار و سالم و همچنین زن ومرد اختلاف معناداری وجود نداشت.

بررسی بیان آنکوژن aeg-1 در بیماران مبتلا به سرطان مری با استفاده از روش rt-qpcr
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1393
  زهرا هاشمی باغی   غلامرضا مطلب

سرطان مری، یکی از تهاجمی¬ترین نوع سرطان دستگاه گوارش، شایع ترین علت مرگ و میر های مرتبط با سرطان درجهان است. بیشترین بروز سرطان مری در گروه سنی 70-50 سال رخ می دهد. همچنین فراوانی این بیماری در مردان بیشتر از زنان است. تحقیقات مختلف اثبات کرده است که آنکوژن astrocyte elevated gene-1 (aeg-1)، که همچنین mtdh و lyric نیز نامیده می¬شود) در چندین جنبه از پیشرفت تومور نقش اساسی بازی می¬کند. بیان یا تکثیر ژنومی این ژن می تواند به عنوان یک شاخص زیستی برای تشخیص زیر گروه¬هایی از بیماران که نیاز به درمان¬هایی پیشرفته تر و سودمندتر با هدف قراردادن aeg-1 دارند مورد استفاده قرار گیرد در این پژوهش، بیان ژن aeg-1در نمونه¬های بافت پارافینه سرطان مری در ایران مورد مطالعه قرار گرفت. پانزده نمونه بافت پارافینه سرطان مری جمع¬آوری شده از مراکز درمانی جهت اندازه گیری سطح بیان ژن aeg-1 توسط reverse transcriptase real-time polymerase chain reaction آنالیز گردید. تمام واکنش¬های pcr در سه تکرار برای ژن¬های aeg-1 و کنترل داخلی b-actin توسط متد (livac) 2-??ct انجام شد. تفاوت سطح بیان ژن هدف در بیماران و افراد سالم توسط روش t- test محاسبه و در سطح معنی داریp ? 0.05 معنی دارگردید. همه آنالیزها توسط نرم افزار spss 13 (spss, inc., chicago, il) انجام شد. نتایج نشان دهنده افزایش بیان ژن aeg-1 بود. از لحاظ آماری تفاوت معنی داری در بیان aeg-1 بین بیمار و کنترل برقرار بود (p<0.05).

بررسی بیان ژن گیرنده فاکتور رشد اپیدرمی در بیماران مبتلا به سرطان مری
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1393
  زهره میر   مهتا مظاهری نائینی

سرطان مری پس از سرطان معده دومین و سومین سرطان شایع در مردان و زنان ایرانی است و تخمین زده می شود که از 35000 مورد مرگ سالیانه ناشی از سرطان که در ایران اتفاق می افتد حدود 5800 مورد مرگ ناشی از سرطان مری می باشد . این سرطان به انواع گوناگونی تقسیم می شود که دو نوع کارسینوم سلول سنگفرشی مری (escc) و آدنوکارسینوم مری (eac) آن بسیار رایج است. اگر این سرطان درمان نشود می تواند به گره های لنفی، استخوان، کبد، ریه ها متاستاز داشته باشد.این سرطان مانند سایر سرطان ها، حاصل مجموعه عامل های محیطی و تغییرات ژنتیکی است که مطالعات مولکولی سرطان مری، ناهنجاری های ژنتیکی را در ژن های p53، p16،egfr ، cox-2، inos،htert ، p21، apc، c-myc، vegf، tgt?، nf-?b درeac وescc نشان داده اند . این ژن ها ممکن است برخی از انکوژن ها را فعال کنند، یکی از تغییرات بیولوژیک که ممکن است در سرطان مری موثر باشد جهش در انکوژن egfr است. این ژن نقش مهمی در بررسی پیش آگهی و پیشرفت مرحله بالینی بیماری دارد. بین سطوح بالای egfr در سرطان مری از نوع سنگفرشی و تهاجم به عروق و پیش آگهی ضعیف بیماری، ارتباط معنی دار گزارش شده است .تعیین اختلالات این ژن همچنین می تواند در میزان کنترل بیماری در مواردی که استفاده از آنتی بادی های علیه آن در درمان به کار گرفته شود نقش داشته باشد .در حال حاضر در کشورهای مختلف دنیا مطالعاتی برروی جهش های egfr در انواع سرطان ها با تعداد محدودی رده سلولی انجام شده است. بررسی این ژن از نظر ژنتیکی مخصوصاً در زمینه سرطان از اولویت خاصی برخوردار است، به طوری که امروزه در مطالعات ژنتیکی بررسی این ژن روش توصیه شده برای تعیین اختلال ژنتیکی در سرطان ها است و از آن در درمان بدخیمی ها استفاده می شود.

فراوانی ژن های fli c و alg d از ایزوله های بالینی پسودوموناس آئروژینوزا در شهرستان زابل
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1393
  اقدس اصغری حسامیه   محسن نجیمی

پسودوموناس آئروژینوزا پاتوژنی فرصت طلب است ویکی از عوامل مهم عفونت های بیمارستانی است و در طیف وسیعی از عفونت های دستگاه ادراری گرفته تا باکتریمی نقش دارد. این باکتری دارای فاکتورهای ویرولانس متعددی از جمله اگزوتوکسین a، آلژینات، لیپوپلی ساکارید، فلاژل، فسفولیپاز c، الاستاز و آلکالن پروتئاز می باشد. در این مطالعه فراوانی ژن های fli c وalg d از ایزوله های بالینی پسودوموناس آئروژینوزا بررسی شد. ایزوله های مربوطه با استفاده از روش بیوشیمیایی تعیین هویت شدند و در مرحله بعد dna استخراج شد. سپس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی برای هرکدام از ژن های فلاژلین و آلژینات حضور یا عدم حضور ژن های مربوطه با روش pcr مورد بررسی قرار گرفت. نتیجه گیری: در بررسی انجام یافته بر روی سویه های بالینی مشخص شد که 80 درصد از سویه های بالینی ژن fli cو 95 درصد ژن alg d را دارند. باتوجه به نتایج این مطالعه، می توان استنباط نمود که ژن های فلاژلین وآلژینات جز فاکتورهای ویرولانس باکتری پسودوموناس آئروژینوزا به حساب می آیند.

بررسی بیان ژن سایکلین d1 در بیماران مبتلا به سرطان مری
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم پایه 1393
  نصرت کشته گر   غلامرضا مطلب

سرطان مری ششمین سرطان مرگ آور و هشتمین سرطان شایع دنیا محسوب می شود. سالانه 386000 نفردر سراسر جهان در اثر ابتلا به این سرطان جان خود را از دست می دهند (1). در ایران سالیانه حدود 51000 مورد جدید سرطان رخ می دهد که بیشترین عضو درگیر از هر دو جنس دستگاه گوارش می باشد (38%) که حدود 6500 مورد آن سرطان مری است (2). طی مطالعات مختلف اعتیاد به تنباکو و الکل و همچنین مصرف کم میوه و سبزیجات از مهمترین ریسک فاکتورهای محیطی ابتلا به این سرطان معرفی شده اند (3-11). سرطان مری در مناطق جغرافیایی مختلفی از جمله نواحی شمالی ایران شیوع زیادی دارد (12). شیوع بالای escc در این مناطق جغرافیایی، وجود یک ریسک فاکتور محیطی مشترک و یا حضور الل های مستعد کننده ی مشترک میان این جمعیت ها را نشان می دهد. علاوه بر وجود این مناطق با شیوع بالا، مشاهده ی خانواده هایی که به صورت فامیلی مبتلا به سرطان مری شده اند نیز تاکید کننده ی دخالت عوامل ژنتیکی در ایجاد استعداد ابتلا به سرطان مری می باشد. مسلم است که سرطان مری نیز همانند سایر سرطان ها اتیولوژی بسیار پیچیده ای داشته و همواره می بایست علاوه بر توجه به نقش عوامل ژنتیکی مختلف و تاثیر ژن ها و جهش ها بر روی هم، به بر همکنش این عوامل ژنتیکی با فاکتورهای محیطی توجه نمود. سرطان مری با حدود386000 مرگ و میر در سال ششمین عامل مرگ و میر ناشی از سرطان در جهان است این سرطان به انواع گوناگونی تقسیم می¬شودکه دو نوع کارسینوم سلول سنگفرشی و آدنوکارسینوم مری آن بسیار رایج است. ناهنجاریهای ژنتیکی ما¬¬¬¬نند بیان بیش از حد ژنهای خاصی مثل سایکلین 1d در افزایش خطرسرطان مری نقش دارد. دراین تحقیق به بررسی بیان ژن سایکلین 1d در میزان بروز سرطان مری خواهیم پرداخت. آزمایشات بر روی 15 نمونه پارافینه شده که از بیماران مبتلا از مراکز مختلف درمانی کشور جمع آوری شده انجام خواهد گرفت این بررسی با استفاده از روش qpcr ارزیابی می¬شود. نتایج حاصل از آزمون های آماری نشان داد که افزایش بیان سایکلین 1d در مبتلایان به سرطان مری تاثیر دارد.

بررسی بیان ژن vegf در بیماران مبتلا به سرطان مری با استفاده از روش reverse transcriptase real- time polymerase chain reaction
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم پایه 1394
  حدیثه فرزان فر   غلامرضا مطلب

سرطان مری با حدود 386000 مرگ و میر در سال ، ششمین عامل مرگ ناشی از سرطان در جهان است. vegf ، یکی از مهمترین تنظیم کننده های اختصاصی رگ زایی است.ژن vegf در انواع مختلف سرطان مری جهش یافته است. این ژن در مقابل ایجاد جهش در dna وکمبود اکسیژن در تومور فعال شده و تومور به واسطه بیان زیاد این ژن ، رگزایی را آغاز کرده و کمبود اکسیژن خود را از دریافت اکسیژن از خون دریافت کرده و در نهایت متاستاز تومور را سبب می شود . این ژن در مقابل ایجاد جهش در dna وکمبود اکسیژن در تومور فعال شده و تومور به واسطه بیان زیاد این ژن ، رگزایی را آغاز کرده و کمبود اکسیژن خود را از دریافت اکسیژن از خون دریافت کرده و در نهایت متاستاز تومور را سبب می شود. بنابراین به عنوان هدف مهمی برای تحقیقات شناخته می شود. در این پژوهش بیان ژن vegf ، که در60 -30 درصد از بیماران مبتلا به سرطان مری تظاهر می یابد و به عنوان فاکتور مهم در ایجاد سرطان مری و متاستاز آن بشمار می آید در ایران مورد مطالعه قرار گرفت. آنالیز بر روی 15 نمونه بافت پارافینه سرطان مری و 15 نمونه پارافینه سالم گرد آوری شده از مراکز مختلف پزشکی درمانی (زاهدان، کاشان) با هدف اندازه گیری بیان ژن vegf، توسط روش reverse transcriptase real – time polymerase chain reaction انجام گرفت. واکنش های pcr با سه تکرار برای ژن vegf و کنترل داخلی (? - actin ) توسط متد livac 2 -??ct برای تمامی نمونه ها انجام شد و با استفاده از روش t-test تفاوت در بیان ژن هدف در بیماران و کنترل محاسبه گردید. تحلیل های آماری این پژوهش توسط نرم افزار spss انجام گرفت.

بررسی بیان ژن inos در بیماران مبتلابه سرطان مری با استفاده از روشreverse transcriptase real - time polymerase chain reaction
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم 1394
  رمینا بارانی   غلامرضا مطلب

سرطان مری ec به عنوان یک دغدغه سلامت عمومی در سطح جهانی است، این سرطان با حدود 386000 مرگ ومیر در سال ششمین عامل مرگ ناشی از سرطان در جهان است، که حاصل مجموعه عامل های محیطی مانند دود تنباکو، رفلاکس معدی- مروی و تغییرات ژنتیکی است. inos بر اثر عوامل مختلف التهابی بیان می گردد و به همین دلیل نوع القایی nos نامیده می شود. تنظیم بیان آن در سطح ژن صورت گرفته ومیزان بیان آن ارتباط مستقیمی با تولید بالای no دارد. بررسی بیان inos ابزار قدرتمندی برای درک شاخص های مولکولی موثر در پاسخ های بافتی و سلولی به عوامل خارجی است. دراین تحقیق بررسی بیان ژن inos در بیماران مبتلا به سرطان مری در ایران مورد مطالعه قرار گرفت 15 نمونه بافت پارافینه سرطان مری ffpe و 15 نمونه ffpe سالم جمع آوری شده از مراکز مختلف پزشکی درمانی (زابل، زاهدان، کاشان( جهت اندازه گیری بیان ژن inos توسط روش reversese transcriptase real – time polymerase chain reactionآنالیزگردید. تمامی واکنش های pcr با سه تکرار برای ژن inosوکنترل داخلی (β-actin) توسط متد (livac) 2-δδctانجام شد. تفاوت در بیان ژن هدف در بیماران وکنترل توسط روشt-test محاسبه شد. تمامی آنالیزها توسط نرم افزار spssانجام گرفت. نتایج نشان داد که اختلاف معنی داری بین بیان ژن inosدر دو گروه بیمار وکنترل وجود نداشت (p>0.05) ولی در گروه بیمار بیان ژن inos افزایش یافته بود. از سوی دیگر اختلاف معنی داری بین بیان ژن inos بین مردان و زنان در دو گروه بیمار و سالم وجود داشت و در زنان نسبت به مردان بیشتر بود(p< 0.05). مطالعات بیشتر نیاز دارد در حجم نمونه بزرگتر و جمعیت های دیگر برای تایید این یافته انجام گیرد.

بررسی بیان ژن پروستاگلاندین اندوپروکسید سنتتاز 2 (cox-2) در سرطان مری
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم 1393
  سمانه کیقبادی   حمیدرضا میری

سرطان سومین عامل مرگ در ایران است و سالانه حدود 30 هزار نفر در ایران بر اثر ابتلا به انواع سرطان جان خود را از دست می دهند. سرطان مری یا esophagus cancer در بین سرطان ها رتبه ششم از نظر شیوع و از نظر مرگ و میر در رتبه نهم سرطان ها دارد. هدف از این مطالعه ارزیابی بررسی بیان ژن پروستاگلاندین اندوپروکسید سنتتاز 2 (cox-2) در سرطان مری می باشد. cox ها (cyclo-oxygenases)، cox-1و cox-2، آنزیم های نظارتی کلیدی دخیل در تولید پروستاگلاندین ها و دیگر پروستانوئیدها هستند. پروستاگلاندین ها عوامل واسطه ای مهم در فرآیندهای مختلف طبیعی بیولوژیکی از جمله عملکرد سیستم ایمنی و زیست شناسی تولید مثل به شمار می روند. بیان اغراق آمیز cox-2 دارای پیامدهای قابل توجهی است که مختص بافت می باشند و با بیماری های التهابی، سرطان و بیماری های شروع دوره و زایمان زودرس نیز در ارتباط است، به این ترتیب cox-2 یک هدف مهم برای مداخله دارویی است. در این تحقیق بیان ژن cox-2در بیماران مبتلا به سرطان مری در ایران مورد مطالعه قرار گرفت 15 نمونه بافت پارافینه سرطان مری و 15 نمونه پارافینه سالم جمع آوری شده از مراکز مختلف پزشکی درمانی )زابل و کاشان ( جهت اندازه گیری بیان ژن cox-2توسط روش reverse transcriptase real – time polymerase chain reaction آنالیز گردید. تمامی واکنش های pcr با سه تکرار برای ژن cox-2و کنترل داخلی(b- actin) توسط متد(livac) 2-??ctانجام شد. تفاوت در بیان ژن هدف در بیماران و گروه کنترل با استفاده از مدل pfaffl و آزمون مقایسه میانگینanova توسط نرم افزار spss16 انجام گرفت. نتایج نشان داد افزایش معنی داری در بیان ژن پروستاگلاندین اندوپروکسید سنتتاز 2 (cox-2)در بافت های سرطانی مری نسبت به نمونه های شاهد وجود داشت. همچنین اختلاف معنی داری در بیان ژن cox-2 بین دو جنس زن و مرد در دو گروه سالم و بیمار نشان نداد.