نام پژوهشگر: فرهاد فرخی اردبیلی

تاثیر نوع رقیق کننده و زمان تعادل بر روی پارامترهای حرکتی اسپرم گاومیش قبل و بعد از انجماد توسط casa
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه 1390
  فرزاد فرجی   فرهاد فرخی اردبیلی

در طی چند سال اخیر رقیق کننده های تجاری بر پایه لسیتین سویا برای انجماد منی دام ها در دسترس قرار گرفته اند. آندرومد و بایوکسل دو نوع از این رقیق کننده ها می باشند که در بز، گوسفند و گاو مورد استفاده قرار گرفته اند. هدف از مطالعه حاضر ارزیابی تاثیر دو رقیق کننده بایوکسل و آندرومد در دو زمان تعادل 4 و 20 ساعت برروی پارامترهای حرکتی اسپرم گاومیش بود. نمونه منی با استفاده از واژن مصنوعی از 4 راس گاومیش نر جمع آوری و پس از ارزیابی اولیه و داشتن کیفیت مناسب در دو رقیق کننده بایوکسل و آندرومد به میزان 60 میلیون در هر میلی لیتر رقیق شدند. نمونه های رقیق شده تا دمای 4 درجه سانتی گراد سرد گردیده و سپس در پایوت های 5/0 میلی لیتری پر شدند. در هر رقیق کننده نیمی از پایوت ها پس از چهار ساعت و نیمی پس از 20 ساعت زمان تعادل منجمد گردیدند. از هر رقیق کننده پس از هر زمان تعادل (قبل از انجماد) دو پایت تا 37 درجه سانتی گراد گرم شده و سپس از لحاظ تحرک اسپرم ها مورد ارزیابی قرار گرفتند. نمونه های منجمد نیز ابتدا برای مدت 45 ثانیه در آب 37 درجه سانتی گراد ذوب و سپس مورد ارزیابی قرار گرفتند. تحرک اسپرم ها با استفاده از سیستم آنالیز کامپیوتری اسپرم (casa) ارزیابی و پارامترهای تحرکی اسپرم شامل vcl، vap، vsl، alh، bcf، lin و str محاسبه گردیدند. با استفاده از این پارامترها اسپرم ها به چهار رده a (متحرک با حرکت پیشرونده)، b (متحرک بدون حرکت پیشرونده)، c(دارای حرکت کتد) و d (بدون حرکت) تقسیم شدند. پس از طی زمان تعادل و قبل از انجماد تمامی پارامترهای سرعتی اسپرم (vap,vsl و vcl) در بایوکسل نسبت به آندرومد و در ساعت تعادل 4 نسبت به زمان تعادل 20 بطور معنی داری بیشتر است. در پارامترهای مربوط به الگوی حرکتی اسپرم ها (str و lin) نیز هرچند در بین دو زمان تعادل اختلاف معنی دار وجود نداشت ولی هر دوی این پارمترها در رقیق کننده بایوکسل بطور معنی داری بیشتر از آندرومد بود. درصد اسپرم های دارای حرکت پیشرونده (رده a) نیز در منی رقیق شده در بایوکسل بیشتر از آندرومد و در زمان تعادل 4 ساعت بیشتر از 20 ساعت بود. در نمونه های منجمد و ذوب شده میانگین vsl اسپرم ها در بایوکسل بطور معنی داری بیشتر از آندرومد بود ولی در سایر سایر پارامترها تفاوت معنی داری بین منی منجمد شده در بایوکسل و آندرومد مشاهده نگردید. از لحاظ تاثیر زمان تعادل نیز پارامترهای سرعتی (vap,vsl, vcl) در اسپرم هایی که پس از 4 ساعت زمان تعادل منجمد شده بودند بطور معنی داری بیشتر از اسپرم هایی بود که پس از 20 ساعت زمان تعادل منجمد شده بودند. اسپرم های رده a در منی منجمد شده در بایوکسل بطور معنی داری بیشتر از منی منجمد در آندرومد و در نمونه های منجمد شده پس از 4 ساعت زمان تعادل بیشتر از نمونه های منجمد شده پس از 20 ساعت زمان تعادل بود. در صورتیکه درصد اسپرم های رده b در گروه بایوکسل کمتر از آندرومد و در گروه 4 ساعت زمات تعادل بیشتر از گروه 20 ساعت بود. بر اساس نتایج این تحقیق کیفیت تحرک قبل و بعد از انجماد اسپرم ها درمنی رقیق شده در بایوکسل بهتر از آندرومد و بود و در زمان تعادل 4 ساعت بهتر از زمان تعادل 20 ساعت بود. کلمات کلیدی : بایوکسل، آندرومد، زمان تعادل، گاومیش، کاسا

بررسی تأثیر تزریق داخل تخم مرغی سطوح مختلف نیتریت بر رشد و توسعه جنین، جوجه درآوری، کیفیت جوجه یکروزه و برخی از فراسنجه های خونی جوجه های تازه هچ شده
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - پژوهشکده کشاورزی 1391
  المیرا محمدی   فرهاد فرخی اردبیلی

در این مطالعه، اثر تزریق داخل تخم مرغی سطوح مختلف 0 ،042/0، 084/0 و 168/0 میلی گرم نیتریت سدیم به ازای هر تخم مرغ بر رشد و توسع? جنین و بعضی از فراسنجه های خونی جوجه های تفریخ شده بررسی شد. تزریق نیتریت سدیم تأثیری بر کیفیت جوج? یکروزه، درصد جوجه درآوری و مرگ و میر و همچنین وزن اندام های قلب و کبد نداشت (05/0<p). اما وزن جوجه های حاصل از تخم مرغ های تزریق شده با نیتریت سدیم پایین تر از وزن جوجه های حاصل از تخم مرغ های شاهد بود (05/0>p). همچنین پروتئین تام خون جوجه های تفریخ شده از تخم مرغ های تزریق شده با نیتریت سدیم کمتر از مقدار مربوط به جوجه های شاهد بود (05/0>p). تفاوت معنی داری بین جوجه های تیمارهای مختلف برای کلسترول، تری گلیسرید، هماتوکریت و هموگلوبین خون مشاهده نشد (05/0<p). همچنین فعالیت آنزیم های سوپراکسید دیسموتاز وگلوتاتیون پراکسیداز تحت تأثیر تیمارهای آزمایشی قرار نگرفت (05/0<p). میزان مالون دی آلدئید خون جوجه های تزریق شده با 084/0 میلی گرم نیتریت سدیم بیشتر از گروه شاهد و جوجه های حاصل از تخم مرغ های تزریق شده با 042/0 میلی گرم نیتریت سدیم بود (05/0>p). همچنین ظرفیت کل آنتی اکسیدانی خون جوجه های تزریق شده با 042/0 و 168/0 میلی گرم نیتریت سدیم در مقایسه با جوجه های گروه شاهد پایین تر بود (05/0>p). به طور کلی تزریق داخل تخم مرغی نیتریت سدیم تأثیری بر کیفیت جوجه، جوجه درآوری، مرگ و میر و کلسترول کل، تری گلیسرید، هماتوکریت و هموگلوبین و فعالیت آنزیم های سوپراکسید دیسموتاز وگلوتاتیون پراکسیداز خون جوجه های تفریخ شده نداشت ولی وضعیت ظرفیت آنتی اکسیدانی و پروتئین خون این جوجه ها را کاهش می دهد و در نتیجه منجر به افزایش مالون دی آلدئید خون می گردد که در نهایت کاهش وزن بدن بدن جوجه های تفریخ شده را باعث می شود.

تأثیر نوع رنگ آمیزی، نوع رقیق کننده و انجماد بر مورفومتری سر اسپرم گاومیش با استفاده از سیستم آنالیز کامپیوتریcasa
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی 1391
  سحر بابایی   فرهاد فرخی اردبیلی

مورفولوژی غیر طبیعی اسپرم یکی از نشان دهنده های مهم کاهش باروری می باشد. با استفاده از سیستم casa می توان مورفومتری اسپرم را با سرعت و دقت بیشتری انجام داد. دقت مورفومتری اسپرم توسط casa تحت تأثیر روش های آماده سازی اسپرم ها قرار دارد. مطالعه حاضر با اهداف زیر انجام گرفت.: 1-ارزیابی تأثیر نوع رنگ آمیزی(دیفکوئیک، هماتوکسیلین) بر ابعاد سر اسپرم گاومیش 2- ارزیابی تأثیر نوع رقیق کننده (بدون رقیق کننده، بایوکسل و آندرومد) بر ابعاد سر اسپرم گاومیش 3- بررسی اثر انجماد بر ابعاد اندازه گیری شده اسپرم گاومیش 4- مقایسه ابعاد سر بین اسپرم های زنده و مرده. در مرحله اول و دوم نمونه های منی از 4 رأس گاومیش با استفاده از واژن مصنوعی جمع آوری شده و پس از رقیق سازی به وسیله محلول pbs، بایوکسل و آندرومد با روش دیفکوئیک و هماتوکسیلین رنگ آمیزی شدند. مورفومتری اسپرم ها با میکروسکوپ متصل به casa (sperm 2.1, video test, russia) و با بزرگنمایی× 100 انجام گرفت. از نمونه منی هر گاومیش حداقل 100 اسپرم توسط نرم افزار شناسایی شده و پارامترهای مختلف سر آنها شامل میانگین طول(mµ)، عرض(mµ)، عدم تقارن(rel.unit)، کشیدگی سر(rel.unit)، بیضوی بودن سر(rel.unit) محاسبه گردید. در مرحله اول آزمایش ارزیابی ابعاد مورفومتریکی سر اسپرم نشان داد که اختلاف معنی داری در بین روش های رنگ آمیزی وجود دارد(p<0.05). بزرگترین ابعاد سر در اسپرم های رنگ آمیزی شده با دیفکوئیک و کمترین آن در اسپرم های رنگ آمیزی شده با هماتوکسیلین مشاهده گردید. در مرحله دوم آزمایش، ارزیابی ابعاد مورفومتریکی سر اسپرم نشان داد که هیچ گونه اختلاف معنی داری بین رقیق کننده ها وجود ندارد(p>0.05). در مرحله سوم آزمایش نمونه های منی بعد از جمع آوری ابتدا 20 ساعت زمان تعادل را در رقیق کننده بایوکسل و آندرومد طی کردند سپس منجمد شدند. نمونه های منجمد، ذوب شده و با دو روش رنگ آمیزی(دیفکوئیک و هماتوکسیلین) رنگ آمیزی شدند و مورد ارزیابی قرار گرفتند. ارزیابی ابعاد مورفومتریکی سر اسپرم نشان داد که انجماد اثر معنی داری بر مورفومتری سر اسپرم گاومیش ندارد(p>0.05). در مرحله چهارم آزمایش، نمونه های منی بعد از جمع آوری در رقیق کننده بایوکسل رقیق شده و بعد از طی کردن 20 ساعت زمان تعادل منجمد شدند. نمونه های منجمد شده ذوب گردیده و با رنگ ائوزین-نگروزین رنگ آمیزی شدند. مورفومتری اسپرم ها با میکروسکوپ متصل به casa به صورت غیر اتوماتیک توسط کالیبراسیون نرم افزار انجام گرفت. ارزیابی ابعاد مورفومتریکی سر اسپرم نشان داد که اختلاف معنی داری بین سر اسپرم های زنده و مرده وجود دارد(p<0.05).

اثر سطوح مختلف عصاره هیدروالکلی برگ و گل شبدر قرمز روی پاامترهای کمی و کیفی اسپرم قوچ نگهداری شده در 4 درجه سانتیگراد در زمانهای مختلف
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی رضائیه 1391
  پریسا صوفی   حسن ملکی نژاد

این مطالعه به منظور ارزیابی اثرات عصاره هیدروالکلی گل و برگ شبدر قرمز بر روی پارامترهای زنده مانی، تحرک، سلامت غشا سیتوپلاسمی اسپرم، ظرفیت آنتی اکسیدانی سلول اسپرم و نیتریک اکساید تولیدی توسط سلول اسپرم قوچ انجام گرفت. نمونه های منی از 4 راس قوچ قزل بوسیله مهبل مصنوعی جمع آوری شد و پس از مخلوط کردن مورد استفاده قرار گرفت. ارزیابی تحرک اسپرم با استفاده از سیستم computer assisted sperm analyzer (casa)، درصد اسپرم های زنده با استفاده از رنگ آمیزی ائوزین-نگروزین، سلامت غشا سیتوپلاسمی (درصد اسپرمهای با دم پیچیده) با استفاده از تست hypoosmotic swelling test (host)، ظرفیت آنتی اکسیدانی با استفاد از روش frap و نیتریک اکساید (no) تولیدی با استفاده از روش gress انجام گرفت. برای بررسی پارامترهای مذکور نمونه های منی پس از رقیق سازی بوسیله رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ حاوی غلظت های مختلف عصاره برگ و گل شبدر قرمز (0(کنترل)، 5/0، 1 و 2 %) در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری شد و در 5 زمان مختلف (0، 24، 48، 72 و 96 ساعت) مورد اریابی قرار گرفت. برای بررسی frap و no از پلاسمای منی استفاده شد. no تولیدی در اثر عصاره گل 2% در ساعت صفر بیشترین مقدار را دارد و با گذشت زمان کاهش می یابد همچنین در همه زمان ها بجز ساعت 48 و 72 نسبت به سایر غلظت ها بیشترین مقدار را نشان می دهد. غلظت 2% عصاره برگ در همه زمان ها بجز ساعت 96 منجر به تولید بیشترین مقدار no شد. frap در هر سه غلظت عصاره گل نسبت به کنترل بالاتر است، همچنین غلظت 1 و 2 درصد عصاره برگ هم بیشترین مقدار را نسبت به کنترل نشان می دهد. مقدار همه پارامترهای حرکتی بجز bcf، زنده مانی و host با افزایش زمان نسبت به ساعت صفر کاهش یافت، همچنین با افزایش غلظت هر دو عصاره برگ و گل کاهش در پارامترهای فوق مشاهده شد. بر اساس نتیجه این تحقیق اثر مضر عصاره برگ و گل شبدر قرمز روی پارامترهای تحرک، زنده مانی و سلامت غشا سیتوپلاسمی اسپرم قوچ کاملا مشهود است. بطوریکه عصاره برگ و گل شبدر قرمز توانایی رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ را در نگهداری اسپرم قوچ در دمای 4 درجه سانتیگراد کاهش داد.

ارزیابی سونوگرافی تغییرات تخمدان بز مهابادی در طی فصل تولیدمثل و غیرتولیدمثل از طریق رهیافت واژینال
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی و دامپروری رضائیه 1391
  مهری عبدالله پور   فرهاد فرخی اردبیلی

هدف از تحقیق حاضر ارزیابی تغییرات ساختارهای مختلف تخمدان در طی فصل تولیدمثل و خارج از فصل تولیدمثل و نیز ارزیابی دقت تخمین تعداد و ابعاد اجسام زرد و فولیکولهای آنترال از طریق اولتراسونوگرافی از رهیافت واژینال در بزهای بومی مهابادی بود. مطالعه بر روی 6 راس بز ماده 6-4 ساله با وزن 80-60 کیلوگرم انجام گرفت. معاینه تمامی بزها بطور روزانه با پروب میکروکانوکس واژینال و در وضعیت ایستاده انجام گرفت. در طی فصل تولیدمثل سیکل استروس بز ها با استفاده از cidr همزمان شده و سونوگرافی روزانه آنها از روز خارج کردن cidr آغاز و تا 45 روز ادامه یافت. در خارج از فصل تولیدمثل معاینات سونوگرافی برای مدت 21 روز ادامه یافت. برای ارزیابی حساسیت و ارزش پیشگویی سونوگرافی برای تشخیص ساختارهای تخمدانی، مشاهدات سونوگرافی با معاینات پس از کشتار تخمدان ها مقایسه گردید. بر اساس نتایج این تحقیق سونوگرافی از طریق رهیافت واژینال روشی مناسب برای بررسی ساختارهای تخمدانی بز می باشد. در طی فصل تولیدمثل در چهار راس از بزهای مورد مطالعه که طول سیکل استروس نرمال (22-19) بود به ازای هر سیکل 3 موج فولیکولی تشخیص داده شد که موج ها در روزهای 0/0±0/1 ، 8/0±0/8 و 3/0±5/13 برای سیکل اول و در روزهای 0/0±0/1، 9/0±5/7 و0/1±5/13برای سیکل دوم اتفاق افتادند. فواصل بین موج ها برای سیکل اول 8/0±0/7، 7/0±5/5 و 1/1±0/8 روز و برای سیکل دوم 9/0±5/6، 7/0±0/6 و 5/0±8/7 روز بدست آمد. بین دو سیکل از لحاظ زمان وقوع موج ها و فواصل بین موج ها اختلاف معنی داری وجود نداشت. در دو راس از بزها با فواصل بین دو تخمک گذاری متوالی طولانی (42 روز) 5 موج فولیکولی مشاهده گردید. در بزهایی با 3 موج قطر فولیکول های تخمک گذار براساس تعداد تخمک گذاری 5/0±9/10 و 1/0±3/9 میلی متر بدست آمد. در خارج از فصل تولیدمثل نیز الگوی موجی در رشد فولیکول ها مشاهده گردید. بر اساس نتایج این تحقیق رشد فولیکولی در بزهای مهابادی به شکل موجی می باشد ولی مطالعات بیشتر برای تعیین جزییات بیشتر دینامیسم فولیکولی و میزان وقوع سیکل های نامنظم ضروری است. با توجه به نتایج بدست آمده اولتراسونوگرافی روشی دقیق برای تعیین تعداد اجسام زرد و فولیکولهای بالای 4 میلی متر است اما ارزش پیشگویی و حساسیت آن برای فولیکول های کوچکتر پایین تر می باشد.

ارزیابی اولتراسونیک روش های مختلف همزمان سازی بر روی دینامیسم ساختارهای تخمدانی در بز های مهابادی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی 1392
  فرید سبزی بایقراء   فرهاد فرخی اردبیلی

هدف از تحقیق حاضر ارزیابی اولتراسونیک روش های مختلف همزمان سازی استروس بر روی دینامیسم ساختارهای تخمدانی در بز های مهابادی با بکار گیری رهیافت واژینال بود. مطالعه بر روی 9 راس بز ماده 2-4 ساله با وزن 60-30 کیلوگرم (اکوتیپ مهابادی) انجام گرفت. معاینه تمامی بزها بطور روزانه با پروب میکروکانوکس واژینال و فرکانس mhz 5/7 در وضعیت ایستاده انجام گرفت. تیمار های آزمایشی شامل: 1) گروه سیدر، 2)گروه دو تزریق پروستاگلاندین با فاصله 14روز(pg+pg) و 3)تیمار اووسینک (gnrh+pg+gnrh) بود که در یک طرح چرخشی متوازن با 3 تیمار و 3 دوره و در هر تیمار 3 تکرار به مدت 5 ماه قرار گرفتند. بر اساس نتایج بدست آمده، هر سه روش همزمان سازی توانستند موجب القای تخمک گذاری در همه بز ها شوند. با این وجود، بین تیمار های مختلف، تفاوت معنی داری در تعداد فولیکول ها با اندازه های مختلف در زمان اتمام درمان( روز صفر) و تخمک گذاری، قطر و سرعت رشد فولیکول های غالب و اندازه قطر اجسام زرد حاصله مشاهده نگردید. در صورتی که تعداد جسم زرد با سطح اعتماد 6% در تیمار اووسینک بیشتر از دو تیمار دیگر بود(p=0.06). زمان تخمک گذاری در بزهای همزمان شده با سیدر (48 ساعت) به طور معنی داری کوتاه تر از دو گروه دیگر بوده (p<0.005) ولی بین بزهای همزمان شده با روش های pg+pg و اووسینک (به ترتیب 1/65 و 5/67 ساعت) اختلاف قابل توجهی مشاهده نگردید. بر اساس نتایج این تحقیق وقوع تخمک گذاری در بزهای همزمان شده با cidr زودتر از دو گروه دیگر اتفاق افتاده ولی نرخ تخمک گذاری در گروه اووسینک بیشتر از دو گروه دیگر بود.

ارزیابی تاثیربرخی عوامل محیطی (شوک حرارتی، نوع و ph رقیق کننده) بر تحرک اسپرم با استفاده از سیستم آنالیز کامپیوتری اسپرم(casa)
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی 1392
  واعظ کرمی   فرهاد فرخی اردبیلی

چکیده فارسی این تحقیق به منظور بررسی و ارزیابی تاثیر شوک حرارتی اسپرم، ph و نوع رقیق کننده روی نتایج حاصل از آنالیز تحرک اسپرم قوچ قزل بوسیله casa انجام گرفت. نمونه های منی از 4 راس قوچ قزل پرورش یافته در گروه علوم دامی دانشگاه ارومیه توسط واژن مصنوعی جمع آوری گردید. نمونه های منی گرفته شده از لحاظ حجم، غلظت و تحرک مورد ارزیابی قرار گرفته و پس از اطمینان از کیفیت مناسب با هم مخلوط شدند. در آزمایش اول به منظور ارزیابی تاثیر شوک حرارتی نمونه ی مخلوط منی توسط محلول بایوکسل با دمای c?10 (شوک سرما)، c? 42 (شوک گرما) و c?37 درجه رقیق گردید. 15 دقیقه پس از قرار گرفتن در معرض دمای مورد نظر نسبت به ارزیابی تحرک آنها اقدام گردید. آزمایش دوم به منظور بررسی اثرات تغییرات ph رقیق کننده بر پارامترهای حرکتی اسپرم انجام پذیرفت. در این آزمایش نیز نمونه مخلوط شده منی توسط رقیق کننده تریس با زرده تخم مرغ با ph های 6،7و8 در دمای 37 درجه سانتیگراد رقیق شده و بعد از 15 دقیقه نسبت ارزیابی تحرک اسپرم ها اقدام گردید. آزمایش سوم برای بررسی تاثیر نوع رقیق کننده بر پارامترهای حرکتی اسپرم انجام گرفت. برای این منظور، نمونه مخلوط شده منی با سه نوع رقیق کننده بایوکسل(imv, l’aigle, france) ، آندرومد (andromed; minitüb) و تریس با زرده تخم مرغ رقیق شدند. نمونه های رقیق شده برای حداقل 10 دقیقه در دمای 37 درجه سانتی گراد نگهداری شده و سپس پارامترهای حرکتی اسپرم مورد ارزیابی قرار گرفتند. ارزیابی تحرک اسپرم ها توسط میکروسکوپ فازکنتراست متصل به سیستم casa (sperm 2.1, videotest, russia) انجام گرفت. پارامترهای تحرکی محاسبه شده توسط این سیستم عبارت بودند از vap ,vsl ,vcl ,alh ,bcf ,str ,lin و نیز درصد اسپرم ها متحرک. براساس نتایج بدست آمده از آزمایش اول، شوک حرارتی باعث کاهش قابل توجه تمامی پارامترهای حرکتی (بجز bcf) و نیز درصد اسپرم متحرک گردید ولی در اسپرم های با سرعت حرکت بالا تغییری در سرعت و یا الگوی حرکتی مشاهده نگردید. در آزمایش دوم ph اسیدی(6) و یا قلیایی(8) رقیق کننده در مقایسه با ph خنثی(7) باعث کاهش سرعت حرکت و دامنه نواسانات سر اسپرم گردید در صورتیکه پارامترهای معرف الگوی حرکتی اسپرم (str و lin) در ph اسیدی بیشتر از ph خنثی و یا قلیایی بود(p<0.05). ولی درصد اسپرم های متحرک تحت تاثیر قرار نگرفت. در آزمایش سوم تاثیر نوع رقیق کننده برروی تمامی پارامترهای تحرک اسپرم (به جز str و lin و درصد اسپرم های متحرک) معنی دار بود (p<0.05). بطور کلی بر اساس نتایج این تحقیق شوک دمایی تغییرات ph و نوع رقیق کننده پارامترهای حرکتی محاسبه شده توسط سیستم casa را تحت تاثیر قرار می دهد و هنگام رقیق سازی و ارزیابی منی باید به آن توجه نمود. کلمات کلیدی : casa ، تحرک اسپرم ، شوک حرارتی، ph، رقیق کننده

اثرات استرادیول و مایکو استروژن آلفا – زرالینول روی پارامترهای کمی وکیفی اسپرم قوچ نگهداری شده در دمای 4 درجه سانتی گراد در زمان های مختلف
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی رضائیه 1392
  صغری عباس زاده   حسن ملکی نژاد

تحقیق حاضر به منظور ارزیابی اثرات اضافه کردن 17بتا-استرادیول و آلفا-زرالینول به رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ در نگهداری اسپرم قوچ بصورت مایع و در دمای یخچال انجام گرفت. برای این منظور نمونه منی از 4 راس قوچ قزل جمع آوری و پس از ارزیابی اولیه از لحاظ حجم، غلظت، رنگ و حرکت توده ای با هم مخلوط شدند و به 7 قسمت تقسیم شده و هر قسمت با رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ بدون ترکیبات استروژنی (کنترل) و یا حاوی 100 پیکو مولار، 100نانومولار و 100میکرومولار آلفا زرالینول و یا 17بتا-استرادیول رقیق شدند. نمونه های رقیق شده دریخچال (دمای 4 درجه سانتی گراد) نگهداری شده و در ساعات صفر، 24، 48، 72 و 96 از لحاظ سلامت غشای پلاسمایی و کیفیت تحرک اسپرم، قدرت زنده مانی اسپرم ها (viability)، میزان نیتریک اکساید(no) تولیدی و ظرفیت آنتی اکسیدانی تام (tac) مورد ارزیابی قرار گرفتند. سلامت غشای پلاسمایی با روشhost و تحرک اسپرم ها نیز توسط سیستم آنالیز کامپیوتری (casa) و قدرت زنده مانی اسپرم ها با استفاده از رنگ آمیزی ائوزین - نگروزین تعیین گردید. برای سنجش no از روش griess و برای تعیین میزان ظرفیت آنتی اکسیدانتی تام (tac) از روش farpاستفاده شد. بر اساس نتایج بدست آمده، کاهش معنی داری در اکثر پارامترهای تحرکی اسپرم کل بجز (lin وbcf)، اسپرم های متحرک، اسپرم های با حرکت پیشرونده، درصد سلامتی غشای پلاسمایی اسپرم، درصدزنده مانی، درصد اسپرم های متحرک و درصد اسپرم های با حرکت پیشرونده، در محیط حاوی 100میکرومول آلفا-زرالینول در مقایسه با گروه بدون ترکیبات استروژنی (کنترل) مشاهده شد. میزان نیتریک اکساید تولیدی در بین غلظت های مختلف استرادیول و آلفا-زرالنول و در بین زمان های مختلف تفاوت معنی داری با یکدیگر و با گروه کنترل نداشتند. ظرفیت آنتی اکسیدانی بصورت وابسته به غلظت و زمان در گروههای حاوی غلظت های مختلف آلفا-زرالینول و 17بتا-استرادیول اختلاف معنی داری داشتند. بطور کلی با توجه به نتایج این تحقیق اضافه کردن آلفا-زرالینول به میزان بیشتر از 100میکرومول به رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ باعث کاهش کیفیت اسپرم قوچ، در هنگام نگهداری بصورت مایع در دمای یخچال گردید در صورتیکه استرادیول چنین تاًثیری نداشت.

ارزیابی تأثیر آنالوگ gnrh (gonadorelin) در طی فاز لوتئال بر روی دینامیسم رشد فولیکول های تخمدان در بزهای مهابادی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی 1393
  فریبا صیدمرادی کهره   فرهاد فرخی اردبیلی

هدف از مطالعه حاضر ارزیابی تأثیر آگونیست هورمون gnrh (گنادورلین) بر روی دینامیسم رشد فولیکول¬های تخمدان طی فاز لوتئال در فصل تولیدمثل در بزهای بومی مهابادی بود. 6 رأس بز ماده پس از همزمان¬سازی سیکل استروس در قالب شش گروه یک رأسی قرار گرفته و مطالعه به صورت چرخشی و طی سه سیکل متوالی انجام گرفت. در هر رأس بز، یک سیکل به عنوان کنترل (بدون درمان)، یک سیکل به عنوان gnrh 10 (تزریق 70 میکروگرم گنادورلین در روز 10 سیکل) و یک سیکل به عنوان gnrh 15 (تزریق 70 میکروگرم گنادورلین در روز 15 سیکل) در نظر گرفته شد. معاینه تخمدان¬ها به طور روزانه و با استفاده از سونوگرافی از طریق رهیافت واژن انجام گرفته و داده¬های مربوط به اندازه و تعداد فولیکول¬های بیش از 3 میلی¬متر، تعداد فولیکول¬های کمتر از 3 میلی¬متر، سرعت رشد فولیکول¬ها، ابعاد و تعداد فولیکول ¬های غالب در هر موج، ابعاد و تعداد فولیکول¬های تخمک¬گذاری کرده، تعداد و طول موج های فولیکولی، ابعاد و تعداد اجسام زرد و طول سیکل استروس تعیین گردیدند. بر¬اساس نتایج به دست آمده هر چند بین گروه های کنترل و درمان از لحاظ آماری اختلاف معنی¬داری در طول سیکل استروس، حداکثر قطر فولیکول¬های تخمک¬گذاری کرده، تعداد تخمک¬گذاری و زمان شروع تحلیل جسم زرد وجود نداشت (p>0.05) ولی بررسی دینامیسم فولیکولی نشان داد که در غالب موارد تزریق گنادورلین منجر به از بین رفتن موج فولیکولی موجود و شروع موج جدید گردید. تعداد سیکل¬های با موج فولیکولی در گروه کنترل 17%، در گروه gnrh 10 60% و در گروه gnrh 15 100% بود. در دو رأس از 5 رأس بز مورد مطالعه در گروه gnrh 10 تزریق گنادورلین سبب تخمک¬گذاری فولیکول غالب موج حاضر و متعاقب آن تشکیل جسم زرد ثانویه گردید. براساس نتایج به دست آمده از این تحقیق تزریق گنادورلین در طی فاز لوتئال سیکل استروس بسته به زمان تزریق می¬تواند تخمک¬گذاری فولیکول غالب موج در زمان تزرق آگونیست و یا آترزی تمام فولیکول¬های موج حاضر شده و ظهور یک موج جدید را القاء کند.

تاثیر انجماد دو مرحله‏ای، زمان اضافه کردن گلیسرول و ارتفاع پایوت ها از سطح ازت مایع بر کیفیت اسپرم قوچ پس از روند انجماد- ذوب
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی 1393
  بهنام ریحانی   فرهاد فرخی اردبیلی

این تحقیق به منظور بررسی تاثیر زمان اضافه کردن گلیسرول، سرد سازی اولیه(انجماد دو مرحله ای) و ارتفاع پایوت ها از سطح ازت مایع بر کیفیت اسپرم قوچ پس از روند انجماد- ذوب انجام گرفت. برای این منظور نمونه منی از 4 راس قوچ قزل (سن 6 سال) جمع¬آوری و پس از ارزیابی اولیه از لحاظ حجم، غلظت، رنگ و حرکت توده ای مناسب با هم مخلوط شدند. نمونه مخلوط منی به دو قسمت مساوی تقسیم گردیدند. قسمت اول در دمای 37 درجه سانتی گراد با رقیق کننده حاوی 5 درصد گلیسرول رقیق شدند (روش یک مرحله ای). قسمت دوم ابتدا با رقیق کننده بدون گلیسرول رقیق شده و پس از کاهش دما به 4 درجه سانتی گراد و قبل از طی زمان تعادل، گلیسرول به میزان 5% به آن اضافه گردید (روش دومرحله ای). پس از طی زمان تعادل نمونه های رقیق شده در پایوت های cc5/0 پر شدند. برای ارزیابی تاثیر انجماد ( یا سردسازی) اولیه، پایوت ها به سه قسمت تقسیم شد. برای سرد سازی اولیه پایوت¬ها ابتدا در محفظه بالایی ظرف انجماد (دمای 25 -تا 35- درجه سانتی گراد) برای سه باز‏ه‏ی زمانی مختلف صفر، 5 و10 دقیقه قرار داده شدند. در مرحله نهایی انجماد هر گروه از پایوت¬ها به دو قسمت تقسیم شده و نیمی از آنها در ارتفاع 5/2 و نیمی دیگر در 5/3 سانتی متری ازت مایع به مدت 10 دقیقه برروی راک انجماد قرار گرفته و سپس در ازت مایع غوطه ور گردیدند. در نهایت از هر تیمار دو پایوت را ذوب و در داخل یک میکروتیوب با هم مخلوط نموده و برای مدت زمانی که آزمایش به طول می انجامید در داخل بن ماری 37 درجه قرار داده شد. برای ارزیابی تحرک از سیستم casa، درصد اسپرم ها زنده از رنگ آمیزی ائوزین-نیگروزین و برای سلامت غشای پلاسمایی اسپرم از host استفاده گردید. در صورت نیاز برای کاهش غلظت اسپرم ها و افزایش دقت casa، برای رقیق سازی بیشتر نمونه ها از همان رقیق کننده مربوطه استفاده می شد. اضافه کردن گلیسرول در دمای 37 و یا 5 درجه سانتی گراد تاثیر معنی داری برروی هیچکدام از پارامترهای اسپرم نداشت (p?0.05). در اسپرم های منجمد شده در ارتفاع cc5/2 از ازت مایع درصد اسپرم های دارای حرکت پیشرونده، درصد اسپرم های زنده و درصد اسپرم های دارای غشای پلاسمایی سالم بیشتر از اسپرم هایی بود که در ارتفاع cm5/3 منجمد شده بودند (p<0.05). در نمونه¬هایی که به روش یک مرحله¬ای رقیق شده بودند درصد کل تحرک، درصد اسپرم های دارای حرکت پیشرونده، درصد اسپرم هایی زنده و درصد اسپرم های با غشای پلاسمایی سالم بیشتر از نمونه های بود که بدون سردسازی اولیه منجمد شده بودند در صورتیکه در روش دو مرحله ای اثر معنی داری مشاهده نگردید. به طور کلی بر اساس نتایج به دست امده از این تحقیق، انجماد منی قوچ در ارتفاع cm5/2 سانتی متر از ازت مایع باعث حفظ بیشتر کیفیت اسپرم ها شده و سردسازی اولیه در دمای 20- تا -30 درجه سانتی گراد به مدت 10 دقیقه در نمونه هایی که به روش یک مرحله ای رقیق شده بودند باعث بهبود کیفیت اسپرم ها می گردد. همچنین اضافه گردن گلیسرول در دمای 37 یا 5 درجه سانتی گراد تاثیری برروری کیفیت اسپرم ها پس اتز انجماد ندارد.

آنالیز عدم هچ در گله های مرغ مادر گوشتی واقع در شهرستان ارومیه
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی 1390
  مهدی محمودی مللو   منوچهر عالیمهر

اهداف تحقیق حاضر ارزیابی تاثیر سال و سن گله مادر برروی سن تلفات پیش از هچ و درصد هچ کل وهمچنین ارزیابی تاثیر سال و فصل برروی سن مرگ جنین در تخم مرغ های هچ نشده و نیز برروی درصد هچ کل می باشد. درصد تخم مرغ های بی نطفه، تلفات جنین در سنین مختلف و درصد هچ کل تحت تاثیر سال نبود و در بیشتر پارامترهای مورد نظر نیز اثر متقابل بین سن گله مادر و سال مطالعه وجود نداشت،که در طی دو سال و در تمام فصول سال انجام گرفته است.این تحقیق برای آنالیز ،در جوجه کشی بر روی فرم های مخصوص ثبت می شد و گله ای مختلف در سال و فصول و در سنین متفاوت مورد مقایسه قرار می گرفت.

اثرات کوئرستین روی پارامترهای کمی و کیفی اسپرم قوچ نگهداری شده در دمای 4 درجه سانتیگراد در زمان های مختلف
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی 1393
  معصومه عباس زاده   حسن ملکی نژاد

هدف از این تحقیق ارزیابی تاثیر افزودن غلظت¬¬های مختلف کوئرستین به رقیق¬کننده تریس- زرده تخم¬مرغ بر روی اسپرم قوچ بود که برای مدت 72 ساعت در دمای c °4 نگهداری شده بودند. برای این منظور از 4 رأس قوچ اکوتیپ قزل با میانگین سن 6 سال .نمونه های منی با توسط واژن مصنوعی جمع آوری گردید. نمونه های منی پس از ارزیابی اولیه از لحاظ حجم، رنگ، غلظت و حرکت توده¬ای و اطمینان از داشتن کیفیت قابل قبول با هم مخلوط شدند. نمونه های مخلوط شده به 4 قسمت تقسیم شد و هر قسمت با رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ با غلظت های 10،20،30 و صفر(کنترل) میکرو مولار کوئرستین رقیق شدند. نمونه های رقیق شده در دمای c °4 نگهداری شده و در ساعات صفر، 24، 48 و 72 مورد ارزیابی قرار گرفتند. درصد اسپرم های زنده با روش رنگ آمیزی ائوزین-نگروزین،سلامت غشای پلاسمایی اسپرم با روش host , کیفیت تحرک اسپرم ها توسط سیستم آنالیز کامپیوتری (casa) تعیین گردید. میزان ظرفیت آنتی اکسیدانی تام(tac) رقیق کننده پس از جداسازی اسپرم ها با روش frap و میزان آنزیم ldh تولیدی آن با استفاده از کیت مربوطه مورد ارزیابی قرار گرفتند. بر اساس نتایج به دست آمده کوئرستین موجب افزایش معنی داری درصد اسپرم های زنده، اسپرم های با حرکت پیش رونده، اسپرم های متحرک و اسپرم ها با غشای پلاسمایی سالم گردید(p≤0.05). همچنین کوئرستین باعث افزایش معنی دار ظرفیت آنتی اکسیدانی رقیق کننده و نیز کاهش میزان آنزیم ldh آن شد. بطورکلی بر اساس نتایج حاصل از این تحقیق اضافه کردن کوئرستین به رقیق کننده تریس-زره تخم مرغ موجب حفظ بیشتر کیفیت اسپرم های قوچ هنگام نگهداری آن بصورت مایع در دمای c °4 می گردد که می تواند ناشی از اثرات آنتی اکسیدانی آن باشد.

ارزیابی تاثیر مخلوط کردن نمونه های منی بر روی پارامترهای حرکتی و میزان بقای اسپرم ها در قوچ قزل
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی 1393
  سلیمان خردمند   فرهاد فرخی اردبیلی

این تحقیق به منظور بررسی و ارزیابی تاثیر مخلوط کردن منی قوچ ها برروی ارزیابی پارامترهای مختلف اسپرم انجام گرفت. نمونه های منی از 4 راس قوچ قزل توسط واژن مصنوعی جمع آوری گردید. در آزمایش اول تاثیر رقیق سازی اسپرم هر قوچ با پلاسمای منی مخلوط سایر قوچ ها (هومولوگ) در مقایسه با پلاسمای منی همان قوچ برروی نتایج حاصل از آنالیز تحرک اسپرم قوچ قزل بوسیله سیستمcasa ارزیابی گردید. برای این منظور دو نمونه منی از هر قوچ اخذ گردید. نمونه اول برای جداسازی پلاسمای منی مورد استفاده قرار گرفت. پس از دوبار سانتریفوژ هرنمونه, پلاسمای فاقد اسپرم هر قوچ به دو قسمت تقسیم گردید. نیمی از پلاسمای منی هر قوچ با هم مخلوط گردید و بعنوان پلاسمای مخلوط (هومولوگ) بکار رفت. نیمه دوم هم به عنوان پلاسمای خالص هر قوچ استفاده گردید. نمونه دوم منی هر قوچ برای با پلاسمای منی هومولوگ و اتولوگ رقیق شده و سپس در دقایق 20 و 40 با استفاده از سیستم casa مورد آنالیز قرار گرفت. بر اساس نتایج بدست آمده از این آزمایش بجز پارامتر alh در قوچ شماره 4، هیچکدام از پارامترهای casa، درصد اسپرم های متحرک و دارای حرکت پیشرونده در سایر قوچ ها معنی دار نبود(p?0.05).هدف از این آزمایش دوم ارزیابی پارامترهای حرکتی، سلامت غشای پلاسمایی و درصد اسپرم های زنده در نمونه های منی مخلوط و مقایسه آن با میانگین بدست آمده از ارزیابی جداگانه منی هر قوچ بود.نمونه منی هر قوچ با رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ رقیق شده و سپس مقدار مساوی از نمونه رقیق شده هر قوچ با هم مخلوط شده و بعنوان اسپرم های مخلوط بکار رفت.

بررسی تغییرات فصلی آنتی اکسیدانت ها، برخی از عناصر معدنی و مقادیر پروتئین تام در پلاسمای منی قوچ قزل
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی 1388
  رحیم کیان بستان آباد   فرهاد فرخی اردبیلی

چکیده ندارد.

ارزیابی نگهداری اسپرم قوچ به صورت مایع در دمای اتاق )20 درجه سانتی گراد) و یخچال (4 درجه سانتی گراد) در رقیق کننده های شیر و بایوکسل
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه ارومیه - دانشکده کشاورزی 1388
  زهره دهقانی مدیسه   فرهاد فرخی اردبیلی

چکیده ندارد.