نام پژوهشگر: فریبا فرجی
فریبا فرجی عباس صاحبقدم لطفی
هدف: آفلاتوکسین ها و بخصوص آفلاتوکسین b1، اثرات مرگ بار و جبران ناپذیری روی سلامت انسان دارند. هدف از انجام این تحقیق، توسعه یک روش سریع، ساده، حساس و اختصاصی برای شناسایی و اندازه گیری آفلاتوکسین متصل به آلبومین در سرم خون بعنوان شاخص مهم وضعیت در معرض بودن افراد به این سم می باشد. مواد و روش ها: در این تحقیق سه گروه رات انتخاب و به عنوان گروه تست (تیمار شده با آفلاتوکسین (b1، گروه کنترل منفی )بدون تیمار خاص) و گروه استاندارد (تیمار شده با آفلاتوکسین b1 رادیواکتیو) مورد استفاده قرار گرفتند. پس از خونگیری از رات ها، سرم خون و سپس آلبومین سرم جداسازی و میزان آفلاتوکسین موجود در بخش آلبومین با دو روش direct spr immunoassay و hplc-fluorescence اندازه گیری شد. لازم به ذکر است در این تحقیق، اثر ترکیبات مزاحم بر اندازه گیری ها مورد بررسی قرار نگرفته است. نتایج: پس از جداسازی آلبومین از نمونه سرم رات ها، با روش الکتروفورز (sds-page) نشان داده شد آلبومین جدا شده کاملاً خالص می باشد. کمترین حد شناسایی برای اندازه گیری آفلاتوکسین متصل به آلبومین به روش hplc-fluorescence،pg/mg alb 20، اختصاصیت روش 100% و حساسیت 92% تعیین شد. کمترین حد شناسایی برای اندازه گیری این شاخص به روشdirect spr immunoassay، pg/mg alb 30، اختصاصیت روش 100% و حساسیت آن نیز 100% محاسبه شد. همچنین همبستگی خوبی بین نتایج حاصل از دو روش مشاهده گردید. (r2=0.923) نتیجه گیری: روش direct spr immunoassay بعنوان یک روش سریع، ساده، بدون نیاز به نشانگذاری، با حساسیت و اختصاصیت بسیار خوب، قابلیت تکرارپذیری و همچنین امکان استفاده مکرر از یک تراشه و حداقل حجم نمونه لازم برای آنالیز، می تواند برای اندازه گیری آفلاتوکسین متصل به آلبومین بعنوان شاخص مهم میزان قرار گرفتن در معرض آفلاتوکسین مورد استفاده قرار گیرد.
فریبا فرجی عباس صاحبقدم لطفی
آلفا-1-آنتی تریپسین یکی از آنتی سرین پروتئازهای مهم پلاسماست که دارای 394 اسید آمینه و وزن مولکولی 52 کیلو دالتون می با شد. این پروتئین ، مهار کننده اصلی الاستاز نوتروفیلی است و در حفاظت بافت ریوی در برابر تخریب الاستولیتیک ، نقش حیاتی دارد.apob100، آپوپروتئین موجود در ldl، دارای 4536 اسید آمینه و جرم مولکولی 510کیلودالتون می باشد. این آپوپروتئین هم در استحکام ساختمانی لیپوپروتئین اهمیت دارد و هم بعنوان یک واسطه در اتصال و برداشت ldl توسط بافتها عمل می کند. مولکولهای آلفا-1-آنتی تریپسین و apob100 که توسط کبد سنتز می شوند، می توانند در سرم به هم متصل شوند. این اتصال می تواند در برداشت ldl توسط بافتها تاثیرگذار باشد. کمپلکس aat-ldl علاوه بر سرم ، در پلاکهای تصلب شرائین نیز دیده شده است که این پدیده، نشان دهنده نقش این کمپلکس در آتروژنز می باشد. در مطالعه حاضر برای اثبات تشکیل این کمپلکس ، 21 نمونه سرم انسانی تهیه و همه نمونه ها به روش الکتروفورز کانونی و با استفاده از سرم استاندارد(تهیه شده از آزمایشگاههای رفرانس aat در نروژ و کانادا) تعیین فنوتیپ شدند که 18نمونه دارای فنوتیپ mm و سه تای دیگر فنوتیپهای ms، mz، sz داشتند.سپس در این نمونه ها میزان ldl و سایر چربیها با روش آنزیماتیک و با استفاده از دستگاه اتوآنالایزر ra-1000 و فعالیت aat سرم به روش اسپکتروفتومتری و با استفاده از آنزیم تریپسین و سوبسترای bapna اندازه گیری شد.