گلوکوم بیماری پیچیده چشم معمولا" همراه با افزایش فشار داخل چشم و آسیب عصب بینایی و فنجانی شدن سر عصب بینایی است ، بطوریکه می تواند در اثر عدم یا تاخیر درمان مو جب از دست رفتن بینایی گردد. گلوکوم بر اساس اتیولوژی (اولیه یا ثانویه) ،آ ناتومی اتاقک قدامی (زاویه باز یا بسته) و زمان بروز علایم (کودکی و بزرگسالی) به سه دسته گلوکوم زاویه باز اولیه، گلوکوم زاویه بسته اولیه و گلوکوم مادرزادی اولیه تقسیم می شود. اطلاعات محکم گواه نقش عوامل ژنتیکی در بروز این بیماریها است، از جمله وجود تعداد قابل توجهی از خانواده ها که دارای بیش از یک فرد بیمار هستند. تا بحال جایگاههای ژنی (genetic loci) و تعدادی ژن در ارتباط با انواع گلوکوم شناخته شده اند. در این پژوهش تاکید بر گلوکوم مادرزادی اولیه (primary congenital glaucoma) یا pcg بوده است که گزارش شده شیوع آن در خاورمیانه بالاتر از کشور های غربی است. در رابطه با گلوکوم اولیه مادرزادی سه جایگاه ژنی glc3a ، glc3b و glc3c تا بحال شناخته شده و تنها ژنcyp1b1 دراین رابطه در جایگاه ژنی glc3a در کروموزوم 2p21 شناسایی شده بود. قبلا" معلوم شده بود که علت ژنتیکی بیماری در حدود 70% از بیماران pcg ایرانی جهش در همان ژنcyp1b1 است. در اینجا 21 خانواده pcg که جهش در ژنcyp1b1 در آنها مشاهده نشده بود، برای پیوستگی به دو جایگاه ژنی glc3b و glc3c با استفاده از نشانگر های microsatellite مطالعه شدند. تعداد 3 خانواده با پیوستگی به glc3b در کروموزوم 1p36 و 5 خانواده با پیوستگی به glc3c در کروموزوم 14q24 شناسایی شدند. از آنجائیکه خانواده های پیوسته به glc3b کوچک بودنداز ادامه مطالعه آنها صرف نظر شد. سه خانواده پیوسته به glc3c پیگیری شدند. ابتدا پیوستگی با رویکرد genome wide linkage analysis و با استفاده از ریزآرایه های(microchip) حاوی حدود 400000 مارکر snp تائید و منطقه پیوستگی به فاصله 55/4 مگاباز محدود شد. سپس در اثر غربالگری ژنها در منطقه پیوسته ، ژن ltbp2 بعنوان ژن جدید عامل بیماری pcg شناخته شد. نبود پیوستگی به دو جایگاه ژنی glc3b و glc3c در خانواده های بدون جهش در ژنcyp1b1 گواه بر وجود جایگاههای ژنی ناشناخته برای بیماری pcg است. تفاوت فنوتیپی آشکاری میان بیماران با جهش در انواع ژنها یا با پیوستگی به انواع جایگاهها مشاهده نشد. در ادامه برای شناخت هرچه بهتر چهره ژنتیکی بیماری pcg در بیماران ایرانی، ژن myoc که اغلب باعث بیماری گلوکوم زاویه باز می شود ، ولی گاه در بیماری pcgدر جوامع دیگر نیز گزارش شده است ، میان بیماران pcg غربالگری شد اما جهش در این ژن یافت نشد.

هدف: شناسایی ژن هایی که در کشت های اولیه سلول های شبکه ترابکولار (tm) بیانشان تحت تأثیر فاکتورهای رونویسی pitx2 و foxc1 قرار می گیرد. همچنین شناسایی ژن هایی که در بیماری گلوکوم نقش دارند. ژن های عامل بیماری گلوکوم که تاکنون شناخته شده اند تنها در کسر کوچکی از بیماران عامل بیماری می باشند. هدف ما در این مطالعه شناسایی ژن های دیگری است که ممکن است به علت نقش های ظریف، به راحتی توسط روشهای ژنتیکی قابل شناسایی نباشند. روش ها: با استفاده از ریزآرایه بیانی، بیان ژنها در سلو های tm تیمارشده با scrambled sirna با سلول های tm تیمار شده با sirna های اختصاصی foxc1 و pitx2 مقایسه شدند. برای به حداقل رساندن نتایج اشتباه منفی و مثبت از سه روش مختلف برای آنالیز داده ها استفاده شد. نتایج ریزآرایه بر روی تعدادی از ژن ها با روش های real time pcr، وسترن بلات و ایمنوهیستوشیمی تأیید شدند. تأثیرات بر روی دو ژن cxcl6 و aldh1a1 بیشتر پیگیری شدند. نتایج: سرکوب pitx2 و foxc1 به ترتیب منجر به شناسایی 5 و 26 ژن توسط هر سه روش شد. 41 و 849 ژن نیز توسط حداقل یک پروتکل شناسایی شدند. همه نتایج ریزآرایه نیز بر روی ژن های بررسی شده با سایر روش ها تأیید شدند. نتایج در دو سلول tm دیگر تهیه شده نیز تأیید شدند. نقش pitx2 در پاسخ aldh1a1 به استرس اکسیداتیو نشان داده شد. نتیجه گیری: روش های بیوانفورماتیکی نشان دادند که ژن های شناسایی شده بر عملکردها و مسیرهای مرتبط با گلوکوم تأثیر می گذارند. نقش pitx2 و foxc1 در بیان بسیاری از ژن ها و بعضی از مسیرها برای نخستین بار ارائه می شود. از آنجا که بسیاری از ژن های شناسایی شده در رابطه با گلوکوم مطالعه نشده اند، ما احساس می کنیم که این ژن ها چشم اندازهای جدیدی برای درک اتیولوژی این بیماری می گشاید.

اینکه چرا برخی از کشورها نسبت به دیگران سریع تر رشد می کنند یکی از مهم ترین مسائل در اقتصاد است. این مطالعه به دنبال پاسخ به این پرسش می باشد که چرا برخی از کشورها رشد تولید ناخالص داخلی بسیار بیشتری نسبت به دیگر کشورها دارند. برای پاسخ به این سوال به مطالعه ی یکی از عوامل اصلی تعیین کننده ی رشد، یعنی مقررات حاکم بر فعالیت های کسب و کار پرداخته شده است. تجزیه و تحلیل ها بر یک نهاد خاص، نظام قضایی، متمرکز می شود و برآورد مدل با استفاده از تکنیک داده های تابلویی صورت گرفته است. بر اساس برخی نتایج تحقیق، برای 49 کشور در دوره ی 2010-2004، نرخ رشد gdp حقیقی سرانه، با شاخص اجرای قراردادها به عنوان نمایاننده ی کارآمدی نظام قضایی رابطه ی منفی دارد. هر چه شاخص اجرای قرارداد بالاتر باشد، به معنای بیشتر بودن زمان، تعداد مراحل و هزینه ی اجرای قرارداد است که به معنای سخت تر بودن انجام این فرآیند است؛ لذا کشورهایی با مقررات اجرای قرارداد سهل تر، رشد سریع تری دارند. رشد با سرمایه ی انسانی (نرخ ثبت نام در مدارس در طول دوره به عنوان شاخصی برای این منظور بکار گرفته شده است) رابطه ی مثبت دارد و نیز با سطح gdp حقیقی سرانه در ابتدای دوره (2004) رابطه ی منفی دارد. رشد با سهم مصرف دولت از gdp رابطه ی معکوس دارد. تجزیه و تحلیل ها نشان می دهد که تفاوت در سرمایه ی انسانی و فیزیکی تنها تا حدی می تواند تفاوت در تولید سرانه را توضیح دهد. در یک سطح عمیق تر، تفاوت ها در بهره وری و در نتیجه تولید سرانه بر اساس تفاوت ها در نهادها و سیاست های دولتی توضیح داده می شود. با توجه به اهمیت کارایی قضایی، در این مطالعه مجموعه پیشنهاداتی برای اصلاح قوه ی قضاییه از مطالعات بانک جهانی استخراج شد.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.

یکی از موانع عمده در تولید رده های سلولی ترانسفورم شده پایدار مشکل کلون سازی است . متداولترین روش برای چیره شدن بر این مشکل استفاده از سلولهای مغزی میباشد. سلولهای مغزی از طریق اتصال مستقیم و تولید فاکتورهای رشد مختلف محیط نسبی را برای رشد و تکثیر رده های سلولی دیگر در کشت همزمان فراهم میکنند. در مطالعات انجام یافته در آزمایشگاه اثبات شده است که اتصال سلول به سلول و سلول به ماتریکس خارج سلولی سبب گسیل سیگنالهای رشد و تکثیر به درون سلول میشود. cd44 از سری مولکولهایی است که احتمال دخالت آن در مسیر اتصال و گسیل سیگنال به درون سلول مطرح شده است . در این پایان نامه از رده های فیبروبلاست تهیه شده از بافتهای مختلف جنین و پوست انسان بالغ بعنوان لایه سلولی مغزی جهت مطالعه اثرات آنها بر توانایی تکثیر و کلونی زایی لنفوسیت b ترانسفورم شده انسان (lcl) با ویروس اپشتارین بار (ebv) استفاده گردید. در ارزیابی نقش سلول مغزی، تاثیر اتصال فیزیکی و همچنین مدیاتورهای مترشحه سلولهای مغزی در کشت همزمان مطالعه گردید. علاوه بر مطالعه راندمان کلونی زایی سلولهای ترانسفورم شده، پرولیفراسیون این سلولها از طریق جذب تیمدین رادیواکتیو هم بررسی گردید. در نهایت در کشت همزمان سلولهای ترانسفورم شده در حضور آنتی بادی مونوکلونال ضد cd44، نقش این مولکول در تاثیرات سلولهای مغزی مورد ارزیابی قرار گرفت . با توجه به نتایج کسب شده اثرات سلولهای مغزی به سه عامل: غلظت سلول مغزی، منبع سلول مغزی و اتصال مستقیم بین سلول مغزی و lcl بستگی دارد. کاهش معنی دار در کلنی زایی lcl در حضور تعداد زیاد سلول فیبروبلاست (حالت confluent) در مقایسه با تعداد کمتر سلول فیبروبلاست (حالت subconfluent) مشاهده گردید. بالاترین توانایی کلنی زایی در حضور فیبروبلاستهای ریه به دست آمد و به دنبال آن سلولهای foreskin، پوست و کبد قرار گرفتند. اثرات تکثیری سلولهای مغزی به صورت عمده از طریق برقراری اتصالات فیزیکی با سلول lcl فراهم گردید با این حال واسطه های مترشحه آنها تا اندازه ای موثر بودند. سلولهای جنینی در محیط کشت از رشد و تکیر بالایی برخوردار هستند و این امر با تولید عوامل رشد پاراکرین و اتوکرین فراهم میشود و در این میان فیبروبلاستهای ریه احتمالا فاکتورهای رشد بیشتری تولید میکنند. کلنی زایی lcl در غلظت بهینه سلول مغزی نسبت به محیط کشت کنترل 20 برابر افزایش نشان داد. در بین رده های فیبروپلاست پوست در سنین مختلف ، فیبروپلاست جنین از بالاترین توانایی کلنی زایی برخوردار بود. آنتی بادی ضد cd44 قادر به توقف گسیل سیگنالهای تکثیری از سلولهای مغزی به lcl نبود. احتمالا آنتی بادی استفاده شده بر ضد cd44 ممکن است قادر به توقف اتصال cd44 به لیگاند خود یعنی هیالورونان نباشد و یا اساسا cd44 در رده سلولی ما به صورت ذاتی قادر به اتصال لیگاند نیست . با وجود تنوع زیادی در آنتی بادی ضد cd44 لازم است از انواع دیگری از آنتی بادیهای منوکلونال ضد cd44 با ویژگیهای متفاوت استفاده شود تا بتوان نتایج بدست آمده در این پایان نامه را بدقت ارزیابی نمود.

dna میتوکندری انسان (mtdna) مولکولی است حلقوی و شامل 16569 جفت نوکلئوتید که کدکننده 13 پروتئین از کمپلکس های آنزیمی زنجیره تنفسی، 22 عدد trna و 2 عدد rrna می باشد. در هر سلول هزاران نسخه از mtdna وجود دارد و یک جهش می تواند در تمام (هموپلاسمی) و یا در تعدادی از مولکول های mtdna (هتروپلاسمی) اتفاق بیفتد. توارث mtdna مادری است یعنی تنها مادر، mtdna را به فرزندان خود منتقل می کند. چنانچه مادرهتروپلاسمی باشد، فرزندان وی در نسل اول ممکن است سهم متفاوتی از mtdna نرمال و یا جهش یافته را به ارث ببرند. جهش های mtdna انواع متفاوتی از بیماریها نظیر بیماری آسیب عصب چشم ارثی لبر (lhon) را سبب می شوند. lhon بیماری است که سبب نابینایی حاد دائمی در جوانان 20-30 سال می گردد. یکی از جهش های بیماریزای زیر در dna میتوکندری (در محل های g11778a، g3460a، t14484c، g14459a) تقریبا در تمام خانواده های مبتلا به lhon دیده شده است . بعنوان اولین تحقیق در ایران، ما 3 جهش نقطه ای در محل های g11778a و g3460a و t14484c را در 12 بیمار مشکوک به lhon با استفاده از روش های pcr و rlfp بررسی کردیم. جهش g11778a در 3 خانواده ایرانی مبتلا به lhon مشخص گردید. اولین بیمار پسری 28 ساله بود که بینایی خود را از سن 24 سالگی بطور پیشرونده از دست داد. وی، چهار برادر و چهار خواهر دارد که همگی این جهش را دارا هستند. برادر کوچکتر وی (21 ساله) نیز مشکل بینایی دارد. تمام اقوام مادری وی نیز جهش مذکور را دارند. دومین بیمار پسری 29 ساله است که از سن 26 سالگی بینایی خود را بصورت پیشرونده از دست داده است . برادر بزرگتر وی (35 ساله) که کاملا نابیناست نیز جهش g11778a را داراست . علائم بیماری وی از سن 25 سالگی آغاز گشته است . مادر آنها نیز همین جهش را داراست . سومین بیمار پسری است 27 ساله که از سن 24 سالگی بینایی خود را بتدریج از دست داد. تمام برادران و مادر وی نیز جهش مذکور را دارند. برادر جوانتر وی (16 ساله) نیز مشکل بینایی دارد. جهش در هر سه خانواده مذکور بصورت هموپلاسمیک بوده است . هیچ زنی با وجود دارا بودن جهش g11778a در این سه خانواده، علائم بیماری را نشان ندادند.

هدف غایی این پژوهش ، ارائه روشی برای تسهیل مطالعه ملکولی بیماری مهلک سرطان مری است . علی رغم شیوع این سرطان در خطه شمالی ایران، نمونه به راحتی تهیه نمی شود. بنابراین درصدد گسترش منابع برای نمونه های سرطان مری برآمدیم. یک منبع غنی از بافتهای سرطانی، بلوک پارافینی است که برشهای حاصل از آن به مصرف تشخیص آسیب شناسی (پاتولوژی) و ایمنی شناسی (ایمونولوژی) می رسند. این بلوکها همراه با مشخصات بیمار و تشخیص پزشک معالج در آرشیو بیمارستان نگهداری می شوند. با استفاده از بلوکهای حفظ شده می توان نمونه های قدیمی و موارد جدید این بیماری را بررسی کرد. هدف این پژوهش میسر کردن مطالعه ملکولی اسیدهای نوکلئیک در محل دقیقی از بافت است که شاخص های سرطان در آن محل تجلی یافتند. گرچه سرطانهای غده ای از یک سلول اولیه پدید می آیند (منوکلنال هستند)، به دلیل حضور سلولهای سرطانی، گاه باعث می شود. ویژگیهای سلولهای طبیعی به سلولهای سرطانی نسبت داده شوند. از این جهت پس از تهیه برش بافتی باید به همگن سازی آن همت گمارد. برای بررسی dna سلولهای سرطانی، بهترین شیوه استخراج dna از بخش کوچکی از این برشهاست . dna حاصل را می توان به عنوان الگو در واکنش pcr به کار گرفت . به همین منظور ابعاد برش بافتی با استفاده از کاغذ میلیمتری ارزیابی می شود. بخشهایی از برش با سطح بین 26 و 156 میلیمترمربع مشخص شده، از بقیه برش برداشته می شود. عصاره سلولی حاوی dna با استفاده از محلول حاوی آنزیم پروتئاز و ماده شوینده استخراج می شود. dna در عصاره تهیه شده از بخشهای بافتی با ابعاد فوق الذکر الگوی کارایی برای ازدیاد توالی ژن بتاگلوبین در واکنش pcr بود. محصول مربوط به بتاگلوبین پس از یک واکنش pcr روی ژل قابل رویت بود. یعنی لازم نبود واکنش pcr لانه ای غانجام گیرد. علاوه بر توالی های بتاگلوبین، توالی های ژن اکتین در حضور آغازگرهای مربوط به این ژن در واکنش pcr ازدیاد شدند. قابل توجه است که معمولا عصاره تهیه شده از بخشهای کوچکتر بافت (مثلا بخشی با سطح 26 میلیمترمربع) در مقایسه بابرشهای بزرگتر، باندهای بهتری در ژل ایجاد می کردند. با تقلیل سطح برش ، احتمالا عوامل مهاری درونی کمتر به روش واکنش pcr راه می یابند. در ادامه این پژوهش برای حصول داده های قابل ارائه آماری، باید تجربیات را با همین سطوح بافتی تکرار کرد. با نمونه برداری به وسیله چسب نشاسته (clag) می توان سطح برشها را به کمتر از 5 میلیمترمربع تقلیل داد و بخش مورد نظر را پس از علامتگذاری از روی لام برداشت . علاوه بر این بابررسی برشهای متوالی، می توان ویژگیهای سلولهای سرطانی واقع در کانون خاصی از توده توموری را تعیین نمود. در نهایت با استفاده از برشهای نمونه های منجمد خشک شده می توان بررسیهایی در سطح rna انجام داد. با تلفیق داده های مولکولی در سطح dna (حاصل از pcr)، rna (حاصل از rt - pcr)، پروتئین (حاصل از ایمونوهیستوشیمی) و داده های آسیب شناسی که میزان پیشرفت سرطان را نشان می دهند، امید است بتوان طرح مولکولی برای مراحل پیشرفت سرطان ارائه داد. شاید با این وصف امکان تشخیص این سرطان رد مراحل پیدایش فراهم آید و از میزان مرگ و میر حاصل از آن کاسته شود.

اختلالات شنوایی فراوانترین نقص حس در انسان است، از هر 1000 تولد یک مورد دارای نقص شنوایی است . طبق مطالعات انجام شده ، حدود نیمی از ناشنوایی ها منشا ژنتیکی دارند که حدود 70 تا 80 درصد این نوع ناشنوایی به صورت اتوزومال مغلوب ، 15 تا 20 درصد به صورت اتومازول غالب و 2 تا 3 درصد آن از طریق وابسته به کروموزوم ‏‎x‎‏ و یا بصورت میتوکندریایی به ارث می رسد. همچنین حدود 30 درصد از اختلالات شنوایی ژنتیکی به صورت سندرومیک و 70درصد به صورت غیرسندرومیک هستند.