نام پژوهشگر: فریبا فرجی

طراحی بیوسنسور (تراشه) ویژه برای اندازه گیری آفلاتوکسین b1 متصل به آلبومین در سرم رات به روش direct spr immunoassay و مقایسه آن با روش مرجع
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی 1389
  فریبا فرجی   عباس صاحبقدم لطفی

هدف: آفلاتوکسین ها و بخصوص آفلاتوکسین b1، اثرات مرگ بار و جبران ناپذیری روی سلامت انسان دارند. هدف از انجام این تحقیق، توسعه یک روش سریع، ساده، حساس و اختصاصی برای شناسایی و اندازه گیری آفلاتوکسین متصل به آلبومین در سرم خون بعنوان شاخص مهم وضعیت در معرض بودن افراد به این سم می باشد. مواد و روش ها: در این تحقیق سه گروه رات انتخاب و به عنوان گروه تست (تیمار شده با آفلاتوکسین (b1، گروه کنترل منفی )بدون تیمار خاص) و گروه استاندارد (تیمار شده با آفلاتوکسین b1 رادیواکتیو) مورد استفاده قرار گرفتند. پس از خونگیری از رات ها، سرم خون و سپس آلبومین سرم جداسازی و میزان آفلاتوکسین موجود در بخش آلبومین با دو روش direct spr immunoassay و hplc-fluorescence اندازه گیری شد. لازم به ذکر است در این تحقیق، اثر ترکیبات مزاحم بر اندازه گیری ها مورد بررسی قرار نگرفته است. نتایج: پس از جداسازی آلبومین از نمونه سرم رات ها، با روش الکتروفورز (sds-page) نشان داده شد آلبومین جدا شده کاملاً خالص می باشد. کمترین حد شناسایی برای اندازه گیری آفلاتوکسین متصل به آلبومین به روش hplc-fluorescence،pg/mg alb 20، اختصاصیت روش 100% و حساسیت 92% تعیین شد. کمترین حد شناسایی برای اندازه گیری این شاخص به روشdirect spr immunoassay، pg/mg alb 30، اختصاصیت روش 100% و حساسیت آن نیز 100% محاسبه شد. همچنین همبستگی خوبی بین نتایج حاصل از دو روش مشاهده گردید. (r2=0.923) نتیجه گیری: روش direct spr immunoassay بعنوان یک روش سریع، ساده، بدون نیاز به نشانگذاری، با حساسیت و اختصاصیت بسیار خوب، قابلیت تکرارپذیری و همچنین امکان استفاده مکرر از یک تراشه و حداقل حجم نمونه لازم برای آنالیز، می تواند برای اندازه گیری آفلاتوکسین متصل به آلبومین بعنوان شاخص مهم میزان قرار گرفتن در معرض آفلاتوکسین مورد استفاده قرار گیرد.

میان کنش ‏‎ldl‎‏ و فنوتیپهای ‏‎mz‎‏ و ‏‎ms‎‏ آلفا-1-آنتی تریپسین در سرم انسانی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس 1381
  فریبا فرجی   عباس صاحبقدم لطفی

آلفا-1-آنتی تریپسین یکی از آنتی سرین پروتئازهای مهم پلاسماست که دارای 394 اسید آمینه و وزن مولکولی 52 کیلو دالتون می با شد. این پروتئین ، مهار کننده اصلی الاستاز نوتروفیلی است و در حفاظت بافت ریوی در برابر تخریب الاستولیتیک ، نقش حیاتی دارد.‏‎apob100‎‏، آپوپروتئین موجود در ‏‎ldl‎‏، دارای 4536 اسید آمینه و جرم مولکولی 510کیلودالتون می باشد. این آپوپروتئین هم در استحکام ساختمانی لیپوپروتئین اهمیت دارد و هم بعنوان یک واسطه در اتصال و برداشت ‏‎ldl‎‏ توسط بافتها عمل می کند. مولکولهای آلفا-1-آنتی تریپسین و ‏‎apob100‎‏ که توسط کبد سنتز می شوند، می توانند در سرم به هم متصل شوند. این اتصال می تواند در برداشت ‏‎ldl‎‏ توسط بافتها تاثیرگذار باشد. کمپلکس ‏‎aat‎‏-‏‎ldl‎‏ علاوه بر سرم ، در پلاکهای تصلب شرائین نیز دیده شده است که این پدیده، نشان دهنده نقش این کمپلکس در آتروژنز می باشد. در مطالعه حاضر برای اثبات تشکیل این کمپلکس ، 21 نمونه سرم انسانی تهیه و همه نمونه ها به روش الکتروفورز کانونی و با استفاده از سرم استاندارد(تهیه شده از آزمایشگاههای رفرانس ‏‎aat‎‏ در نروژ و کانادا) تعیین فنوتیپ شدند که 18نمونه دارای فنوتیپ ‏‎mm‎‏ و سه تای دیگر فنوتیپهای ‏‎ms‎‏، ‏‎mz‎‏، ‏‎sz‎‏ داشتند.سپس در این نمونه ها میزان ‏‎ldl‎‏ و سایر چربیها با روش آنزیماتیک و با استفاده از دستگاه اتوآنالایزر ‏‎ra-1000‎‏ و فعالیت ‏‎aat‎‏ سرم به روش اسپکتروفتومتری و با استفاده از آنزیم تریپسین و سوبسترای ‏‎bapna‎‏ اندازه گیری شد.