سال هاست که دو مدل متضاد برای منشا سرطان مطرح شده است. در یک فرضیه چنین استنباط می شود که سلولهای بنیادی بالغ برای شروع فرایند توموزایی ضروری می باشند در حالیکه در فرضیه دیگر چنین ادعا می شود که سلولهای تمایز یافته تمایز خود را از دست داده، باز برنامه نویسی و تبدیل به سلولهای سرطانی می شوند. هدف اصلی در این مطالعه، بررسی فرضیه های مذکور در سرطان معده بود. به همین منظور بیان تعدادی از ژن های دخیل در خودبازسازی سلولهای بنیادی و علاوه بر آن ژنهای باز برنامه نویسی در سرطان ادنوکارسینومای معده مورد بررسی قرار گرفت و در نهایت با تو جه به الگوی بیانی ژنهای مذکور در تومورهای معده، بیان رونوشتهای ns و oct4b1 در رده های سلولی سرطانی معده با استفاده از استراتژی rnai سرکوب و اثرات فنوتیپی و مولکولی مهار آنها مورد بررسی قرار گرفت. در بخش اول این تحقیق بیان بالقوه ژنهای خودبازسازی و باز برنامه نویسی در تومورها، بافتهای غیر توموری، رده سلولی سرطانی معده، ags، با استفاده از روش real-time rt-pcr مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان دادند که بیان واریانتهای ژن oct4 در نمونه های سرطانی نسبت به نمونه های غیر توموری معده افزایش می یابد. نتایج مشابه ای در بررسی بیان ژن نوکلئوستمین مشاهده شد. در بررسی بیان ژنهای sox2 و klf4 نتایج متفاوتی به دست آمد به طوری که در بررسی بیان ژنهای nanog و lin28 عدم بیان این ژنها در نمونه های توموری و غیر توموری مشاهده گردید. در بخش دوم تحقیق، برای بررسی نقش ژنهایی که در سرطان افزایش بیان داشتند بیان آنها با استراتژی rnai مهار گردید. بیان ژنnucleostemin در رده سلولی سرطانی معده، ags، در سطح mrna و پروتئین مورد بررسی قرار گرفت، بررسی جایگاه درون سلولی این پروتئین، با استفاده از روش ایمنوسیتوشیمی فلورسنس، در سلول های ags نشان داد که در این سلولها نیز این پروتئین جایگاه درون سلولی هستکی دارد. در بخش بعدی ، بیان ژن nucleostemin با استفاده از روش rnai مهار شد. نتایج نشان داد که مهار nucleostemin بر روی مورفولوژی سلولهای ags تاثیرات بارزی می گذارد و مورفولوژی این سلولها به فرم شبه مرغ ماهیخوار تغییر می یابد. بنظر می رسد عملکرد nucleostemin غیر وابسته به پروتئین p53 و از نظر کنترل توزیع سلول ها در فازهای مختلف چرخه سلولی به حضور پروتئین های عملکردی klf4 و p21 در این رده سلولی بستگی داشته باشد. آزمایش پیری سلولی نشان داد که nucleostemin به عنوان یک فاکتور ضد پیری در سلولهای ags عمل می کند. در بخش آخر تحقیق، بیان و عملکرد واریانت تازه کشف شده oct4 بنام oct4b1 در سرطان معده مورد مطالعه دقیق قرار گرفت و بیان این واریانت با تکنیک rnai مهار شد. پس از مهار این واریانت سلولها تغییرات مورفولوژی خاصی شبیه به سلولهای غول پیکر چند هسته ای را نشان دادند. در بررسی توزیع چرخه سلولی پس از مهار oct4b1 دو فاز سلولی مشاهده گردید یک فاز مربوط به سلولهایی که دچار آپپتوز شده بودند که برای تایید این دسته از سلولها از کیت annexin-v و سنجش فعالیت caspase3,7 استفاده شد که نتایج حاصل از فلوسیتومتری را تایید می کردند. دسته دیگر سلولهای غول پیکر چند هسته ای که دارای واکوئل های متعددی بودند و با رنگ امیزی گیمسا وجود آنها تایید شد. چنین گفته می شود که این سلولها در برابر القای آپپتوز مقاومند و این حالت را نوعی مقاومت در برابر القای آپپتوز می دانند. پس از این بررسی برای اولین بار مشخص شد که به احتمال فراوان oct4b1 به عنوان یک فاکتور آنتی آپپتوزیس در این سلولها عمل می کند. در کل این یافته ها علاوه بر مشخص نمودن بخشی از مکانیسم های مولکولی درگیر در سرطان معده، می تواند منجر به گسترش دانش کنونی در زمینه تومور مارکرها و درمان سرطان معده گردد.

سلول های بنیادی جنینی موش عموماً از توده سلولی داخلی جنین هایی که در مرحله بلاستوسیت و قبل از لانه گزینی به سر می برند، به دست می آیند. این سلول ها توان آن را دارند که به انواع مختلف سلول ها از جمله سلول های قلبی تمایز یابند. با توجه به اینکه از دست رفتن کاردیومیوسیت ها بر اثر حمله قلبی منجر به نقائص غیرقابل بازگشت در عملکرد قلب می گردد، پیوند سلول بنیادین بعد از سکته قلبی جهت بازیابی عملکرد قلب مورد بررسی قرار گرفته است. در این مطالعه، ابتدا، سلول های بنیادی جنینی از بلاستوسیت فریز شده موش-های نژاد c57bl6، توسط محیط کشت اختصاصی 3i که حاوی سه فاکتور ممانعت کننده از تمایز و حفظ خاصیت پرتوانی سلول های بنیادی می باشد، جدا شدند و سپس جهت اثبات وجود مارکرهای مخصوص سلول-های بنیادی مورد ارزیابی ایمونوسیتوشیمی قرار گرفتند. در مرحله بعد پس از کشت و تکثیر این سلول ها، اثر دو فاکتور آنژیوتانسینii و لوزارتان بر تمایز سلول های بنیادی جنینی موشی به سلول های قلبی مورد بررسی قرار گرفت. پس از تشکیل اجسام شبه جنینی و تیمار سلول ها با آنژیوتانسینii و لوزارتان به مدت 6 روز، اجسام شبه جنینی به پلیت های سلولی منتقل شده و در طول یک دوره 21 روزه، سلول ها توسط میکروسکوپ معکوس از نظر تغییرات مورفولوژیکی و تعداد اجسام شبه جنینی ضربان دار مورد بررسی قرار گرفتند. همچنین، از روش رنگ آمیزی ایمونوسیتوشیمی برای اثبات بیان پروتئین های خاص سلول قلبی، توسط سلول های مورد مطالعه، استفاده گردید. نتایج این مطالعه نشان داد که آنژیوتانسینii می تواند تمایز سلول های بنیادین جنینی موشی به کاردیومیوسیت ها را افزایش دهد.

بازبرنامه ریزی سلول های تمایز یافته انسان به سلول های القا شده پرتوان (ips) در زیست شناسی پایه، توسعه دارویی و پیوند دارای کاربرد می باشد. این کار اولین بار به واسطه بیان چهار فاکتور رونویسی oct4، sox2، c-myc و klf4 انجام شد. تاکنون به منظور بهینه سازی و نزدیک کردن این فن آوری به کاربردهای بالینی تلاش های بسیاری صورت گرفته است، اما همچنان نیاز به مطالعات پایه ای بیشتری بر روی آن وجود دارد. در این تحقیق، سلول های کراتینوسایت از نمونه پوست ختنه گاه انسان جداسازی و کشت شدند. انتقال ژن با استفاده از پلاسمید pcag-gfp بهینه سازی شد. برای ترانسفکشن سلول ها از روش الکتروپوریشن و لیپید کاتیونیک افکتن استفاده شد. پس از آن سلول های ips با استفاده از وکتور پلاسمیدی pcagmkosie تولید شده و از نظر بیان مارکرهای جنینی مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج ترانسفکشن سلول ها با چهار فاکتور رونویسی oct4، sox2، c-myc و klf4 نشان داد سلول های کراتینوسایت در یک فرایند تدریجی و در طول 3-2 هفته بازبرنامه ریزی می شوند، به طوری که در نهایت مارکرهای پرتوانی از جمله آنتی ژن ها و ژن های اختصاصی سلول های es در آن ها بیان می شوند. دودمان های ips تولید شده با استفاده از وکتور پلاسمیدی در این تحقیق، می توانند ابزار ارزشمندی برای مطالعه بر روی سلول های ips و مکانیسم بازبرنامه ریزی باشند. این مطالعات می تواند در نهایت ما را از چگونگی کنترل ژنوم و تمایز سلولی گسترش دهد و از سوی دیگر راهگشای کاربردهای بالینی ایمن سلول های ips باشد.

شبیه سازی پستانداران برای چندین سال با استفاده از روش شکافتگی جنینی در مراحل اولیه و یا انتقال هسته سلول های جنینی به داخل اووسیت، با موفقیت انجام شده است. در حال حاضر شبیه سازی با استفاده سلول های سوماتیک بالغ نیز امکان پذیر است. اگرچه تا حالا 15 سال از تولد اولین پستاندار کلون شده با استفاده از انتقال هسته سلول سوماتیک می گذرد، ولی میزان تولد زاده های زنده در کلونینگ بدون توجه به نوع سلول و نوع گونه حیوانی، بسیار پایین می باشد. با این حال این تکنیک یک ابزار بالقوه مهم برای تحقیقات آتی در زیست شناسی پایه می باشد. در این پژوهش با تزریق مستقیم هسته سلول دهنده به تخمک های فاقد هسته موش، با استفاده از دستگاه piezo-actuated micromanipulator، اقدام به شبیه سازی موش شد. جهت سوپراوولاسیون به موش ماده نژاد b6d2f1تزریق متوالی pmsg وhcg انجام شد. بعد از 15-14 ساعت از تزریق hcg مجموعه اووسیت – کومولوس از اویداکت موش جمع آوری شده و در محیط m2+hy قرار داده شد. بعد از هسته گیری اووسیت هایی که در مرحله متافاز ii قرار داشتند، هسته سلول دهنده (سلول های کومولوس) به این اووسیت ها تزریق شد. به دنبال تزریق هسته، اووسیت ها در محیط فعال سازی قرار داده شدند و تحت شرایط 37 درجه سانتی گراد و 5% co2 انکوبه شدند. جنین هایی که در مرحله دو سلولی بودند به اویداکت موش حامله کاذب انتفال داده شدند. 19 روز پس از انتقال جنین ها، جنین های زنده حاصل شدند. این جنین ها به قفس موش دایه که همزمان با تولد جنین های شبیه سازی شده زایمان کرده بود، جهت تغذیه بهتر انتقال داده شدند. از آنجایی که منشا جداسازی سلول های کومولوس موش های سیاه b6d2f1 بود و موش های کلون شده هم دارای رنگ سیاه بودند، این نتایج بیانگر درست بودن مراحل مختلف آزمایش های انجام شده می باشد.

ژن oct4 یکی از ژن های اصلی و محوری در خصوصیات پرتوانی و خودنوزایی سلولی است و بیان آن علاوه بر سلول های بنیادی، در نمونه های توموری سرطان های مختلف تایید گردیده است. این ژن دارای سودوژن های متعدد و سه واریانت پیرایشی oct4a، oct4b و oct4b1 است. واریانت oct4a نقش اصلی و محوری را در خصوصیت پرتوانی و خودنوزایی سلول های بنیادی سرطانی ایفا می کند و نقش واریانت oct4b هنوز مبهم است. oct4b1 جدیدترین واریانت پیرایشی oct4 بوده و بسیار شبیه oct4b می باشد. این واریانت جدید دارای رفتار بیانی مشابهی با واریانت oct4a در سلول های بنیادی و سرطانی رویانی است بطوریکه مانند oct4a، بیانش در هنگام تمایز به حداقل ممکن کاهش می یابد. به منظور افزایش اطلاعات در مورد نقش زیستی و شکل عملکردی این واریانت بیش بیان این واریانت جدید در سلول های کارسینومای رویانی موش (p19) و کارسینومای رویانی انسان (nt2) و سلول زیگوت موش انجام گرفت. نتایج حاصل نشان داد که بیش بیان این واریانت در سلول های p19 و nt2 و تکوین جنین موش تا مرحله بلاستوسیست هیچ گونه تاثیر فنوتیپی نداشته است اما موش های ترانسژنیک تولید شده دارای فنوتیپ غیرطبیعی بودند. سئوالات زیادی در ارتباط با فنوتیپ های مشاهده شده و واریانت جدید وجود دارد که لازم است در آینده مورد مطالعه قرار بگیرند.

مطالعه حاضربرای ارزیابی نقش سریسین روی اسپرم طی انجماد و اثرآن بر باروری و توسعه جنین در شرایط آزمایشگاهی انجام شد. اسپرم از قسمت اپیدیدیم موش نر جمع آوری وبه محیط های کشت حاوی غلظت های مختلف سریسین(0، 25/0، 5/0 و 75/0 درصد)اضافه شد. تجزیه و تحلیل اطلاعات به دست آمده در قالب یک آزمایش فاکتوریل بررسی شد.نتایج نشان دادکه زنده مانی و جنبایی اسپرم، قابلیت باروری اسپرم و نرخ تشکیل جنین های مراحل دوسلولی و بلاستوسیست دردمای 4درجه ی سانتی گراد به مدت24 ساعت و بعد از انجماد در مقایسه با ساعت0کاهش یافت(05/0>p).هنگامی که اسپرم به مدت 24 ساعت در دمای 4 درجه ی سانتی گراد ذخیره شد و یا بلافاصله پس از استحصال منجمد گردید اضافه کردن مقادیر25/0 و 5/0درصد سریسین به محیط کشت موجب افزایش زنده مانی و جنبایی شد(05/0>p)،این درحالی بود که درساعت 24 پس از انجماد زنده مانی و جنبایی اسپرم با اضافه کردن غلظت های 25/0، 5/0 و 75/0 درصد سریسین به محیط کشت افزایش یافت(05/0>p).

چکیده: نزاع در خصوص مالکیت اموال غیر منقول سابقه ای طولانی دارد شاید بتوان گفت عمر آن از زمانی پیدایش بشر می باشد ، حتی در میان حیوانات گوناگون نیز دیده شده که جهت مشخص نمودن قلمرو خود علائمی را به جا می گذارند که نشان می دهد حدود قلمرو هر یک چه میزان و چه حد می باشد. از طرفی ثبت اموال غیر منقول دارای سابقه ای دیرینه بوده ولی در خصوص مالیکت افراد نسبت به اموال غیر منقول قبل از ثبت در دفتر املاک حداقل در حقوق ایران از زمان ناصرالدین شاه ودر یکی دو قرن اخیر مطرح شده است. مباحث نظری و حقوقی مطرح شده توسط حقوقدانها نیز در خصوص معاملات اموال غیر منقول بوده است ولی در خصوص مسائلی مانند تکلیف اراضی احیاء شده که به ثبت نرسیده اند ، مالکیت نسقهای زراعی و نحوه نقل و انتقال آنهامالکیت اموال غیر منقول پس از ثبت در دفترخانه و قبل از ثبت در دفتراملاک ، چالشهای حقوق ثبت درایران بحث مبسوط و مفصلی صورت نگرفته است، و با وجود بخثهای نظری?در خصوص معایب و محاسن هر نظر از حیث عملی در حقوق ایران بحث نشده؛در واقع در خصوص بستر و زمینه مناسب یا نامناسب جهت اجرای حقوق ثبت که به نوبه خود نحوه اجرای آن به اختلافات ملکی دامن زده پرداخته نشده است که این موضوع به نوبه خود در حقوق ایران موجب عکس العمل قانونگذار در موارد خاص شده که در این پایان نامه موارد مذکور بررسی خواهد شد.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.