بیماری مالتیپل اسکلروزیس (multiple sclerosis) که به اختصار به آن ام اس (ms) گفته می شود از شایعترین بیماریهای مزمن ژنتیکی سیستم اعصاب مرکزی (مغز و نخاع) در سنین جوانی می باشد.در واقع ms یک بیماری مزمن اتوایمیون با واسطه سلولهای t است و در اثر عوامل ناشناخته در یک موجود با وجود زمینه ژنتیکی شروع می شود و از ویژگی های اصلی آن میتوان به التهاب، تخریب میلین و افزایش سلولهای گلیال اشاره کرد.در مناطقی که میلین تخریب شده است پلاک هایی ظاهر می شود .در بیماری ms میلین در قسمت مهمی از مغز، نخاع یا سیستم عصبی مرکزی از بین می رود. وقتی میلین تخریب شد، ارتباط نورون ها کمتر موثر است و سبب به وجود آمدن علائم ms می شود. بعضی از میلین های تخریب شده خودبه خود بازسازی می شوند که توجیه کننده بهبودی بعضی از افراد پس از حمله ms است. تخریب غلاف میلین احتمالاٌ در اثر پاسخ غیر طبیعی سیستم ایمنی بدن می باشد. علت این عملکرد غیر طبیعی سیستم ایمنی هنوز به خوبی شناخته نشده است.احتمالاً چندین عامل مختلف در این روند دخالت دارد که عبارتند از : عفونت ، ژنتیک ، استرس ، نقص ایمنی و عوامل محیطی)افرادی که در مناطق معتدل زندگی می کنند بیشتر از افراد ساکن در مناطق حاره یی دچار ام اس می شوند. از مشاهدات چنین استنباط می شود که میتوکندری در بروز ms نقش دارد. بررسی ها نشان می دهند که زنجیره انتقال الکترون میتوکندریایی در سنتز atp اهمیت دارد و آسیب به سنتز atp یک فاکتور مهم در پاتوژنز بیماریهای نورولوژیکال است.از طرفی اختلال عملکرد زنجیره تنفسی میتوکندریایی در بیماری های نورولوژیکی همچون آلزایمر،پارکینسون و ms گزارش شده است.مطالعات قبلی نشان داده است که فعالیت کمپلکس i زنجیره تنفسی میتوکندری در بافت بدست آمده از ضایعات فعال مزمن مالتیپل اسکلروزیس کاهش یافته است.از طرفی اختلال در زیر واحد کمپلکس i ممی تواند منجر به تخریب آکسون های دمیلینه و دژنراسیون عصبی وتخریب میلین گردد.در طی یک مطالعه پروتئومیکس متوجه شدند که بیان یک سری از پروتئین ها تفاوت معنی داری بین گروه کنترل و مدل eae داشت. یکی از این پروتئین ها زیر واحد nadhدهیدروژناز فلاووپروتئین(ndufv2) از کمپلکس i است که فعالیتهای nadh دهیدروژناز وهمچنین انتقال الکترون را دارد.کاهش بیان پروتئین کد شونده توسط ژن ndufv2 در مدل eae ثابت شده است و چون این مدل ، مدل مناسبی برای بررسی بیماری ms است، احتمال دخیل بودن این ژن در بیماری ms نیز زیاد می باشد. هدف ما در این تحقیق بررسی ارتباط بین میزان بیان این ژن با بیماری ms می باشد.

بیماری مالتیپل اسکلروزیس که به اختصار به آن ms گفته می شود، شایعترین بیماری خودایمنی درسیستم اعصاب مرکزی (یعنی مغز و نخاع) در سنین جوانی می باشد و سه مشخصه اصلی آن التهاب، تخریب میلین و افزایش سلولهای گلیال است. علت msهنوز مشخص نشده اما برابر اطلاعات موجود، بیماری در افراد با استعداد ژنتیکی، بوجود آمده و احتمالا به محرک های محیطی دیگری نیاز دارد. شباهت های بالینی ms با اختلالات میتوکندریایی بیانگر ارتباط بین این دو می باشد و چنین استنباط می شود که میتوکندری در بروز ms نقش دارد. زنجیره انتقال الکترون میتوکندریایی در سنتز atp اهمیت دارد و آسیب به سنتز atp یک فاکتور مهم درپاتوژنز بیماریهای نورولوژیکال همچون آلزایمر،پارکینسون و ms است. در مطالعه صورت گرفته توسط دکتر صنعتی و همکاران، در مدل موشی، انسفالومیلیت اتوایمیون تجربی به وسیله ماده الیگودندروسیت گلیکوپروتئین القا گردید. پروفایل های بیانی پروتئین های سیستم عصبی مرکزی موش های سالم و موش های مبتلا مطالعه گردید. درنتیجه این تحقیقات هشت پروتئین میتوکندریایی که به صورت متفاوت در سیستم عصبی مرکزی بیان شده بودند، شناسایی شدند که از بین آنها 5 پروتئین متعلق به زنجیره تنفسی میتوکندری شامل سیتوکروم اکسیدازc زیرواحد vbوva ، زیرواحد بتاسنتزکنندهatp، ndufs8،ndufv2 بود. در این تحقیق بررسی سطح بیان ژن atp5? در بیماران مبتلا به ms و مقایسه آن با گروه کنترل انجام شد. بدین منظور، استخراج rna از خون 30 فرد مبتلا به ms و 31 فرد سالم به عنوان گروه شاهد انجام شد و پس از سنتز cdna، بیان ژن با استفاده از تکنیک real-time pcr مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که میزان بیان ژن atp5? در بیماران نسبت به افراد سالم کاهش دارد که این کاهش به لحاظ آماری معنی دار می باشد(p value = 0.021). لذا با توجه به نتایج حاصل از این تحقیق، می توان این ژن را کاندیدی برای تشخیص زودهنگام بیماری ms درنظر گرفت، هرچند برای اثبات نقش بیومارکری این ژن نیاز به تحقیقات تکمیلی می باشد.

هورمون محرک فولیکول گاوی (fsh) به خانواده هورمون های گلیکوپروتئینی تعلق دارد که از غده هیپوفیز یا جفت ترشح می شوند. این هورمون یک هترو دایمر می باشد که از زیر واحد آلفا (مشترک در همه هورمون های گلیکوپروتئینی) و زیر واحد بتا (اختصاصی هر هورمون) تشکیل شده است. fsh گاوی در تکنولوژی تولید مثل، مانند سوپراوولاسیون حیوانات مزرعه ای و درمان سندرم پلی سیستیک تخمدان استفاده می شود. همچنین این هورمون برای اهدف بالینی، دامپزشکی و درمان ناباروری کاربرد دارد. تکنولوژی dna نوترکیب ابزار مفیدی جهت تولید fsh عاری از آلودگی های هورمونی، پریونی و ویروسی فراهم می کند. تولید پروتئین نوترکیب در سیستم های بیان یوکاریوتیک مثل pichia pastoris یک روش مطمئن برای تولید fsh گاوی با اهداف درمانی است. همچنین شناسایی پروتئین تولید شده به صورت نوترکیب، توسط آنتی بادی ویژه، صحیح بودن ساختار تغییرات پس از ترجمه پروتئین را تایید می کند. هدف این تحقیق تولید هورمون fsh گاوی در سیستم بیانی pichia pastoris بود. برای این منظور orf کد کننده دو زنجیره آلفا و بتای ژن fsh گاوی به طور جداگانه در وکتور ptz57r/t کلون شد سپس در وکتور بیانی ppic9 ساب کلون گردید و در نهایت توسط واکنش pcr و تعیین توالی تایید شد. دو پلاسمید نوترکیب حاوی زنجیره آلفا و بتا به ترتیب با آنزیم های محدود کننده sali و saci که ایجاد فنوتیپ his+ mut+ gs115 می کنند، خطی شدند. محصول ایجاد شده داخل سلول مستعد مخمر با الکتروپوریشن کوترانسفکت شد و حضور آن در سلول توسط pcr تایید گردید. در ادامه چند کلون جهت بررسی بیان انتخاب شد. سپس، رسوب سلولی کلون های انتخابی در محیط bmmy سوسپانسیون شد و به مدت 4 روز در دمای 30 درجه سانتی گراد قرار گرفت. در طول دوره انکوباسیون، متانول به عنوان القاگر با حجم نهایی 5/0 درصد هر 24 ساعت اضافه شد و هر 6 ساعت نمونه برداری انجام گردید. بیان هورمون fsh گاوی بصورت نوترکیب در محلول رویی و رسوب سلولی مخمر، با تکنیک pcr و وسترن بلات تایید شد.

در غدد تشکیل دهنده ی سیستم اندوکرین، بیماری های خودایمن مختلفی بروز می کند که از جمله مهمترین آنها بیماری گریوز می باشد. گریوز یک بیماری خودایمن غده تیروئید است که حدود 1تا 5% مردم دنیا به آن مبتلا می شوند و 50-80 درصد بیماری های ناشی از پرکاری تیروئید را شامل می شود. اگرچه تا کنون عامل بوجود آورند? این بیماری مورد شناسایی قرار نگرفته است ولی به نظر می رسد که عوامل مختلفی نظیر عوامل ژنتیکی، محیطی و ایمونولوژیک در پاتوژنز بیماری موثر باشند. مطالعات متعدد نشان می دهد بیماری گریوز که متعاقب اختلال در تولرانس و فعالیت سلولهای t ایجاد می شود با تولید آنتی بادیهایی همراه است که با ساختارهای سلولی نظیر پذیرند? هورمون تحریک کنند? تیروئید (tshr) واکنش نشان می دهند. به علاوه بررسی های انجام شده نشان می دهد که سایتوکاین هایی که در جریان این بیماری ایجاد می شوند، نقش مهمی را در فاز اجرایی پاسخ ایمنی و التهابی بازی می کنند و در گسترش این بیماری خودایمن دخالت می کنند. به نظر می رسد که اختلال در تعادل سلولهای th1 و th2، و سایتوکاین های تولید شده توسط آنها، نقش مهمی در پاتوژنز بیماری بازی می کند. در سالهای اخیر، مکانیسم های مولکولی که منجر به تکامل سلولهای th1 و th2 می شود مورد توجه قرار گرفته است. نتایج این مطالعات نشان می دهد که مولکولهای درون سلولی متعددی در تکامل th1و th2، و تولید سایتوکاین های مربوط به آنها موثر می باشند که از جمل? آنها می توان به فاکتورهای نسخه برداری t-bet و gata-3 اشاره کرد که به ترتیب بیان ژنهای th1 و th2 را تنظیم می کنند و نقش مهمی در تمایز سلولهای th بازی می کنند. اهمیت این فاکتورهای نسخه برداری در بیماریهای ایمونولوژیک مختلف نظیر بیماری کرون، کاوازاکی و آسم شناسایی شده است، ولی اطلاعات کمی در مورد نقش آنها در بیماران مبتلا به گریوز در دسترس می باشد و مطالعات بیشتر در این زمینه می تواند به روشن شدن مکانیسم های موثر در ایمونوپاتوژنز بیماری کمک کند. لذا هدف تحقیق حاضر،آنالیز میزان بیان mrna مربوط به t-bet، gata-3، ifn-? و il-4 در سلولهای تک هسته ای خون محیطی (pbmc) بیماران و افراد کنترل و مقایسه میزان بیان آنها بین این دو گروه می باشد. اندازه گیری مقادیر mrna توسط دستگاه applied biosystems stepone انجام شد. نتیجه تحقیق حاضر، افزایش بیان ژن های t-bet و ifn-? و همچنین کاهش بیان ژن های gata-3 و il-4 در بیماران مبتلا به گریوز بود. این نتایج، نشاندهنده مختل شدن تعادل بین دو رده سلولی th1 و th2، و غالبیت رده سلولی th1 بر رده سلولی th2 در مراحل اولیه بیماری است.

پس از آنکه mrna از غده هیپوفیز اسب نژاد توربرد ایرانی استخراج شد، برای سنتز cdna استفاده گردید. هر یک از زیرواحد های پروتئین fsh ، با استفاده از دو جفت آغازگر اختصاصی تکثیر یافتند و سپس بطور جداگانه در حامل ptz57r.t کلون شدند. حامل های نوترکیب به درون سلول باکتری ? dh5منتقل شدند. کلون سازی زیرواحد ها با استفاده از آزمون های تاییدی نظیر واکنش هضم آنزیمی و تعیین توالی، تایید شد. در ادامه توالی های نوکلئوتیدی? و ? از حامل باکتریایی خارج و سپس درون حامل بیانی ppic-9 کلون شدند. دو سازه نوترکیب مجددا در میزبان باکتریایی ? dh5تکثیر یافتند و سپس استخراج گردیدند. سازه نوترکیب ppic-9/fsh? با استفاده از آنزیم برشی sali و سازه نوترکیب ppic-9/fsh? با استفاده از آنزیم برشی saci خطی شدند و بطور همزمان طی فرآیند الکتروپوریشن به درون ژنوم سلول مخمر پیکیاپاستوریس درج گردیدند. سلول های ناقل هر دو زیرواحد با کمک واکنش pcr بر روی ژنوم سلول مخمری تایید و مشخص گردیدند؛ و در محیط کشت بیانی bmmy حاوی متانول کشت داده شدند. نتایج خوانش توالی نوکلئوتیدی زیرواحد fsh? نشان داده است که در ناحیهutr َ 3هورمون مورد مطالعه نسبت به گزارشاتی که تاکنون ثبت شده است، چند تفاوت نوکلئوتیدی مشاهده می شود؛ این تفاوت ها شامل اضافه شدن سه نوکلئوتید در موقعیت 418-413 جفت باز و تغییر یک نوکلئوتید در موقعیت 443 جفت باز می باشد. در این مطالعه، بیان پروتئین نوترکیب fsh اسبی در سیستم ترشحی مخمر پیکیاپاستوریس با استفاده از آزمون های sds-page، وسترن بلاتینگ و رسوب دهی ایمنی تایید شد. این تحقیق نشان داده است که پیکیاپاستوریس سیستم مناسبی برای تولید پروتئین fsh اسبی می باشد و شناسایی پروتئین موردنظر با آنتی بادی اختصاصی نشان دهنده ی انجام اصلاحات پس ترجمه ای صحیح این پروتئین در این سیستم بیانی می باشد

پیوند islet های پانکراسی به عنوان یکی از بهترین روشهای درمان دیابت نوع 1 به شمار می رود. سلولهای بنیادی پرتوان القا شده انسانی (hipscs) که به سلولهای بنیادی رویانی شباهت دارند، امکان تولید سلولهای شبه islet مولد انسولین اختصاصی بیمار را از سلولهای سوماتیک طی برنامه ریزی مجدد سرنوشت سلولی فراهم می کنند. اما روشهای کنونی اغلب بر پایه استفاده از چندین سایتوکاین و بازدازنده مختلف برای هدایت تمایز به سمت رده پانکراسی تکیه دارند. از آنجاکه تولید این القاکننده های تمایز مستلزم صرف هزینه های بالاست، کاربرد روشهای مذکور برای اهداف کلینیکی محدود می گردد. با توجه به نقش میکرو rna ها به عنوان عوامل کلیدی در مراحل مختلف نمو پانکراس، در این مطالعه از یک روش جدید و مقرون به صرفه برای پیشبرد تمایز پانکراسی در سلولهای hips از طریق بیش بیان mir-375 در غیاب فاکتورهای رشد استفاده گردید. پس از تایید خاصیت پرتوانگی سلولهای hips، بررسی تمایز پانکراسی در سلولهای تیمار شده با وکتورهای لنتی ویروسی واجد mir-375 و الیگونوکلئوتیدهای antimir-375 صورت گرفت و میزان بیان این میکرو rna با انجام mirna quantitative rt-pcr در طول دوره تمایز ارزیابی شد. نتایج حاصل از بررسیهای مورفولوژیکی، آنالیز ایمنوسیتوشیمی و تعیین پروفایل بیانی مارکرهای اختصاصی اندوکرینی با qrt-pcr در روزهای 7، 14 و 21 نشان داد که سلولهای شبه islet از تمایز سلولهای بیش بیان کننده mir-375 به دست آمده است. کلاسترهای حاصل با ترشح انسولین به افزایش غلظت گلوکز پاسخ دادند که توانایی عملکردی آنها را in vitro نشان می دهد. طبق دانسته های ما، این مطالعه برای اولین بار روشی را ارائه می دهد که بر اساس آن میکرو rna ها می توانند جایگزینی مناسب برای سایتوکاینها و بازدارنده ها در القای تمایز پانکراسی در سلولهای hips باشند. این روش می تواند بررسی نقش میکرو rna ها در تخصص یافتگی پانکراس را تسهیل کند و امکان استفاده از سلولهای ips اختصاصی بیمار برای سلول درمانی دیابت نوع 1 را افزایش دهد.

بیماری آلزایمر یکی از اختلالات سیستم عصبی وابسته به سن است که بعنوان شایع ترین شکل زوال حافظه شناخته شده است. در حالیکه دلایل ایجاد این بیماری به خوبی مشخص نشده اند، مکانیسم های متعددی در رابطه با مرگ نرونی حاصل از بیماری آلزایمر ذکر شده است. تجمع پپتید آمیلوئید بتا درپلاک های نورونی و رشته های هیپرفسفریله تائو از عوامل اصلی ایجاد آن شناخته می شوند. علاوه بر این، فاکتورهای پاتوفیزیولوژیکی دیگری همانند تشکیل رادیکالهای آزاد، استرس اکسیداتیو، برهم خوردن عملکرد میتوکندری ها، التهاب، فاکتورهای ژنتیکی، عوامل محیطی و آپوپتوز هم در شروع و پیشرفت بیماری موثرند. استرس اکسیداتیو که ناشی از برهم خوردن تعادل بین ایجاد رادیکال های فعال و خنثی شدن آن ها توسط آنزیم های آنتی اکسیدانی است، از عوامل مهم ایجاد و پیشرفت بیماری آلزایمر است که از طرفی خود باعث تجمع پپتید آمیلوئید بتا درپلاک های نورونی و رشته های هیپرفسفریله تائو می شود. همچنین باعث القاء آپوپتوز و التهاب نیز می شود. خوشبختانه سلول های هوازی به مکانیسم های دفاعی متعددی در برابر رادیکل های آزاد مجهزند که از آن جمله می توان به آنزیم های آنتی اکسیدانی کاتالاز و سوپراکساید دیسموتاز اشاره کرد. در این مطالعه اثرات محافظتی الیگوساکارید آلژینات در برابر مرگ سلولی ناشی از استرس اکسیداتیو به صورت وابسته به زمان بررسی شده و مکانیسم احتمالی اثر آن ، به ویژه اثر این ماده بر مسیر های حفاظتی nrf-2، اتوفاژی و میتوفاژی، مورد توجه قرار گرفته است. بدین منظور ازسلول های pc12، که دارای رسپتور فاکتوررشد نورونی هستند، به عنوان مدل سلولی و از هیدروژن پراکساید به عنوان عامل اکسیداتیو استفاده شد. نتایج نشان می دهد آلژینات توانایی حفاظت از سلول های شبه نورونی pc12 در برابر استرس اکسیداتیو و به عبارتی آپوپتوز و التهاب را دارد. از طرف دیگر، این ماده توانایی فعال کردن مسیرهای حفاظت سلولی شامل مسیرهای nrf1، nrf2، اتوفاژی و میتوفاژی را داراست.

بیماری مالتیپل اسکلروزیس (ms) از جمله بیماری های خود ایمنی با واسطه سلول های t در سیستم عصبی مرکزی است که استعداد توارثی، فاکتورهای محیطی و نقص های ایمنی نقش کلیدی را در بیماری زایی آن ایفا می کنند. سیستم ایمنی بدن و ژن های دخیل در آن در پاتوژنز بیماری ms نقش دارند، به طوری که یکی از علل بیماری فعالیت خود بخودی سلول های th1 می باشد. یکی از فاکتور های رونویسی دخیل بر روی مسیر تمایز این سلول ها t-bet است که از طریق القا ایجاد اینترفرون گاما، در تمایز سلول های cd4+ t به سلول هایth1 ضروری است. بیان ژن tbx21 موجب ایجاد فاکتور t-bet می شود که تنظیم کننده کلیدی و فعال کننده برنامه ژنتیکی سلول th1 است. با توجه به حضور پلی مورفیسم ویژه -1514t>c در بیماری-های خود ایمنی مشابه ms و تاثیر بسزای آن بر روی القا یا کاهش بیان ژن tbx21از ناحیه پروموتری، در این پژوهش به بررسی حضور این پلی مورفیسم در بیماری ms پرداخته شد. در تحقیق حاضر، جهت بررسی فرکانس آللی و درصد هتروزیگوسیتی پلی مورفیسم -1514t>c، از 248 بیمار مبتلا به ms و 163 فرد کنترل نمونه گیری صورت گرفت. سپس با بکارگیری تکنیک sscp-pcr، الگوهای شکل گیری تک نوکلئوتیدی ناحیه پروموتری تکثیر یافته مقایسه و توالی یابی شدند. طبق این بررسی، فراوانی آلل -1514t با افزایش بیماری ms ارتباط معنی داری دارد (6/99% در جمعیت بیمار در برابر 1/95% در افراد کنترل، 002/0p=). بنابراین ژنوتیپ cc اثری محافظتی در ابتلا به بیماری ms را گزارش می کند (014/0p=). بطور کلی، نتایج حاصل از این مطالعه می تواند بیان کننده ارتباط بین پلی مورفیسم -1514t>c واقع در پروموتر ژن tbx21 و بیماری خود ایمنی ms در جمعیت ایرانی باشد، اگر چه جهت شناخت نقش ژن tbx21 در بیماری ms نیاز به تحقیقات بیشتری می باشد.

چکیده هورمون محرک فولیکولی گوسفندی (ofsh) یک هورمون گلیکوپروتئینی است که از غده هیپوفیز قدامی ترشح می¬شود و نقشی اساسی در عملکرد سیستم تولید مثلی مهره¬داران ایفا می¬کند. این هورمون یک هورمون هترودایمریک شامل دو زیر واحد آلفا با 92 اسید آمینه و بتا با 111 اسید آمینه است که به¬صورت غیر کوالانسی بهم متصل¬اند. مخمر متیلوتروپ پیکیاپاستوریس یک میزبان ایده¬آل برای تولید پروتئین خارجی است. این مخمر به¬عنوان اقتصادی¬ترین سیستم بیانی یوکاریوتی برای ترشح پروتئین خارجی به داخل محیط کشت شناخته شده است. هدف از این طرح بهینه¬سازی بیان ژن fsh گوسفندی در مخمر پیکیاپاستوریس بود که توسط تنظیم و تغییر شرایط کشت مانند دما، درصد القای متانول، اسیدیته و ظرف کشت میسر می¬شود. برای انجام این تحقیق ابتدا فرایند بیان در یک دوره انکوباسیون 5 روزه در دماهای مختلف (15-18-21-24-27-30-32)، درصد¬های مختلف القای متانول (5/%0-%1-%2-%3)، اسیدیته (4-5-6-7-8) و ظروف کشت متفاوت (زاویه¬دار و بدون زاویه) با سه تکرار انجام شد. پس از پایان فرایند بیان پروتئین نوترکیب ترشح شده در محیط کشت توسط روش tca تغلیظ شد و سپس سطوح بیان در شرایط مختلف محیط کشت با استفاده از تکنیک¬های sds-pade و وسترن بلاتینگ مورد ارزیابی قرار گرفت. نهایتا دما، القای متانول، اسیدیته و ظرف کشت مناسب در طول فرایند بیان ژن، انتخاب شد. نتایج حاصل از sds-page و وسترن بلاتینگ باند پروتئینی تقریبا 18 کیلو دالتون را در محدوده مورد نظر نشان داد. این نتایج نشان داد که تاثیر پارامترهای محیطی روی بیان پروتئین قابل مشاهده است. همچنین این بررسی نشان داد که بهینه¬ترین شرایط کشت، دمای30 درجه سانتیگراد، القای متانول 5/0 درصد، اسیدیته 6 و ظرف کشت زاویه دار (بافل فلاسک) بود.

ژن p73 از نظر عملکرد و ساختار مشابه ژن p53 بوده و در توقف سیکل سلولی و آپوپتوزیز نقش مهمی دارد. پلی مورفیسم این ژن روی بیان ژن اثرگذار می باشد در نتیجه از نظر عملکرد بسیار حایز اهمیت می باشد. در این مطالعه وجود رابطه بین پلی مورفیسم ژن و خطر ابتلا به بیماری پسوریازیس و این که آیا بین پلی مورفیسم و loh و خصوصیات پاتولوژیکی پزشکی بیماران ارتباط معناداری وجود دارد، مورد بررسی قرار گرفته است. از نمونه های تهیه شده از بیماران و نمونه های سالم (خون محیطی) استخراج dna صورت گرفت. نمونه های مورد بررسی شامل بیمار (115=n) ، سالم (161=n) بوده است. تمام نمونه های بیمار از بیمارستان امام خمینی تهران جمع آوری شده ، سن، جنس، نوع بیماری، شدت بیماری، التهاب مفاصل پسوریازیسی از متغیرهای مورد بررسی در این مطالعه بوده است. نتایج حاصل از بررسی پلی مورفیسم gc/at در ژن p73 با خطر ابتلا به بیماری پسوریازیس، ارتباط معناداری را نشان می دهد و رابطه معناداری از loh در ژن مشخص است. تعداد ژنوتیپ ها 63% برای تیپ وحشی (gc/gc) ، 31% برای هتروزیگوت (gc/at)، 6% برای ژنوتیپ موتانت (at/at) در بیماران و 79% برای تیپ وحشی، 19% برای هتروزیگوت و 2% برای تیپ مغلوب در افراد سالم مشاهده گردید. تعداد ژنوتیپ های گوناگون در افراد کنترل سالم و بیماران به طور مشخصی متفاوت بود (015/0p=). افراد بیمار حامل آلل at معمولا درجات شدیدتری از بیماری را نشان می دادند. در مطالعه اخیر مشخص گردید که انواع ژنوتیپ های حامل آلل at ارتباط قوی با بیماری پسوریازیس و ویژگی های کلینیکالی بیماران دارد در حالی که افراد دارای ژنوتیپ gc/gc از لحاظ شدت بیماری درجات بالایی را نشان می دهند، همچنین التهاب مفاصل بیشتر در افراد دارای ژنوتیپ gc/at مشاهده شده است.

مالتیپل اسکلروزیس یکی از معمول ترین بیماری های التهابی و تحلیل برنده دستگاه عصبی مرکزی است و مجموعه ای از عوامل ژنتیکی و محیطی در ایجاد آن نقش دارند. ناحیه کد کننده آنتی ژن گلبول های سفید انسانی(hla) مهمترین ناحیه ای است که با استعداد ابتلا به بیماری ارتباط دارد. تاکنون درمان قطعی برای این بیماری یافت نشده است و اثرات بیماری به کمک داروهای تعدیل کننده بیماری کنترل می شود. یکی از متداول ترین این داروها اینترفرون بتا نام دارد. در این مطالعه با استخراج dna از نمونه خون 61 فرد بیمار مصرف کننده داروی سینووکس، از انواع اینترفرون بتا و 117 فرد سالم، به کمک تکنیک pcr-ssp، وجود یا عدم وجود دو الل hla-drb1*1501 از hlaهای کلاس ii و hla-a*0201 از hlaهای کلاس i بین افراد کنترل و بیمار و همچنین بین بیماران با پاسخ مناسب به دارو و بیمارانی که به دارو پاسخی نداده اند، به منظور یافتن ارتباطی بین این الل ها با استعداد ابتلا به بیماری و نحوه پاسخ دهی به دارو بررسی شد.

هورمون محرک فولیکولی انسانی، یکی از اعضای خانواده ی هورمونهای گنادوتروپینی است. این هورمون گلیکوپروتئینی مانند دیگر اعضای این خانواده، ماکرومولکولی هترودایمر است که از دو زیرواحد تشکیل شده است. زیرواحد عمومی مشترک در تمام اعضای این خانواده و زیر واحد دیگر نامیده می شود. این هورمون بطور طبیعی در باروری زنان و مردان نقش دارد و به عنوان دارو در درمان ناباروری بطور گسترده ای استفاده می گردد. تولید صنعتی این دارو امروزه به دو صورت نوترکیب و استخراجی از ادرار زنان یائسه صورت می گیرد. تولید این هورمون بصورت نوترکیب و با کمک مهندسی ژنتیک مزایایی نسبت به نوع استخراجی از ادرار دارد که از آن قسم می توان مواردی مانند عدم آلودگی باهورمون lh ، عدم آلودگی با عوامل بیماریزای ویروسی و پریونی و همچنین خالص سازی آسان تر را نام برد. در نتیجه تمایل به تولید این دارو بصورت نوترکیب روز به روز افزایش یافته است. تولید این دارو در مقیاس صنعتی هنگامی دارای توجیه است که با کمترین هزینه ممکن، و با بیشترین بازده انجام پذیرد. بدین منظور در این مطالعه سعی شده است که برای کاهش هزینه تولید، تاثیر کاهش میزان سرم جنین گاوی محیط کشت سلول های نوترکیب cho به عنوان یکی از گرانترین ترکیبات محیط کشت، بررسی گردد. علاوه بر این برای بالا بردن میزان بیان این هورمون شرایط محیط کشت مانند دما و ph مد نظر قرار گرفته است. در این مطالعه با تغییر دما در بازه (c°37-c°28) و ph در بازه (6/7-7/6)، دما و ph ای که در آن بیشترین بیان وجود دارد تعیین گردید و در انتها تاثیر این دو عامل بطور همزمان بر میزان بیان هورمون بررسی شد. و مشاهده گردید با تاثیر ph و دمای بهینه ی در این آزمایش که به ترتیب 7 و c°28 می-باشد و در محیط حاوی 3%fbs میزان بیان را تا 14 برابر افزایش داد.

سرطان در کشورهای توسعه یافته و در حال توسعه بترتیب اولین و دومین عامل مرگ می باشد .سرطان معده در جهان بعنوان چهارمین سرطان شایع و دومین عامل مرگ بر اثر سرطان شناخته میشود ویکی از شایعترین بد خیمی ها در سرتاسر جهان می باشد.شیوع این سرطان ناشی از فرایند ایجاد بافت سرطانی در معده در چند مرحله بوده وجزءبیماریهای چند عاملی دسته بندی می شودودلیل آن هم ایجاد سرطان بر اثر وجود عوامل عفونی ،محیطی و ژنتیکی در افراد می باشد در مورد عوامل خطر محیطی ایجاد سرطان معده می توان به نقش عفونت هلیکو باکتر پیلوری ،سبک زندگی و تغذیه اشاره نمودوعوامل ژنتیکی موثر در سرطان شامل تغییرات ژنهای انکو ژنها ،مهار کننده های توموروmicrornaها است که این تغییرات می تواند در طول زندگی فرد ایجاد شده یا از طریق وراثت به فرد رسیده باشد.که این مطالعه با هدف بررسی بیان ژن های cdh1وrunx3 در بافت حاشیه ای سالم وتوموری افراد مبتلابه سرطان معده طراحی وانجام شد.

سلول های اندودرم قطعی می توانند اندام های بسیار مهمی را در بدن تولید نمایند از جمله کبد و پانکراس. برای تولید این سلول ها می توان از تمایز سلول های بنیادی استفاده کرد. در تمایز سلول های بنیادی فاکتورهای رونویسی نقش بسیار مهمی دارند. در این مطالعه ما با استفاده از اطلاعات مربوط به آزمایش ریزآرایه پروفایل بیانی تمایز سلول های اندودرم قطعی را به منظور پیدا مردن مهمترین فاکتورهای رونویسی دخیل در تمایز مورد بررسی قرار دادیم و با استفاده از تکنیک های آزمایشگاهی پیش بینی های خود را تأیید کردیم.

هورمون محرک فولیکولی (fsh) یک هورمون گلیکوپروتئینی است که از غده ی هیپوفیز پیشین ترشح می شود. این هورمون با تحریک تخمک گذاری در زنان و کمک به روند اسپرماتوژنز در مردان نقش مهمی را در تولیدمثل و باروری ایفا می کند. امروزه به علت خلوص بالا و ایمن بودن پروتئین های نوترکیب، تنها از این نوع fsh برای مصارف درمانی استفاده می شود. با توجه به پایین بودن میزان بیان پروتئین ها در لاین های سلولی پستانداران و به منظور افزایش بیان آن ها، از روش های مختلفی استفاده می شود که یکی از آن ها تغییر کدون های ژن مزبور با کدون های رایج در سلول های میزبان است. در این مطالعه کدون های توالی زنجیره بتای هورمون fsh انسانی، با توجه به codon usage سلول های تخمدان همستر چینی (cho)، بهینه و به همراه زنجیره آلفای fsh به درون سلول هایcho ترنسفکت شد. سپس با استفاده از تکنیک هایsds-page و وسترن بلاتینگ بیان پروتیئن fsh در سلول ها تایید و درنهایت از طریق تکنیک الایزا میزان بیان آن سنجیده شد. نتایج این پروژه حاکی از آن است که تغییر کدون های ژن زیرواحد بتای fsh انسانی مطابق با کدون های رایج در سلول های cho، منجر به افزایش چشمگیری در تولید پروتئین نوترکیب fsh می گردد. بنابراین روش فوق روش مناسبی جهت بهینه سازی بیان ژن محسوب می شود.

هورمون fsh ماهی عضوی از خانواده گنادوتروپین ها است که از غده هیپوفیز ماهی ترشح می شود. ساختمان این هورمون از دو زیرواحد ? و ? تشکیل شده است که به صورت غیرکووالان به یکدیگر متصل شده اند. این هورمون در تنظیم فرآیندهای ضروری تولیدمثل مانند گامتوژنز و رشد فولیکولار در ماهی نقش دارد. از مزایای تولید نوترکیب هورمون fsh می توان به اطمینان از عدم وجود آلودگی با سایر هورمون های گلیکوپروتئینی هیپوفیز و همچنین خالص سازی آسانتر اشاره کرد. در این مطالعه از پیکیا پاستوریس به عنوان سیستم بیانی، برای تولید هورمون fsh ماهی استفاده شد. بدین منظور کدون های توالی زنجیره بتای هورمون fsh ماهی، با توجه به codon usage مخمر پیکیا پاستوریس، بهینه شد. از روی rna استخراج شده از غده هیپوفیز، سنتز cdna صورت گرفته و سپس از روی cdna توالی زنجیره آلفا به وسیله pcr تکثیر شد. هر کدام از زیرواحدهای آلفا و بتا به صورت جداگانه درون وکتور بیانی ppic9 کلون شدند. در ادامه زیرواحد بتا به همراه توالی پروموتر و ختم رونویسی وکتور ppic9، به وسیله پرایمرهای طراحی شده بدین منظور، تکثیر و به درون وکتور ppic9 حاوی زنجیره آلفا وارد شد. سپس وکتور حاوی هر دو زیرواحد، خطی و درون ژنوم مخمر درج شد. در نهایت بیان هورمون fsh ماهی توسط تکنیک های sds-page و وسترن بلات تایید شد.

چکیده ندارد.

اسکلروز مولتیپل ‏‎ms‎‏ یک بیماری میلین زداینده مزمن سیستم اعصاب مرکزی با علت ناشناخته است که بیشتر آن را یک بیماری خود ایمن می دانند.