نام پژوهشگر: سارا السادات راه پیما
سارا السادات راه پیما احمد معینی
داروهای گیاهی نقش مهمی در درمان بسیاری از بیماریها از جمله سرطان دارند . در میان آنها، تاکسول یکی از مهم ترین و موثرترین داروهای ضد سرطانی است که تاکنون شناسایی شده است. کشت سلول و بافت گونههای سرخدار (taxus spp.)، و به تازگی فندق (corylus avellana l.)، از امیدبخشترین روشها، برای تولید انبوه و ارزان این ترکیب میباشد. به منظور افزایش میزان این داروی ارزشمند در فندق عوامل و فاکتورهای مختلف از جمله تاثیر نوع منبع کربن محیط کشت، پیشماده، الیسیتور و همچنین بررسی القاء پلیپلوئیدی در کشت سوسپانسیون سلولی آن مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظور، در آزمایشی، از 4 نوع ترکیب قندی در ترکیب با فنیلآلانین به عنوان پیشماده در سه سطح و وانادیل سولفات به عنوان الیسیتور در سه سطح استفاده شد. اثر این ترکیبات تیماری روی صفات درصد زنده مانی، وزن تر سلولها و میزان تاکسول درون سلولی، در روزهای 6 ، 8 و 10 دوره کشت بررسی شدند. در آزمایش دیگری، جهت القای پلیپلوئیدی، اثر غلظتهای کلشیسین در مدت زمانهای مختلف بررسی شدند. در نهایت، اثر عوامل فوق بر بیان دو ژن ggpps و pal به روش qrt-pcr مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان داد که درصد زندهمانی سلولها با افزایش مقادیر فنیلآلانین و وانادیلسولفات کاهش مییابد و بیش ترین درصد زنده مانی توسط شاهد و کمترین آن با استفاده از µm 3 از فنیلآلانین و mm 1/0 از وانادیل سولفات در روز دهم دوره کشت بدست آمد. همچنین بیش ترین مقدار وزن تر، در روز دهم دوره کشت، توسط محیط کشت حاوی 3% گلوکز فاقد فنیلآلانین و وانادیل سولفات؛ و کمترین مقدار توسط محیط کشت حاوی 3% گلوکز حاوی µm 3 از فنیلآلانین و mm 1/0 از وانادیل سولفات بدست آمد. نتایج نشان داد که بیش ترین میزان تاکسول در روز دهم دوره کشت، توسط محیط کشت حاوی 3% فروکتوز، µm 3 از فنیلآلانین و mm 05/0 و 1/0 از وانادیل سولفات بدست آمد. همچنین بررسی اثرات مقادیر مختلف فنیلآلانین و وانادیل سولفات بر بیان ژن های مورد نظر نشان داد که بیان ژن pal، تحت تأثیر فنیلآلانین (µm 3) و وانادیل سولفات (mm 05/0) به طور معنیداری افزایش یافته، در حالی که این مواد تاثیر معنیدار روی بیان ژن ggpps نداشتند. همچنین بر اساس نتایج فلوسیتومتری، کالوس تتراپلوئید توسط تیمارهای 2/0% کلشیسین به مدت 5 روز در محیط کشت جامد و نیز 3/0% کلشیسین به مدت 4 روز در محیط کشت مایع بدست آمد. بررسی اثر تتراپلوئیدی در میزان تاکسول نشان داد که تتراپلوئیدی موجب افزایش تاکسول شده است و بیان ژن ggpps را به طور معنی دار افزایش داده است. به طور کلی عوامل مورد بررسی در این پژوهش، باعث افزایش میزان تاکسول در کشت سوسپانسیون سلولی فندق شده است، که دستاورد امید بخشی جهت تولید تاکسول از منبعی غیر از گیاه سرخدار میباشد.