نام پژوهشگر: محمد رضا محزونیه

شناسایی ویروس نقص ایمنی گاو در گاوهای دارای آنتی بادی علیه بروسلا در مناطق شهرکرد و اصفهان
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده دامپزشکی 1389
  اعظم مختاری   محمد رضا محزونیه

ویروس نقصان ایمنی گاو (bovine immunodeficiency virus)از خانواده رترو ویریده (retroviridae)و زیرخانواده ی لنتی ویروس (lentivirus) است و اولین بار توسطvan der maaten و همکارانش در سال 1972 از یک گاو شیری 8 ساله با علائم لنفوسیتوز پایدار، هایپرپلازی لنفوئیدی، انسفالوپاتی، ضعف پیشرونده، لنفادنوپاتی و لاغری جدا شد. تاکنون وجود گاوهای شیری و گاومیش های دارای آنتی بادی علیه biv در شمال آمریکا، جنوب آمریکا، اروپا، آسیا، آفریقا و استرالیا به اثبات رسیده اما متأسفانه در این زمینه پژوهشی در ایران انجام نشده است. با وجودی که شیوع سرمی biv در سراسر جهان بین 4/1? و 64? گزارش شده است اما در اغلب مطالعات این میزان در محدوده ی 4? تا 6? می باشد. ویروس شناسان در مورد بیماری زایی biv در حیوانات هنوز به توافق نرسیده اند. انسفالیت، نقص ایمنی و کاهش شیر به این ویروس نسبت داده شده است اما در گوساله هایی که به طور تجربی آلوده شده اند این علائم به سختی ایجاد می گردند. پس از جداسازی اولین ویروس در سال 1972، سه جدایه ی دیگر هم از سایر نقاط جهان به دست آمد که نشان می داد ویروس در سراسر جهان گسترده است. در این مطالعه نمونه های خون 490 گاو از 84 فارم گاو شیری در اصفهان (46 فارم) و شهرکرد (38 فارم) اخذ شد و پس از بررسی وجود آنتی بادی علیه biv به روش الایزا، 22 نمونه (5/4?) مثبت گزارش گردید. شیوع سرمی biv در اصفهان ?3/3 و در شهرکرد ?7/5 بود. حدوداً %64 از موارد مثبت از شهرکرد و %36 از اصفهان به دست آمدند. در 17 فارم از 84 فارم(%2/20) گاوهای آلوده وجود داشتند که از این تعداد 13 فارم با سیستم سنتی اداره می شدند(%5/76). %8/31 از نمونه های مثبت (7 از22) از فارم های صنعتی و %2/68 (15 از22) از گله های اداره شونده به روش سنتی به دست آمدند. %1/9 از موارد مثبت از گروه سنی زیر 3 سال، %3/77 از گروه سنی 6-3 سال و %6/13 از گروه سنی 9-6 سال به دست آمد. بنابراین بیشترین فراوانی گاوهای سرم مثبت در گروه سنی 6-3 سال (17 از 22) مشاهده شد و کمترین نتایج مثبت (2 از 22) از رده ی سنی زیر 3 سال به دست آمد. لیکن به لحاظ فراوانی نسبی %17/1 از گاوهای زیر 3سال، %3/8 گاوهای 6-3 ساله و %7/2 گاو های 9-6 ساله از نظر وجود آنتی بادی علیه biv مثبت بودند. به لحاظ آماری ارتباط معنی داری بین ابتلای همزمان به دو بیماری biv و بروسلوز در جمع کل نمونه ها مشاهده نشد.(p=0.36) اما در مورد تأثیر فاکتور منطقه ی مورد بررسی ارتباط معنی داری به دست آمد (p=0.034). در شهرکرد (sd=1.26, se= 0.11) به طور معنی داری این تأثیر در ابتلای به biv بیشتر از اصفهان (sd=0.92, se = 0.09) بود. در این مطالعه به منظور تأیید تشخیص سرمی وجود ژن gag از dna پرو ویروس در لکوسیت های خون محیطی با آزمایش pcr اثبات شد. هر 6 نمونه ی سرم مثبت در آزمون الایزا در آزمون pcr هم نتایج مثبت نشان دادند. (پس از مقایسه با مارکرهای dna با مشخصاتfermentase-50 bp ، چنانچه اندازه ی قطعه ی تکثیر یافته 382bp باشد نتیجه مثبت در نظر گرفته می شود). نمونه های مورد آزمایش و کنترل مثبت باندهای 382bp نشان دادند و در محدوده ی کنترل منفی باندی مشاهده نشد.

شناسایی رتروویروس بیماری jaagsiekte گوسفند در بافت ریه فیکس شده در فرمالین و قالب گیری شده در پارافین بوسیله آزمایش pcr
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده دامپزشکی 1390
  مصطفی خدری   محمد رضا محزونیه

چکیده آدنوماتوز ریه گوسفند(opa) که به عنوان بیماری جاگزیکت نیز شناخته شده است یک نئوپلازی واگیر ریه گوسفند است که به ندرت در بز هم دیده شده است. بیماری توسط یک نوع بتا رتروویروس به نام jsrv به وجود می آید که متعلق به خانواده ی رتروویریده، شاخه ی ارتورتروویرینه و جنس بتا رتروویروس ها می باشد. برای تشخیص بیماری آزمون هیستوپاتولوژی مورد استفاده قرار می گیرد که با سایر آزمون ها از جمله pcr، ایمونوهیستوشیمی و الایزا تکمیل می-شود. در برخی از موارد امکان آزمون pcr روی نمونه های تازه در هنگام مواجهه با ضایعات بیماری وجود ندارد و مجبور به نگهداری بافت ها در فرمالین یا قالب پارافینی تا زمان آزمون می شوند. فرمالدئید که ماده ی موثر فرمالین است باعث به وجود آمدن پیوند های متقابل بین نوکئیک اسید و پروتئین می شود. با وجود این، نمونه های بافتی فیکس شده در فرمالین و قالب گیری شده در فرمالین(ffpe) به وفور برای pcr بر روی محتوای dna آنها به خصوص در مورد قطعات کوچک dna در تشخیص بیماری ها مورد استفاده قرار می گیرد. در مطالعه ی اخیر تاثیر نگهداری بافت-های ریه در فرمالین و قالب پارافینه برای جداسازی قسمتی از ویروس jsrv به وسیله آزمونhnpcr مورد بررسی قرار گرفت. بر روی نمونه های ریه مشکوک به آدنوماتوز بعد از تشخیص هیستوپاتولوژی، آزمون hnpcr با پرایمرهای اختصاصی ژن gag ویروس jsrv صورت گرفت. دو روش غیر حرارتی و روغن های معدنی برای پارافین زدایی همراه با استخراج به روش فنل کلروفرم در زمان های مختلف، بررسی شدند. نتایج نشان داد که نگهداری بافت ها در قالب پارافینه تاثیر چندانی روی نتایج از 24 ساعت تا 6 ماه نداشت و و روش غیر حرارتی در تمام بازه های زمانی مورد بررسی به خصوص تا 7 ماه نتایج بهتری در آزمونhnpcr داشت. آنالیز فیلوژنتیک قسمتی از ژن gag جدا شده نیز تفاوت عملکردی با ژنوتایپ های پروتوتیپیک نشان نداد.

بررسی اثرات ورزش سنگین بر تغییرات سطح کراتین کیناز، آسپارتات آمینوترانسفراز، لاکتات دهیدروژناز و گلوکز سرم متعاقب تجویز نانوذره سلنیوم
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده دامپزشکی 1390
  سیده مژده امامی قهفرخی   محمد رضا محزونیه

در این تحقیق از 8 رأس الاغ با محدوده وزنی و سنی یکسان بهره گرفته شد و حیوانات به طور کاملاً تصادفی در دو گروه تیمار (دریافت دارنده نانو ذرات سلنیوم) و شاهد تقسیم شدند. سپس نانوذره سلنیوم تهیه شده به روش شیمیایی به میزان 5/0 میلی گرم به ازاء هر کیلوگرم وزن بدن طی 10 روز به گروه تیمار (4 رأس) و آب مقطر به گروه شاهد خورانده شد و در پایان این دوره حیوانات وادار به یورتمه (10 دقیقه)، تمرین سنگین (چهار نعل به مدت 15 دقیقه) و ساده (راه رفتن به مدت 15 دقیقه) شدند. در ادامه و طی زمان های 2، 24 و 72 ساعت پس از ورزش اقدام به خون گیری از ورید وداج و تعیین میزان ck، ast، ldh و گلوکز سرم شد. جهت تجزیه و تحلیل آماری نتایج از روش سنجش تکراری آنالیز واریانس یک طرفه و آزمون تکمیلی توکی (tukey test) در سطح 05/0>p بهره گرفته شد. نتایج نشان داد که میزان میزان ck و ldh سرم هر دو گروه 2 ساعت پس از انجام ورزش دچار افزایش معنی دار شده است به طوری که سطح سرمی ldh در 2 ساعت پس از ورزش در گروه شاهد به طور معنی داری بیشتر از گروه تیمار است (05/0>. (p اما این تغییرات در سطح سرمی ast چندان قابل توجه نیست. در 2 ساعت پس از انجام تمرین سطح سرمی ldh گروه دریافت کننده مکمل نانوذره سلنیوم به طور معنی داری کمتر از گروه شاهد بود، این در حالیست که در همین زمان سطح آنزیم مذبور به ترتیب در گروه شاهد و تیمار تقریباً، 9 و 6 برابر سطح پایه (قبل از خوراندن) تخمین زده شد، که حکایت از تخریب عضلانی دارد. همچنین این یافته حکایت از تأثیر مثبت مکمل نمودن نانوذره سلنیوم بر آزاد شدن این آنزیم دارد، چراکه در حضور نانوذره میزان تخریب عضلانی کمتر است. میزان گلوکز سرم هر دو گروه 2 ساعت پس از انجام ورزش دچار کاهش معنی دار شده است. بر این اساس مشخص می شود که تحمیل ورزش منجر به کاهش سطح گلوکز سرم می گردد.

اثر جدایه های باکتری های پروبیوتیک جدا شده از محصولات لبنی بومی بر کاهش کلسترول محیط کشت.
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده دامپزشکی 1393
  مهسا سید حنایی   عبدالناصر محبی

تغییر شیوه زندگی بشر، کاهش فعالیت های فیزیکی، تصنعی شدن وضعیت تغذیه و به طور کلی قرار گرفتن در زندگی ماشینی، که همه حکایت از کم رنگ شدن شیوه های سنتی زندگی دارند، انسان را در معرض تهدید بالقوه زندگی مدرن امروزی قرار داده است. امروزه بشر به این موضوع پی برده که باید سنت کم رنگ شده استفاده از عوامل درمانی طبیعی را دوباره احیا کند و با دخل و تصرف و بهینه کردن آن در حفظ و بقای خود کوشش نماید. در حال حاضر تمایل بسیار زیادی به مصرف مواد غذایی عملگر، یعنی غذاهای دارای ارزش دارویی و تغذیه ای ویژه، علاوه بر خواص تغذیه ای پایه، به وجود آمده است. در این میان مواد غذایی حاوی پروبیوتیک ها از این نمونه ها هستند. از خصوصیات عملکردی پروبیوتیک ها می توان به تعدیل سیستم ایمنی، کاهش کلسترول سرمی، کاهش عفونت های گوارشی، کاهش میزان اسهال های مزمن مسافرتی و هم چنین کاهش میزان سرطان اشاره نمود. گونه های متفاوتی از باکتری های اسید لاکتیک(lactic acid bacteria (lab)) به عنوان پروبیوتیک معرفی شده اند اما بیشترین گونه های معرفی شده مربوط به لاکتوباسیل ها(lactobacillus ) می باشند. از آنجا که ظرفیت های پروبیوتیکی وابسته به سوش می باشند، انتخاب روش های قابل اطمینان برای شناسایی لاکتوباسیل ها از اهمیت خاصی برخوردار است. جنس ها از نظر فنوتیپی ناهمگن هستند و شناسایی سوش های لاکتوباسیل بسیار وابسته به خصوصیات بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی است. برای آن که یک باکتری به عنوان پروبیوتیک معرفی شود، باید چند فاکتور متفاوت ، از جمله قابلیت کاهش کلسترول مورد ارزیابی قرار داد. بررسی ها نشان می دهد، افزایش سطح کلسترول سرمی با حمله های قلبی ارتباط مستقیم دارد. هم چنین پژوهش های متعدد نشان داده اند برخی از لاکتوباسیل ها قادرند سطح کلسترول تام و ldl را کاهش دهند. از این رو یکی از فاکتورها برای انتخاب یک باکتری به عنوان پروبیوتیک، توانایی آن در کاهش میزان کلسترول سرمی می باشد. از این رو در این پژوهش به مطالعه جدایه های مقاوم به محیط اسیدی و املاح صفراوی جدا شده از محصولات لبنی شهرکرد پرداختیم و به شناسایی بیوشیمیایی و ملکولی و بررسی اثر آنها بر کاهش کلسترول محیط پرداختیم به این منظور 15 جدایه با بیشترین مقاومت به محیط اسیدی و املاح صفراوی انتخاب شد و آزمایشات بیوشیمیایی و ملکولی برای شناسایی دقیق تر این باکتری ها انجام پذیرفت. با توجه به نتایج تست های بیوشیمیایی و مولکولی باکتری های جنس لاکتوباسیلوس متعلق به گونه های فرمنتوم و برویس می باشند. نتایج سنجش اثر کاهندگی جدایه های لاکتوباسیلوس با روش بیوشیمیایی سنجش کلسترول تام نشان داد که میزان کاهش کلسترول محیط در بین جدایه مورد مطالعه بین 54/4-90% متغیر می باشد.

ازریابی اثرات فاژ عزت نگر1 (iz1 ) در درمان موش balb/c مبتلا به عفونت تجربی باکتری بروسلا ملی‎تنسیس
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده دامپزشکی 1392
  امنه کربلایی محمد میگونی   علی محمد بهروزیخواه

بیماری بروسلوز که در انسان تب مالت نامیده می شود، از جمله مهمترین بیماری‎های مشترک بین انسان و دام (زئونوز) با گسترش جهانی و طیف وسیع میزبانی است. . یک راه درمان عفونت‎های باکتریایی، استفاده از باکتریوفاژها به جای عوامل ضد باکتری است در این مطالعه، اثر باکتریوفاژ عزت نگر شماره 1 (izat negar) iz 1 در درمان بروسلوز تجربی موش‎های balb/c حاصل از سویه حاد بومی باکتری بروسلا ملی تنسیس بایوتایپ 1 بررسی شده است. در نتایج حاصل از این مطالعه، گروههای گیرنده آنتی بیوتیک درمان شدند و طحال اکثر آنها از باکتری بروسلا پاک شد. گروه‎هایی که فاژ دریافت کرده بودند درمان نشدند اما در مقایسه با گروه شاهد باکتری،گروه فاژتوانسته بود از تعداد کلنی باکتری بروسلا در طحال بکاهد.

طراحی یک روش pcr چندگانه به منظور شناسایی همزمان بروسلا ملی تنسیس، سالمونلا آبورتوس اویس، کلامیدوفیلا آبورتوس و کوکسیلا بورنتی در سقط جنین گوسفندان
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده دامپزشکی 1394
  احسانی محمود   محمد رضا محزونیه

در این پژوهش یک روش pcr چندگانه به منظور شناسایی همزمان بروسلا ملی تنسیس، سالمونلا آبورتوس اویس، کلامیدوفیلا آبورتوس و کوکسیلا بورنتی که از عوامل مهم سقط جنین گوسفندان می باشند، طراحی گردید. برای این منظور پس از طراحی pcr چندگانه، تعداد 98 نمونه محتویات شیردان جنین های سقط شده از استان‎های اصفهان، چهارمحال و بختیاری و خراسان رضوی مورد آزمایش قرار گرفت. میزان آلودگی در نمونه های بررسی شده، 3/15 درصد بروسلا ملی تنسیس، 2/11 درصد سالمونلا آبورتوس اویس، 1/7 درصد کلامیدوفیلا آبورتوس و صفر درصد، کوکسیلا بورنتی بود. در کل نتایج این پژوهش نشان می دهد آزمون pcr چند گانه، دارای حساسیت و ویژگی بالایی در تشخیص های مولکولی می باشد. با این حال عامل سقط جنین حدود 64% از موارد، همچنان ناشناخته باقی ماند.