نام پژوهشگر: یوسف سیدنا
علی اصغر دلدار یوسف سیدنا
اسید آمینه ال - لیزین یکی از اسیدهای آمینه ضروری برای دام و طیور می باشد، لذا در تغذیه آنها به عنوان یک مکمل غذایی از اهمیت ویژه ای برخوردار است . امروزه متداولترین منایع تولید لیزین، میکروارگانیسمها و خصوصا باکتریهای دو گونه بروی باکتریوم و کورینه باکتریوم می باشند. به منظور افزایش تولید این اسید آمینه در باکتریهای فوق، از ایجاد جهش و گرینش در سویه های مناسب استفاده می شود. سویه هایی که بدین ترتیب جدا می شوند از قدرت تولید بالایی برخوردار هستند. در پروژه حاضر از brevibactrium linens ptcc 1603 برای تولید ال - لیزین استفاده شد. بدین منظور این باکتری در معرض uv و (n - methyl - n - nitrosoguanidine) ntg قرار داده شد تا پس از جهش زایی موتانتهای موردنظر جدا شوند. برای دستیابی به این موتانت (ها) چندین مرحله اصلی شدند: 1 - مقدار ال - لیزین تولید شده توسط سویه والد محاسبه شد (56/5 mg/l) 2 - منحنی مرگ این سویه در مقابل پرتوهای uv رسم شد و زمان و فاصله مناسب (اپتیمم) برای دستیابی به 1 درصد، بقای سلولی محاسبه گردید. بدین منظور 0.1 ml سوسپانسیون باکتری (2/3×104 cell/ml) بر سطح محیط مغذی پخش گردید و سپس تحت شرایط انتخابی تابش داده شد. نتیجه این مرحله از مطالعه تعیین فاصله 35cm از منبع تابش (لامپ 15 w پرتوهای فرابنقش) و زمان 30s به عنوان شرایط اپتیمم تابش دهی بود. 3 - پس از جهش زایی با uv، یک موتانت با 151mg/l تولید لیزین، از بین 25 موتانت دیگر انتخاب شد. این موتانت mu24 بود. 4 - موتانت mu24 بار دیگر در معرض موتاژن قرار گرفت لیکن در این مرحله از ntg استفاده شد بطوری که غلظت نهایی ntg در سوسپانسیون باکتری 400?g/ml بود. در این مرحله 15 موتانت مناسب انتخاب گردیدند که از بین آنها mn97 بالاترین مقدار تولید را نشان می داد. تولید لیزین در این موتانت 2214mg/l بود. این موتانت نسبت به متیونین اگزوتروف و آستانه نیاز آن 30?g/ml بود. 5 - موتانت اخیر برای دومین بار در معرض ntg قرار گرفت . هدف از این مرحله جهش زایی جداسازی موتانتهای مقاوم به آمینواتیل سیستئین (aec) بود. در این قسمت از مطالع 18 موتانت در محیط حداقل حاوی 10g/c آمینواتیل سیستئین رشد کردند. مقدار لیزین تولید شده توسط این موتانتها مطالعه شد که موتانت 5017mg/ml mn97.8 لیزین بعنوان بهترین تولید کننده انتخاب گردید. موتانت mn97.8 همزمان با اگزوتروف بودن موتانت تنظیمی نیز بود. در تمام مراحل فوق برای مقایسه مقدار تولید لیزین در موتانتها و تعیین معنی داری بودن اختلاف بین آنها از آنالیزهای آماری (از جمله crd: طرح کاملا تصادفی) استفاده شد.
منیره خدابنده بهرام کیایی
مطالعه ای جهت بررسی پاره ای از خصوصیات زیستی گاو ماهیان مصب دو رودخانه حفاظت شده چالوس و سردابرود از تابستان 1378 لغایت تابستان 1379 صورت پذیرفت. تعداد 169 نمونه با استفاده از تور سالیک صید شد که حاصل آن شناسایی تعداد شش تاکسا بود. neogobius iljini- n.caspius- n. melanostomus - n. fluviaitlis and proterrhimus marmaratus بیشترین فراوانی به گونه n. iljini تعلق داشته در حالی که گونه proterorhinus marmaratus تنها شامل یک نمونه بوده است. میانگین طول کل نسبت به جنس و ایستگاه برای گونه های n.iljini , n. melanostomus n.fluviatilis معنی دار نبوده است. یافته ها حاکی از این است که در گونه n. caspius در حاکی که میانگین طول کل نسبت به ایستگاه دارای اختلاف معنی دار نبوده است اما نسبت به جنسیت اختلاف معنی داری را نشان داده است. فراوانترین گروههای طولی به ترتیب (*1 و *0) و (1* و 2*) برای گونه های n.fluviatilis , n. iljini و گونه های n.melamostomus, n.caspius بوده است. برای هر دو جنس نر و ماده در گونه های n. iljini, n caspius و افراد ماده گونه n. fluviatilis رشد به صورت ایزومتریک و برای هر دو جنس نر و ماده گونه n.melanostomus رشد به صورت آلومتریک تشخیص داده شد. به علت کمبود امکانات آزمایشگاهی لازم کاریو تایپ تنها یک گونه n.caspius تعیین شد. عدد کروموزمی 2n=46 و تعداد بازوهای کروموزومی nf=46 گزارش می شود. همه کروموزومها از نوع آکروسانتریک تشخیص داده شدند. آنالیز کلاستر نشان داد که تنوع در صفات ریختی برای گونه های n.caspius, n.iljini از ایستگاه سردابرود و برای افراد گونه n. iljini از ایستگاه چالوس بچشم می خورد. در گونه های n. iljini, n. caspiuis, n. fluviatilis, n. melanostomus قرارگیری افراد دو ایستگاه در کنار هم نبود تمایز بین آنها را آشکار نمود. استفاده از آنالیز کلاستر و تجزیه به مولفه های اصلی pca نشان داد که در گونه n.cyrius براساس صفات ریختی استفاده شده در مطالعه حاضر جدایی و تمایز وجود دارد. دو شکلی جنسی در همه 5 گونه مطالعه شده از جنس نیو گوبیوس مشاهده نشد. مطالعه رژیم غذایی آشکار نمود که سوژه غذایی غالب در عرض سال برای گونه %43 n. iljini ماهی، برای گونه %73 n melanostomus نرم تن، برای گونه %33 n. caspius ماهی و برای گونه %66 n. fluviatilis نرم تن بوده است. یافته های درباره تولید مثل نشان داد که بالاترین حد شاخص gsi برای گونه n. caspius, fluviatilis بهار و برای گونه n. melanostomus تابستان و برای گونه n. iljini زمستان بوده است.