نام پژوهشگر: محمدجواد رسایی
حورا لقمانی خوزانی مهرداد نوروزی نیا
تغییر الگوی متیلاسیون در ناحیه پروموتر بسیاری از ژن های در سرطان ثابت شده است. الگوهای متفاوتی از متیلاسیون ناحیه غیر بیان شونده گیرنده استروژن آلفا و بتا در بیماران مبتلا به سرطان پستان دیده شده است و اعتقاد بر این است که این تغییر الگو می تواند نشانگری در جهت تشخیص زود هنگام ، پیش آگهی و درمان این بیماری باشد. هدف ما از این تحقیق بررسی نقش تغییرات اپی ژنتیک در منطقه پنج پرایم در بیماران ایرانی مبتلا به سرطان پستان بود. er? و er? utr موجود در 5 پرایم cpg در این راستا ، پرایمرهایی برای دو جزیره به صورت اختصاصی ، er? ژن on دراگزون بیان نشونده cpg و یک جزیره er? dna اختصاصی متیلاسیون بر روی pcr طراحی شدند. به وسیله این پرایمرها استخراج و تیمار شده نمونه های خون و بافت بیماران انجام شد. cpg مشاهده شد که ، حدود هفتاد در صد از بیماران در جزیره er? در دوم در نمونه های بافت متیله بودند. این cpg اول و هشتاد و پنج در صد در جزیره آمار درنمونه های خون مربوطه، به ترتیب صد درصد و هشتاد وهفت درصد بود. در حدود چهل درصد متیلاسیون در بافت های سرطانی مشاهده شد، در حالیکه er? تمامی نمونه های خون غیرمتیله بودند. انجام شد، er? و er? نیز برای cobra بر روی نمونه های بافت آنالیز بیماری دیده شد. (grade) که با این تکنیک نیز تمایلی به متیله شدن با افزایش گرید به طور خلاصه ، در این تحقیق تمایلی به متیلاسیون در پروموتر این دو ژن ، در بیماران ایرانی مبتلا به سرطان پستان مشاهده شد، که این نتایج با سایر تحقیقاتی که در رابطه با نقش این دو ژن در سبب شناسی سرطان پستان انجام شده بودند، هماهنگی داشت.
مجید اسدی محمدجواد رسایی
در این مطالعه با استفاده از فن آوری نمایش فاژی نانوذرات شبه فاژی نمایش دهنده می موتوپ برتر egfr ساخته شده است. در این سیستم، توسط وکتور فاژمیدی pak8-gvo77، پپتید مورد نظر روی pviii نانوذرات شبه فاژی به نمایش درآمد. توالی می موتوپ در مراحل قبلی با استفاده از فن آوری نمایش فاژی به دست آمده بود و برهمکنش آن با icr62 اثبات شده بود. این توالی پپتیدی به همراه لینکر 3 اسید آمینه ای (g-g-s) به توالی dna ترجمه معکوس و برای بیان در e.coli بهینه شد. با توجه به نقشه وکتور دو جایگاه برش آنزیمی در آن قرار داده شد. سپس توالی حاصل با طول نهایی 80 باز و پرایمرهای آن سنتز شدند. با روش pcr قطعه dna تکثیر و با استفاده از آنزیم های sfi1/not1، هضم دو گانه آنزیمی انجام شد. بدین ترتیب طول قطعه کلون شونده به 52 جفت باز کاهش یافت. این قطعه کوتاه dna داخل pak8-gvo77 کلون و محصول به e.coli tg1 ترانسفورم شد. کلونی pcr، pcr با استفاده از فاژمید تخلیص شده، تست تعیین توالی و یک هضم دو گانه آنزیمی دیگر با استفاده از sfi1/not1 روند کلونینگ، و با انجام تست الایزای فاژ با استفاده از آنتی بادی منوکلونال icr62 صحت نمایش پپتید تایید شد. سپس نانوذرات شبه فاژی نمایش دهنده می موتوپ egfr با استفاده از peg6000 تخلیص شده و غلظت آنها با روش رقت سازی متوالی تعیین شد. 1012 نانوذره شبه فاژی در 150 میکرولیتر بافر pbs تهیه و به موش های ماده به روش زیر پوستی و بدون ادجوونت تزریق شد. پس از خونگیری از موش ها و جداسازی سرم آنها تست الایزا انجام شد و نتایج نشان دادند که آنتی بادی علیه می موتوپ تولید شده است
سامیلا فرخی منش فاطمه رهبری زاده
چکیده ندارد.
محسن نواری محمدجواد رسایی
گیرنده فاکتور رشد اپیدرمی (egfr) متعلق به خانواده گیرنده های تیروزین کینازی بوده و از دهه 80 به عنوان یک هدف برای درمان سرطان مطرح شده است. تعداد قابل توجهی آنتی بادی های مونوکلونال بر علیه egfr تولید شده اند که یکی از این آنتی بادی ها icr62 می باشد. با توجه به مشکلات آنتی بادی های مونوکلونال –که بیشتر آن ها اساسا موشی هستند- از قبیل هزینه بالا و برهمکنش با سیستم ایمنی، ایمونیزاسیون بر علیه egfr می تواند جایگزین مناسبی برای آنتی بادی های مونوکلونال باشد. در این راستا، قبلا نقشه اپی توپی آنتی بادی مونوکلونال icr62 با استفاده از یک کتابخانه نمایش فاژی پپتیدهای تصادفی تعیین شده است. در تحقیق حاضر، توالی مورد نظر که یک می موتوپ (مقلد اپی توپ) می باشد سنتز شده و به مولکول bsa متصل شد. تمایل پپتید به آنتی بادی مونوکلونال icr62 بررسی و تایید شد. بررسی سرم موش های balb/c ایمن شده با این مولکول در یک آزمون الایزا بر روی egfr تخلیص شده از رده سلولی a431، نشاندهنده حضور آنتی بادی بر علیه egfr تا تیتر 1:2000 بود. این امر در مورد حیوانات ایمن شده با پپتید خالص مشاهده نشد. سرم های مذکور توانایی ممانعت از رشد سلول های بیان کننده egfr (رده سلولیa431) در شرایط in vitro را نداشتند. بنابراین، igg خرگوشی بر علیه پپتید متصل به bsa تولید، تخلیص و تیتر آنتی بادی بر علیه egfr تا 12/5 میکروگرم در میلی لیتر تعیین شد. آنتی بادی های مذکور توانایی ممانعت از رشد رده سلولی a431 را تا میزان 15% داشتند. بنابراین از پپتید به دست آمده می توان به عنوان یک عامل ایمنی زا بر علیه egfr استفاده نمود. این عامل قطعا می تواند سیستم ایمنی را برای تولید آنتی بادی بر علیه egfr تحریک نموده که اثرات مثبت در مهار رشد سلول های بیان کننده egfr داشته و دارای کاربرد در مهار رشد سلول های سرطانی می باشد.
غلامرضا اسدی کرم محمدجواد رسایی
پروتئیناز 3 یک نوتروفیل سرین پروتناز و به عنوان یک اتو آنتی نوتروفیل سیتوپلاسمیک اتوآنتی بادیها که در سرم افراد با بیماری گرانولوماتوز وگنر دیده می شود، می باشد. فرم خالص شده این پروتئیناز جهت مطالعه این بیماران بسیار حائز اهمیت است . در این تحقیق دو نوع pr3 انسانی بصورت نوترکیب تهیه شد. بخشی از pr3cdna که فرم فعال راکد می کند انتخاب و با انجام واکنش نسخه برداری معکوس و واکنش زنجیری پیوسته بر روی rna سلولهای u937 ، با پرایمرهای خاص cdna های مورد نظر تهیه گردید. به منظور اینکه pr3 های ساخته شده در محیط کشت ترشح شوند یک توالی علامت دهنده ترشحی در جلو cdna های pr3 اضافه گردید و سرانجام دو نوع توالی سیگنال ساخته شد. در یکی از آنها توالی سیگنال و pr3 مستقیما" به یکدیگر متصل شده اندspr3 و در دیگری 6 جفت باز اضافی بین s و pr3 وجود داردsapr3-spr3-(sapr3) در داخل وکتور بیان کننده pme18 کلون شدند و pme18-s-apr3-pme18-s-pr3 های حاصل در داخل e.coli الکتروپوریت گردیدند. بعد از جداسازی، تخلیص و مطمئن شدن از صحت توالیهای spr3 و sapr3 ، وکتورها در داخل cho-cells الکتروترانسفرم شدند. پس از 10 روز حضور پروتئینازهای نوترکیب (rapr3,rpr3) در محیط کشت تایید و فعالیتشان در برابر سوبسترای اختصاصی اندازه گیری شد. مقدار rpr3 و rapr3 در محیط کشت به ترتیب 10ng/ml و 12ng/ml بود. pr3 های نوترکیب دارای فعالیت آنزیمی بوده و هر دو همانند نوع طبیعی توسط c-anca شناخته می شوند.
علیرضا رحیمی اصغر خالدان
هدف از این پژوهش بررسی تاثیر تمرین کاهش اکسیژن ( هیپوکسی )بربرخی از شاخصهای زیست شیمیایی خون شناگران نوجوان پسر بوده است .
مرضیه موسوی محمدجواد رسایی
بیماریهای تینه آ ورسیکالر و درماتیت سبوره از جمله شایعترین عفونت های جلدی می باشند که توسط گونه های قارچی فرصت طلب متعلق به جنس مالاسزیا ایجاد می گردند. این گونه ها جزو فلور طبیعی پوست انسان هستند و تقریبا از تمامی نواحی بدن جدا می شوند. طبقه بندی گونه های مالاسزیا براساس مقایسه توالی ژنوم و rna ریبوزومی تعداد زیادی از ایزوله های انسانی و حیوانی انجام شده است و این شواهد با اختلافات مشخص در خصوصیات مورفولوژیک، فیزیولوژیک و بیوشیمیایی ما بین گونه ها به خوبی مطابقت دارد. این تحقیق برای اولین بار در ایران باهدف جداسازی، شناسایی و تعیین الگوی پروتئینی گونه های متعلق به جنس مالاسزیای جداسازی شده از مبتلایان به تینه آورسیکالر و درماتیت سبوره انجام گرفته است. در این راستا مجموعا از 146 بیمار مبتلا به بیماریهای نام برده تعداد 97 ایزوله مالاسزیا با استفاده از محیط کشت ویژه (دیکسون تغییر یافته) جداسازی گردید. شناسایی گونه های مالاسزیا با استفاده از تست های اختصاصی نظیر تست کاتالاز، رشد بر روی محیط سابورودکستروزآگار در دمای 32 درجه سانتیگراد، تست توئین و مورفولوژی میکروسکوپی انجام گرفت و بر این اساس چهار گونه گلوبوزا (69 ایزوله)، فورفور (18 ایزوله)، ابتوزا (8 ایزوله) و سیمپودیالیس (2 ایزوله) مورد شناسایی قرار گرفتند. این اولین گزارش مستند در مورد جداسازی گونه های گلوبوزا، ابتوزا و سیمپودیالیس درایران می باشد. بررسی الگوی پروتئینی ایزوله های فورفور با استفاده از روش الکتروفورز ژل سدیم دودسیل سولفات پلی اکریل آمید (sds-page) نشان داد که حدود 24 تا 29 باند پروتئینی با وزن مولکولی بین 18000 تا 158000 دالتون در عصار سیتوپلاسمی ایزوله ها وجود داشت که تعدادی از این باندها اختصاصی ایزوله و تعدادی دیگر بین تمام ایزوله ها مشترک بودند. در مجموع نتایج بدست آمده نشان داد که می توان گونه های مالاسزیا را با استفاده از تست های اختصاصی مورفولوژیک، فیزیولوژیک و بیوشیمیایی شناسایی و از یکدیگر افتراق داد.
معصومه رجبی بذل محمدجواد رسایی
امروزه بکارگیری وسایل ایمنواسی و طراحی روشهای سریع برای تشخیص مورد توجه می باشد، لذا در سالهای اخیر تست های سریع با دقت و حساسیت کافی طراحی و جایگزین سایر روشهای پیچیده و پرهزینه ایمنواسی مثل رادیوایمنواسی ، الایزا و ... شده اند. آنتی بادی به عنوان یکی از مهمترین اجزا سنجشهای ایمنی در این نوع روشها مورد عنایت و استفاده است.آنتی بادی های پلی کلونال علیه مورفین تاکنون در حیوانات پستاندار گزارش شده اند، در این تحقیق برای اولین بار آنتی بادی پلی کلونال علیه مورفین igy-anti-morphine با ایمن کردن مرغها توسط ایمنوژن 6- مورفین همی سوکسینات -آلبومین سرم گاو 6-mhs-bsa و تخلیص آن با روش ساده و با استفاده از پلی اتیلن گلیکول 6000 صورت گرفته است.